氟對小鼠睪丸免疫毒性的研究及精子雙向電泳圖譜的構(gòu)建
發(fā)布時間:2022-02-14 18:52
[目的]本論文通過研究氟暴露下炎癥和氧化應(yīng)激對小鼠睪丸的影響及精子雙向電泳圖譜的構(gòu)建,以期深入探究氟的生殖毒性機制,為進一步實施科學(xué)診斷和靶標藥物設(shè)計提供理論依據(jù)。[方法]8周齡雄性昆明小鼠240只,隨機分成4組,即對照組、低氟組、中氟組、高氟組,對照組供給去離子水,染氟組分別供給含25、50、100mg/LNaF的去離子水。每組60只。染氟期間動態(tài)觀察小鼠的生長狀況及生長性能。分別于45、90、180天后處死,取精子進行透射電子顯微鏡及雙向電泳的研究;取180天小鼠睪丸組織進行組織病理學(xué),QRT-PCR, ELISA以及一氧化氮(NO)含量的測定。[結(jié)果]1與對照組相比,180天氟化鈉暴露組小鼠精子畸形率成上升趨勢,中氟組和高氟組差異顯著。相反,精子密度有所下降,且中氟組差異顯著。各攻氟組體重和睪丸重?zé)o顯著影響。2.睪丸HE染色后顯微鏡下觀察發(fā)現(xiàn),對照組小鼠睪丸的曲細精管結(jié)構(gòu)正常,各級生精細胞完整,整齊排列,層次清晰。管腔內(nèi)可見到大量的成熟精子。低氟組各級生精細胞受到不同程度的損傷,排列不規(guī)則;中氟組曲精細管和生精細胞腫脹,產(chǎn)生大量的空泡;高氟組大量精子細胞落入管腔,精子減少。3.應(yīng)...
【文章來源】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
各組小鼠平均體重變化曲線
5睪丸組織形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果各組實驗小鼠睪丸組織HE染色結(jié)果見圖1-2。從圖中可見:對照組小鼠睪丸曲細精管結(jié)構(gòu)正常,各級生精細胞整齊排列,層次清晰。精原細胞和支持細胞靠近基膜,由基膜向管腔依次排列為不同發(fā)育時期的生精細胞:精原細胞、初級精母細胞、球形精子細胞和延長的精子細胞。管腔內(nèi)可見到大量的成熟精子。低氟組各級生精細胞損傷,排列不規(guī)則;中氟組曲精細管和生精細胞腫脹,產(chǎn)生大量的空泡;高氟組精子細胞落入管腔,精子減少。?喊: -?‘ W 鄉(xiāng)?1 ^ ::-化、鄉(xiāng):f 參‘口'?/. ,' ‘ M::':. i h -?%. --^M'■魏⑶黑謬msftJNaF ‘廣 二: lOOmg/LNaF > “:_尊麗■轉(zhuǎn)。J誠?》‘■'. , ‘’ ‘ 、\ ‘ ’ ’ ; * “ '*■" 、 . f .1第“;十‘‘ -- >.i :,r ■ i 翻? : i圖1-2各組小鼠睪丸HE染色結(jié)果Figure 1-2 Results of HE staining of testis in different groups2.6小鼠睪丸免疫毒性相關(guān)基因mRNA表達的影響2.6.1 RNA的完整性和純度各實驗組每組隨機選取五個提取的RNA樣品瓊脂凝膠電泳。5S、18S、28S三條帶清晰可見,28S比18SRNA條帶亮度接近2: 1,各條帶間無顯著的拖尾說明RNA沒降解也沒受到DNA污染。用核酸蛋白濃度測定儀檢測所有樣品的濃度及純度,結(jié)果顯示A260/280的比值在正常范圍之內(nèi)
2.6.5小鼠睪丸免疫毒性相關(guān)基因旳定量分析結(jié)果與睪丸免疫毒性相關(guān)基因的定量結(jié)果如圖1-3所示?傮w來看,各組小鼠睪丸中IL-17、TNFa、IL-6、IL-1 P > IL-21和TGF-P的mRNA的表達量與對照組相比,有所升高。其中IL-17中氟組與對照組相比差異非常顯著,高氟組呈極顯著;TNFa高氟組呈非常顯著;IL-6中氟組顯著,高氟組極顯著。15-1 0.8-1 1.&1C C C.2 ** .2 .9 嫩?0 ,,, ? (0 ***(0 *** cfl - _ <0① ~r 0) 0.6* -p 0)|L i rh M _■ i! 0.4- Fi . i! ■2-= 5- ■:蘭 ■ J- _J. m養(yǎng)1
