發(fā)布時間：2022-08-23 22:20

　　在脛骨軟骨發(fā)育不良（Tibial Dyschondroplasia,TD）研究中,福美雙已廣泛用于高規(guī)律性和高精確性地誘導TD的發(fā)生。谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶A3（glutathione-S-transferase A3,GSTA3）作為GSTs家族中的一員,主要參與機體的解毒,抗氧化應(yīng)激,類固醇和前列腺素的合成。細胞外脂肪酸結(jié)合蛋白（extracellular fatty acid-binding protein,Ex-FABP）作為一類脂肪酸結(jié)合蛋白,其表達與TD的發(fā)生發(fā)展過程密切相關(guān)。作為血管中最豐富的細胞亞群,雞紅細胞也存在于軟骨區(qū)中。最近證明,雞紅細胞中存在toll樣受體和細胞因子的表達,所以我們猜測雞紅細胞也有助于預(yù)防和治療包括TD在內(nèi)的骨類疾病。本研究通過實驗室前期獲得的紅細胞RNA,運用RT-PCR技術(shù)驗證抗菌肽在紅細胞中的表達,并運用實時熒光定量PCR技術(shù),檢測不同劑量重組雞GSTA3與Ex-FABP蛋白對TD發(fā)生過程中紅細胞抗菌肽的轉(zhuǎn)錄表達變化,以探究重組GSTA3與Ex-FABP蛋白在TD發(fā)生中紅細胞的作用。試驗結(jié)果表明:（1）在雞紅細胞中存在11種抗菌膚的表達,分別為 ... 

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
1 文獻綜述
    1.1 脛骨軟骨發(fā)育不良
        1.1.1 骨骼發(fā)育異常
        1.1.2 正常脛骨軟骨生長板與脛骨軟骨發(fā)育不良的生長板
        1.1.3 脛骨軟骨發(fā)育不良中的基因表達研究
        1.1.4 脛骨軟骨發(fā)育不良的相關(guān)研究方法
    1.2 抗菌肽
        1.2.1 抗菌肽概述
        1.2.2 抗菌肽的分類與結(jié)構(gòu)
            1.2.2.1 防御素
            1.2.2.2 抗菌肽Cathelicidins
            1.2.2.3 抗菌肽LEAP-2
        1.2.3 抗菌肽的表達
            1.2.3.1 防御素的表達
            1.2.3.2 Cathelicidins抗菌肽的表達
            1.2.3.3 LEAP-2的表達
        1.2.4 抗菌肽的生物活性及相關(guān)免疫調(diào)節(jié)作用
            1.2.4.1 防御素的抗菌活性和免疫調(diào)節(jié)功能
            1.2.4.2 Cathelicidins的抗菌活性和免疫調(diào)節(jié)作用
    1.3 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶A3蛋白和細胞外脂肪酸結(jié)合蛋白
        1.3.1 谷胱甘肽硫轉(zhuǎn)移酶概述
        1.3.2 細胞外脂肪酸結(jié)合蛋白概述
2 研究的目的與意義
3 抗菌肽在雞紅細胞中的表達驗證
    3.1 材料和方法
        3.1.1 試驗材料
            3.1.1.1 主要試劑
            3.1.1.2 主要儀器
        3.1.2 試驗方法
            3.1.2.1 各抗菌肽的引物設(shè)計
            3.1.2.2 反轉(zhuǎn)錄
            3.1.2.3 PCR檢測
            3.1.2.4 PCR結(jié)果檢測
    3.2. 試驗結(jié)果
        3.2.1 RT-PCR電泳結(jié)果
    3.3 討論
    3.4 小結(jié)
4 重組GSTA3蛋白對TD肉雞紅細胞中抗菌肽的轉(zhuǎn)錄表達影響
    4.1 材料與方法
        4.1.1 試驗材料
            4.1.1.1 試驗動物
            4.1.1.2 主要試劑
            4.1.1.3 主要儀器
        4.1.2 試驗方法
            4.1.2.1 試驗動物的分組及處理
            4.1.2.2 樣品采集
            4.1.2.3 紅細胞RNA提取及質(zhì)量濃度檢測
            4.1.2.4 紅細胞RNA反轉(zhuǎn)錄
            4.1.2.5 建立Real-time PCR反應(yīng)體系
            4.1.2.6 實驗數(shù)據(jù)的收集、處理和分析
    4.2 試驗結(jié)果
        4.2.1 TD模型的鑒定
        4.2.2 紅細胞RNA質(zhì)量檢測結(jié)果
        4.2.3 各抗菌肽基因在正常雞紅細胞中的mRNA表達
        4.2.4 重組GSTA3蛋白在TD發(fā)生早期對紅細胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表達水平的影響
        4.2.5 重組GSTA3蛋白在TD恢復期對紅細胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表達水平的影響
    4.3 討論
    4.4 小結(jié)
5 重組EX-FABP蛋白對TD肉雞紅細胞中抗菌肽的轉(zhuǎn)錄表達影響
    5.1 材料與方法
        5.1.1 試驗材料
            5.1.1.1 試驗動物
            5.1.1.2 主要試劑
            5.1.1.3 主要儀器
        5.1.2 試驗方法
            5.1.2.1 試驗動物的分組及處理
            5.1.2.2 樣品采集
            5.1.2.3 紅細胞RNA提取及質(zhì)量濃度檢測
            5.1.2.4 紅細胞RNA反轉(zhuǎn)錄
            5.1.2.5 建立實時熒光定量PCR反應(yīng)體系
            5.1.2.6 實驗數(shù)據(jù)的收集、處理和分析
    5.2 試驗結(jié)果
        5.2.1 TD模型的鑒定
        5.2.2 紅細胞RNA質(zhì)量檢測結(jié)果
        5.2.3 重組Ex-FABP蛋白在TD早期對紅細胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表達水平的影響
        5.2.4 重組Ex-FABP蛋白在TD恢復期對紅細胞中AvBD1、AvBD2、AvBD4、AvBD6、AvBD7、LEAP-2、NK-lysin和CATH-2的mRNA表達水平的影響
    5.3 討論
    5.4 小結(jié)
全文結(jié)論
參考文獻
ABSTRACT
致謝



本文編號：3678588