利用胰蛋白酶消化法從X期雞胚中分離胚胎干細(xì)胞（embryonic stem cells,ESCs）,以雞胚成纖維細(xì)胞為滋養(yǎng)層,進(jìn)行體外培養(yǎng),采用形態(tài)法和標(biāo)志分子檢測(cè)對(duì)獲得的干細(xì)胞進(jìn)行鑒定。結(jié)果顯示,獲得典型的呈巢狀或島狀的雞胚胎干細(xì)胞（chicken embryonic stem cells,cESCs）克隆,細(xì)胞堿性磷酸酶（alkaline phosphatase,AKP）染色呈藍(lán)紫色,表明具有較高的內(nèi)源性AKP活性;胚胎階段特異性表面抗原SSEA-1（stage specific embryonic antigen 1,SSEA-1）鑒定結(jié)果呈陽(yáng)性,顯示cESCs克隆具有多能性。本試驗(yàn)成功分離出cESCs,可體外培養(yǎng)并保持未分化狀態(tài)及多能性。 

【文章頁(yè)數(shù)】：4 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)材料
    1.2 試驗(yàn)試劑
    1.3 CEF飼養(yǎng)層的制備
    1.4 胚盤(pán)細(xì)胞分離
    1.5 cESCs的傳代及體外培養(yǎng)
    1.6 cESCs的鑒定
        1.6.1 堿性磷酸酶活性鑒定
        1.6.2 SSEA-1鑒定
2 結(jié)果
    2.1 cESCs的分離培養(yǎng)
    1.2 cESCs的鑒定
        1.2.1 AKP染色
        1.2.2 SSEA-1鑒定
3 討論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]人胚胎干細(xì)胞建系的研究進(jìn)展[J]. 陳枕枕,牛昱宇.  生命科學(xué). 2018(08)
[2]雞胚胎干細(xì)胞的體外培養(yǎng)和鑒定[J]. 何文俊,劉紅,葉玲玲,李世崇,王啟偉,陳昭烈.  生物技術(shù)通報(bào). 2013(07)
[3]雞胚胎干細(xì)胞分離方法和培養(yǎng)體系的優(yōu)化[J]. 張曼玉,陳志勝,計(jì)慧琴,陳勝峰,劉本杰,鄧銜柏,王丙云,袁立,江青艷.  中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2011(45)
[4]雞胚胎干細(xì)胞分離培養(yǎng)和單細(xì)胞克隆的制備[J]. 吳信生,何先紅,戴建明,田智泉,楊海燕,徐琪,李碧春.  中國(guó)家禽. 2008(22)
[5]雞胚胎干細(xì)胞的分離和培養(yǎng)[J]. 戴建明,何先紅,趙文明,吳信生,李碧春.  中國(guó)畜牧雜志. 2007(19)
[6]畜禽胚胎干細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 郝小靜,杜立新,孫允東,周琳.  當(dāng)代畜牧. 2002(03)



本文編號(hào)：3676189