【參考文獻】:
期刊論文
[1]IL-17的信號傳導(dǎo)及功能研究[J]. 施沛青,朱書,錢友存. 中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2011(04)
[2]鎘對小鼠精母細胞凋亡及附睪內(nèi)精子質(zhì)量的影響[J]. 李新紅,翁芝瑩,黎琴,陳振亮,徐韻. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報. 2010(04)
[3]iNOS基因和VEGF基因在氟致甲狀腺腫大鼠甲狀腺組織中的表達[J]. 張維東,柴春彥,張勇,江鵬,劉國艷. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2008(03)
[4]蛋白質(zhì)組技術(shù)在腦膠質(zhì)瘤研究中的應(yīng)用進展[J]. 李飛,馮華. 中國神經(jīng)腫瘤雜志. 2008(01)
[5]蛋白質(zhì)組技術(shù)在腦膠質(zhì)瘤研究中的應(yīng)用進展[J]. 李飛,馮華. 中國神經(jīng)腫瘤雜志. 2008 (01)
[6]慢性氟中毒對雄性大鼠睪丸損傷及;撬徜\保護作用的觀察[J]. 陳樹君,孫玉敏,孫秀義,李志紅,李積勝. 環(huán)境與健康雜志. 2008(01)
[7]鎘對小鼠精子和生精細胞超微結(jié)構(gòu)及生精細胞bcl-2、bax基因表達的影響[J]. 金龍金,方周溪,樓哲豐,張嬋,陳錫文. 細胞生物學(xué)雜志. 2006(03)
[8]不同氟水平對生長育肥豬毒性的研究[J]. 陶新,許梓榮,汪以真. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2006(01)
[9]染氟大鼠生精細胞端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達的測定[J]. 江琴,程學(xué)敏,張慧珍,巴月,莊東剛,朱靜媛,崔留欣. 鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2005(04)
[10]高壓電脈沖處理對小鼠精子超微結(jié)構(gòu)及體外受精的影響[J]. 徐營,郭旭東,李霞,其木格,旭日干. 內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2001(04)
碩士論文
[1]氟對小鼠精子趨化性的影響及其機制研究[D]. 陸兆靜.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號:3625085
【文章來源】:山西農(nóng)業(yè)大學(xué)山西省
【文章頁數(shù)】:52 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
各組小鼠平均體重變化曲線
5睪丸組織形態(tài)學(xué)檢測結(jié)果各組實驗小鼠睪丸組織HE染色結(jié)果見圖1-2。從圖中可見:對照組小鼠睪丸曲細精管結(jié)構(gòu)正常,各級生精細胞整齊排列,層次清晰。精原細胞和支持細胞靠近基膜,由基膜向管腔依次排列為不同發(fā)育時期的生精細胞:精原細胞、初級精母細胞、球形精子細胞和延長的精子細胞。管腔內(nèi)可見到大量的成熟精子。低氟組各級生精細胞損傷,排列不規(guī)則;中氟組曲精細管和生精細胞腫脹,產(chǎn)生大量的空泡;高氟組精子細胞落入管腔,精子減少。?喊: -?‘ W 鄉(xiāng)?1 ^ ::-化、鄉(xiāng):f 參‘口'?/. ,' ‘ M::':. i h -?