發(fā)布時間：2017-05-13 23:01

  本文關(guān)鍵詞：褪黑素和鹽酸多巴胺對羊精液低溫保存效果的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：隨著羊人工授精技術(shù)的大規(guī)模推廣與應(yīng)用,養(yǎng)殖企業(yè)和養(yǎng)殖戶對羊精液的需求量也越來越大。然而,羊精液低溫保存后存在保存時間短、精子活率低、受胎率不高等問題,這嚴重制約著我國養(yǎng)羊業(yè)的發(fā)展。羊精液低溫稀釋劑的深入研究將對加快育種進程、保持和擴大種群中優(yōu)秀種公羊的優(yōu)良基因等起到至關(guān)重要的作用。因此,探究高效穩(wěn)定的羊精液低溫稀釋液配方成為關(guān)鍵,并且抗氧化物及低溫保護劑的研究成為羊精液保存的有效研究導向。本試驗選取褪黑素和鹽酸多巴胺,探討其在羊精液低溫保存過程中的效果,首先從五種低溫稀釋劑中篩選出最佳保存效果的配方,然后向此配方中分別添加10、20、40、80 mg/L的褪黑素以及1、2、4、8 mg/L的鹽酸多巴胺,通過檢測精子常規(guī)指標、線粒體活性、總抗氧化能力(T-AOC)、丙二醛(MDA)含量以及過氧化氫酶(CAT)等,分析其對羊精液低溫保存效果的影響。本研究獲得的主要結(jié)果如下:1.在5種低溫保存稀釋液中,“配方3”保存效果最好,其主要成分是葡萄糖1.15 g、D-果糖1.45 g,PVA(聚乙烯醇)0.25 g、檸檬酸鈉1.17 g、乙二胺四乙酸0.23g、碳酸氫鈉0.125 g、青霉素5000IU、鏈霉素0.1 g。在羊精液保存第5 d時,精子活率為45.42%、精子質(zhì)膜完整率為47.24%、頂體完整率61.26%,顯著高于其他組(P0.05)�！芭浞�3”保存后精子的有效保存時間為3.2d,其次為“配方2”。在有效保存時間內(nèi),“配方2”稀釋保存羊的精子活率、頂體完整率、質(zhì)膜完整率顯著低于“配方3”(P0.05),但顯著高于“配方4”和“配方5”(P0.05);“配方1”的保存效果最差,顯著低于其他組(P0.05)。因此,將“配方3”作為后續(xù)研究的基礎(chǔ)稀釋劑。2.以“配方3”為基礎(chǔ)稀釋液,分別添加不同濃度的褪黑素,表明隨著褪黑素濃度的添加,各處理組精子活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整率、線粒體活性及精液中T-AOC濃度呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢,精液中MDA含量則呈相反變化趨勢。當褪黑素添加濃度為20 mg/L的時,精液保存5 d后,精子活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整率和線粒體活性分別為49.73%、49.02%、67.43%和49.15%,顯著高于其他組(P0.05)。當褪黑素添加濃度為40 mg/L時,羊精液保存效果差于20 mg/L處理組,但精子線粒體活性、精液中T-AOC和MDA含量兩組間差異不顯著(P0.05)。當褪黑素添加濃度為80 mg/L時,保存5 d各項指標均低其他組。因此,褪黑素最佳添加濃度為20 mg/L,而濃度大于40 mg/L時不利于羊精液保存。3.以“配方3”為稀釋液分別添加不同濃度的鹽酸多巴胺,表明添加適量的鹽酸多巴胺有利于提高羊精液保存,其中當鹽酸多巴胺的添加濃度為2 mg/L時保存效果最佳;保存5d后精子活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整、線粒體活性、T-AOC和CAT活性,分別為46.86%、49.22%、65.85%、46.25%、2.51 IU/mL和2.82U/mL顯著高于其他各組(P0.05)。當鹽酸多巴胺的添加濃度達到4 mg/L時,保存1 d開始,各項指標明顯降低;保存5 d后精子活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整、線粒體活性、T-AOC活性和CAT活性顯著低于其他各組(P0.05)。因此,2 mg/L鹽酸多巴胺為羊精液低溫保存的最適濃度。
【關(guān)鍵詞】：羊精液 低溫保存 褪黑素 鹽酸多巴胺 保存效果
【學位授予單位】：西北農(nóng)林科技大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S826
【目錄】：

