本研究在對湖南省蛇華首屬線蟲感染情況調(diào)查的基礎(chǔ)上,對3種蛇華首屬線蟲進行了形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)鑒定,旨在為防治蛇線蟲病提供科學(xué)依據(jù)。 本研究的第一部分對湖南省10個地區(qū)的蛇華首屬線蟲感染情況進行調(diào)查。結(jié)果顯示,總感染率為39.36%,平均感染強度為15.66條／只（11.22～19.33條／只）,該線蟲為優(yōu)勢蟲種。受感染的蛇出現(xiàn)消化道癥狀與病變,故該線蟲對蛇的危害程度頗大。 本研究的第二部分用形態(tài)學(xué)方法鑒定。印度華首線蟲、環(huán)蛇華首線蟲與短首華首線蟲為分布于湖南省的3個蟲種。 本研究的第三部分對3個種21株華首屬線蟲ITS基因進行克隆與序列分析。其ITS基因片段長度為750bp-797bp,種內(nèi)相似性均高于98.4%,而種間相似性較低,為80%～89%。采用NJ法構(gòu)建的種系發(fā)育樹顯示,同種均位于同一分支上,其所屬的分支與其他線蟲所屬分支相隔較遠。這與形態(tài)學(xué)得到的結(jié)果相一致,表明基于ITS基因的種系分析方法較為準確,ITS基因可作為蛇華首線蟲可靠的分子遺傳標記。 本研究在我國系首次對蛇華首線蟲的感染情況進行全面而系統(tǒng)的調(diào)查并首次對該線蟲進行分子生物學(xué)研究,為該線蟲的分... 

【文章頁數(shù)】：83 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 蛇類養(yǎng)殖的重要性
        1.1.1 蛇的種類、分布與生態(tài)學(xué)意義
        1.1.2 蛇類的養(yǎng)殖與開發(fā)利用
        1.1.3 蛇類的資源現(xiàn)狀與養(yǎng)殖前景
    1.2 蛇的線蟲病
        1.2.1 種類與分布
            1.2.1.1 概況
            1.2.1.2 蛔蟲
            1.2.1.3 顯首科華首屬線蟲
        1.2.2 危害
            1.2.2.1 對蛇本身的危害
            1.2.2.2 對人類的危害
    1.3 利用ITS基因?qū)ι呷A首線蟲進行鑒定
    1.4 研究內(nèi)容與目的意義
        1.4.1 研究內(nèi)容
        1.4.2 研究目的與意義
第二章 湖南省蛇華首屬線蟲感染情況調(diào)查
    2.1 材料
        2.1.1 樣品來源
        2.1.2 試驗器材
        2.1.3 試驗試劑
    2.2 方法
        2.2.1 蟲體采集
        2.2.2 蟲體處理
            2.2.2.1 蟲體固定
            2.2.2.2 蟲體透明
            2.2.2.3 蟲體制片
        2.2.3 蟲體觀察
        2.2.4 判定依據(jù)
    2.3 結(jié)果
        2.3.1 不同地區(qū)蛇華首線蟲感染情況
        2.3.2 不同品種蛇華首線蟲感染情況
        2.3.3 感染華首線蟲蛇的臨床癥狀與胃腸道病變
    2.4 討論與小結(jié)
第三章 蛇華首屬線蟲的形態(tài)學(xué)鑒定
    3.1 材料
        3.1.1 蟲體樣品
        3.1.2 試驗器材
        3.1.3 試驗試劑
    3.2 方法
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 寄生蟲眼觀形態(tài)
        3.3.2 寄生蟲鏡檢形態(tài)
            3.3.2.1 印度華首線蟲
            3.3.2.2 環(huán)蛇華首線蟲
            3.3.2.3 短首華首線蟲
    3.4 討論與小結(jié)
第四章 蛇華首屬線蟲ITS序列分析
    4.1 材料
        4.1.1 蟲體樣品
        4.1.2 主要儀器與試劑
            4.1.2.1 儀器
            4.1.2.2 試劑
        4.1.3 配制溶液和培養(yǎng)基
            4.1.3.1 配制培養(yǎng)基
            4.1.3.2 配制溶液
            4.1.3.3 轉(zhuǎn)化載體細胞
    4.2 試驗步驟
        4.2.1 蟲體DNA的制備
            4.2.1.1 試驗用蟲體的準備
            4.2.1.2 蟲體DNA的提取
        4.2.2 華首屬線蟲ITS基因的PCR擴增及克隆
            4.2.2.1 瓊脂糖凝膠電泳及結(jié)果觀察
            4.2.2.2 PCR產(chǎn)物的純化與連接
            4.2.2.3 重組質(zhì)粒的轉(zhuǎn)化與菌落的PCR鑒定
        4.2.3 ITS序列測定與分析及其種系發(fā)育分析
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 ITS序列的PCR擴增結(jié)果
        4.3.2 ITS序列測定結(jié)果
        4.3.3 ITS基因序列差異性分析
        4.3.4 基于ITS基因構(gòu)建種系發(fā)育樹
    4.4 討論與小結(jié)
第五章 結(jié)論與創(chuàng)新點
    5.1 結(jié)論
    5.2 創(chuàng)新點
參考文獻
本論文常用英文縮寫
附圖 核糖體DNA重復(fù)序列
致謝
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3678147