研究背景與目的:潔凈良好的禽舍環(huán)境是家禽健康生長(zhǎng)的重要前提和保障。隨著集約化、標(biāo)準(zhǔn)化程度的不斷提高,現(xiàn)代家禽舍多采用自動(dòng)上料清糞、自動(dòng)控溫控濕控風(fēng)的層疊式籠養(yǎng)模式。但是,由于飼養(yǎng)密度高、籠器具密集,舍內(nèi)溫濕度和通風(fēng)量不均勻,各類粉塵、有害氣體、微生物及代謝產(chǎn)物等形成的氣溶膠濃度隨家禽日齡增加而增加,對(duì)家禽和飼養(yǎng)人員的健康造成極大的威脅。過高濃度的PM2.5損傷呼吸系統(tǒng)后引起的宿主免疫功能受損可能引起細(xì)菌性繼發(fā)感染,使機(jī)體產(chǎn)生更強(qiáng)烈的炎癥反應(yīng),加重肺部損傷。本研究主要探究不同養(yǎng)殖周期禽舍內(nèi)PM2.5的微生物組成結(jié)構(gòu)的差異,并進(jìn)一步研究PM2.5與綠膿桿菌協(xié)同誘導(dǎo)呼吸系統(tǒng)炎癥損傷及相關(guān)分子機(jī)制。研究方法:對(duì)肉雞不同生長(zhǎng)階段（3日齡、22日齡和40日齡）禽舍中的顆粒物（PM2.5）樣本進(jìn)行采集,通過掃描電鏡觀察顆粒物的形態(tài)差異進(jìn)行觀察,并對(duì)禽舍微生物氣溶膠利用16S r DNA序列分析技術(shù),對(duì)樣本中細(xì)菌的多樣性和相對(duì)豐度進(jìn)行表征。其次,分別通過體外實(shí)驗(yàn)和體內(nèi)實(shí)驗(yàn)探究未滅活PM2.5、滅活PM2.5（PM2.5^—）與綠膿桿菌的協(xié)同致炎效果。（1）PM2.5對(duì)RAW264.... 

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
致謝
摘要
Abstract
第1章 引言
    1.1 大氣顆粒物
    1.2 PM2.5的成分
        1.2.1 PM2.5的化學(xué)成分
        1.2.2 PM2.5的生物成分
        1.2.3禽舍PM2.5
    1.3 PM2.5的危害
        1.3.1 PM2.5對(duì)人體的危害
        1.3.2 PM2.5對(duì)家禽的危害
        1.3.3 PM2.5對(duì)呼吸系統(tǒng)的影響
    1.4 PM2.5影響呼吸系統(tǒng)的作用機(jī)制
        1.4.1 線粒體損傷
        1.4.2 細(xì)胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)失衡
        1.4.3 氧化損傷與炎癥損傷
        1.4.4 細(xì)胞自噬與細(xì)胞凋亡
    1.5 PM2.5對(duì)巨噬細(xì)胞的影響
    1.6 綠膿桿菌的致病機(jī)制
        1.6.1 綠膿桿菌的危害
        1.6.2 綠膿桿菌的致病機(jī)制
    1.7 NF-κB信號(hào)通路與炎癥
        1.7.1 NF-κB/Rel家族蛋白
        1.7.2 NF-κB的生物學(xué)意義
        1.7.3 NF-κB信號(hào)通路的激活
    1.8 研究目的
第2章 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 細(xì)胞
        2.1.2 綠膿桿菌
        2.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
        2.1.4 主要儀器
        2.1.5 主要試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 樣品采樣地點(diǎn)與時(shí)間
        2.2.2 樣品采集及處理
        2.2.3 掃描電鏡觀察顆粒物(PM2.5)的形態(tài)觀察
        2.2.4 微生物多樣性分析
        2.2.5 PM2.5顆粒物混懸液的制備
        2.2.6 綠膿桿菌的培養(yǎng)
        2.2.7 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.8 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
        2.2.9 NO檢測(cè)
        2.2.10 細(xì)胞中IL-6、IL-8及TNF-α的檢測(cè)
        2.2.11 細(xì)胞中NF-κB相關(guān)蛋白的檢測(cè)
        2.2.12 呼吸道模型的建立
        2.2.13 小鼠肺組織病理學(xué)觀察
        2.2.14 小鼠血清中IL-6、IL-8及TNF-α的檢測(cè)
        2.2.15 小鼠肺組織中IL-6、IL-8、TNF-α的檢測(cè)
        2.2.16 肺組織中NF-κB相關(guān)蛋白的檢測(cè)
        2.2.17 分析方法
第3章 結(jié)果
    3.1 禽舍PM2.5形態(tài)觀察
    3.2 禽舍PM2.5濃度變化及細(xì)菌微生物多樣性
        3.2.1 PM2.5的濃度變化
        3.2.2 禽舍PM2.5細(xì)菌微生物多樣性
    3.3 綠膿桿菌協(xié)同PM2.5體外致炎實(shí)驗(yàn)
        3.3.1 PM2.5 可抑制RAW264.7 細(xì)胞增殖并促進(jìn)NO表達(dá)
        3.3.2 PM2.5 協(xié)同綠膿桿菌促進(jìn)RAW264.7 細(xì)胞中IL-6、IL-8和TNF-α表達(dá)
        3.3.3 PM2.5 協(xié)同綠膿桿菌激活RAW264.7 細(xì)胞中的NF-κB途徑
    3.4 綠膿桿菌協(xié)同PM2.5體內(nèi)致炎實(shí)驗(yàn)
        3.4.1 小鼠狀態(tài)觀察
        3.4.2 PM2.5協(xié)同綠膿桿菌刺激使小鼠體重持續(xù)下降
        3.4.3 PM2.5協(xié)同綠膿桿菌刺激加重小鼠肺部損傷
        3.4.4 PM2.5 協(xié)同綠膿桿菌促進(jìn)小鼠血清和肺組織中IL-6、IL-8和TNF-α表達(dá)
        3.4.5 PM2.5 協(xié)同綠膿桿菌激活小鼠肺組織中的NF-κB信號(hào)通路
第4章 討論
    4.1 顆粒物(PM2.5)的形態(tài)分析及細(xì)菌多樣性分析
    4.2 綠膿桿菌協(xié)同PM2.5對(duì)炎癥的影響
第5章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)歷


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]The effects of autophagy on vascular endothelial cells induced by airborne PM2.5[J]. Zhixiang Zhou,Tong Shao,Mengnan Qin,Xiaoyan Miao,Yu Chang,Wang Sheng,Fengshang Wu,Yunjiang Yu.  Journal of Environmental Sciences. 2018(04)



本文編號(hào)：3665838