• 摘要6-8
• ABSTRACT8-12
• 文獻綜述12-23
• 第一章 羊精液低溫液態(tài)保存的研究進展12-23
• 1.1 羊精液低溫保存稀釋液的研究進展13-18
• 1.1.1 羊精液低溫保存的原理13
• 1.1.2 羊精液低溫保存稀釋液主要成分13-16
• 1.1.3 羊精液低溫保存效果的影響因素16-18
• 1.2 稀釋劑中抗凋亡試劑的研究18-19
• 1.2.1 褪黑素18-19
• 1.2.2 鹽酸多巴胺19
• 1.2.3 其他抗凋亡試劑19
• 1.3 精子品質(zhì)的檢測指標19-21
• 1.3.1 精子活率19-20
• 1.3.2 質(zhì)膜完整率20
• 1.3.3 頂體完整率20
• 1.3.4 抗氧化酶類20-21
• 1.3.5 線粒體活性21
• 1.3.6 受胎率21
• 1.4 本研究的目的和意義21-23
• 試驗研究23-45
• 第二章 羊精液低溫液態(tài)保存的稀釋液研究23-31
• 前言23-24
• 2.1 材料與方法24-26
• 2.1.1 試驗材料24
• 2.1.2 試驗方法24-26
• 2.1.3 檢測指標及方法26
• 2.1.4 統(tǒng)計分析26
• 2.2 結(jié)果與分析26-28
• 2.2.1 五種精液稀釋配方對羊精子活率的影響26-27
• 2.2.2 五種精液稀釋配方對羊精子質(zhì)膜完整率的影響27
• 2.2.2 五種精液稀釋配方對羊精子頂體完整率的影響27-28
• 2.3 討論28-30
• 2.4 小結(jié)30-31
• 第三章 褪黑素對羊精液低溫保存效果的影響31-38
• 3.1 材料與方法31-32
• 3.1.1 試驗材料31-32
• 3.1.2 試驗方法32
• 3.1.3 檢測方法32
• 3.1.4 統(tǒng)計分析32
• 3.2 結(jié)果與分析32-35
• 3.2.1 褪黑素對羊精液低溫保存精子活率、質(zhì)膜、頂體的影響32-34
• 3.2.2 褪黑素對低溫保存后的羊精子線粒體活性影響34
• 3.2.3 褪黑素對低溫稀釋保存后羊精液中T-AOC和MDA濃度的影響34-35
• 3.3 討論35-37
• 3.4 小結(jié)37-38
• 第四章 鹽酸多巴胺對羊精液低溫保存效果的影響38-45
• 4.1 材料與方法38-39
• 4.1.1 試驗材料38-39
• 4.1.2 試驗方法39
• 4.1.3 檢測方法39
• 4.1.4 統(tǒng)計分析39
• 4.2 結(jié)果與分析39-42
• 4.2.1 鹽酸多巴胺對羊精液低溫保存精子活率、質(zhì)膜、頂體的影響39-41
• 4.2.2 鹽酸多巴胺對低溫稀釋保存后羊精子線粒體活性影響41
• 4.2.3 鹽酸多巴胺羊精液中T-AOC濃度和CAT活性的影響41-42
• 4.3 討論42-44
• 4.3.1 鹽酸多巴胺對羊精子保存效果的影響42-43
• 4.3.2 梯度降溫法在羊精液低溫保存過程中的應(yīng)用43-44
• 4.4 小結(jié)44-45
• 結(jié)論45
• 進一步研究內(nèi)容45-46
• 參考文獻46-55
• 致謝55-56
• 作者簡介56

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