%. --^M'■魏⑶黑謬msftJNaF ‘廣 二: lOOmg/LNaF > “:_尊麗■轉(zhuǎn)。J誠?》‘■'. , ‘’ ‘ 、\ ‘ ’ ’ ; * “ '*■" 、 . f .1第“;十‘‘ -- >.i :,r ■ i 翻? : i圖1-2各組小鼠睪丸HE染色結(jié)果Figure 1-2 Results of HE staining of testis in different groups2.6小鼠睪丸免疫毒性相關(guān)基因mRNA表達的影響2.6.1 RNA的完整性和純度各實驗組每組隨機選取五個提取的RNA樣品瓊脂凝膠電泳。5S、18S、28S三條帶清晰可見,28S比18SRNA條帶亮度接近2: 1,各條帶間無顯著的拖尾說明RNA沒降解也沒受到DNA污染。用核酸蛋白濃度測定儀檢測所有樣品的濃度及純度,結(jié)果顯示A260/280的比值在正常范圍之內(nèi)
2.6.5小鼠睪丸免疫毒性相關(guān)基因旳定量分析結(jié)果與睪丸免疫毒性相關(guān)基因的定量結(jié)果如圖1-3所示?傮w來看,各組小鼠睪丸中IL-17、TNFa、IL-6、IL-1 P > IL-21和TGF-P的mRNA的表達量與對照組相比,有所升高。其中IL-17中氟組與對照組相比差異非常顯著,高氟組呈極顯著;TNFa高氟組呈非常顯著;IL-6中氟組顯著,高氟組極顯著。15-1 0.8-1 1.&1C C C.2 ** .2 .9 嫩?0 ,,, ? (0 ***(0 *** cfl - _ <0① ~r 0) 0.6* -p 0)|L i rh M _■ i! 0.4- Fi . i! ■2-= 5- ■:蘭 ■ J- _J. m養(yǎng)1
【參考文獻】:
期刊論文
[1]IL-17的信號傳導(dǎo)及功能研究[J]. 施沛青,朱書,錢友存. 中國細胞生物學(xué)學(xué)報. 2011(04)
[2]鎘對小鼠精母細胞凋亡及附睪內(nèi)精子質(zhì)量的影響[J]. 李新紅,翁芝瑩,黎琴,陳振亮,徐韻. 應(yīng)用生態(tài)學(xué)報. 2010(04)
[3]iNOS基因和VEGF基因在氟致甲狀腺腫大鼠甲狀腺組織中的表達[J]. 張維東,柴春彥,張勇,江鵬,劉國艷. 中國獸醫(yī)科學(xué). 2008(03)
[4]蛋白質(zhì)組技術(shù)在腦膠質(zhì)瘤研究中的應(yīng)用進展[J]. 李飛,馮華. 中國神經(jīng)腫瘤雜志. 2008(01)
[5]蛋白質(zhì)組技術(shù)在腦膠質(zhì)瘤研究中的應(yīng)用進展[J]. 李飛,馮華. 中國神經(jīng)腫瘤雜志. 2008 (01)
[6]慢性氟中毒對雄性大鼠睪丸損傷及;撬徜\保護作用的觀察[J]. 陳樹君,孫玉敏,孫秀義,李志紅,李積勝. 環(huán)境與健康雜志. 2008(01)
[7]鎘對小鼠精子和生精細胞超微結(jié)構(gòu)及生精細胞bcl-2、bax基因表達的影響[J]. 金龍金,方周溪,樓哲豐,張嬋,陳錫文. 細胞生物學(xué)雜志. 2006(03)
[8]不同氟水平對生長育肥豬毒性的研究[J]. 陶新,許梓榮,汪以真. 中國獸醫(yī)學(xué)報. 2006(01)
[9]染氟大鼠生精細胞端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶表達的測定[J]. 江琴,程學(xué)敏,張慧珍,巴月,莊東剛,朱靜媛,崔留欣. 鄭州大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)版). 2005(04)
[10]高壓電脈沖處理對小鼠精子超微結(jié)構(gòu)及體外受精的影響[J]. 徐營,郭旭東,李霞,其木格,旭日干. 內(nèi)蒙古大學(xué)學(xué)報(自然科學(xué)版). 2001(04)
碩士論文
[1]氟對小鼠精子趨化性的影響及其機制研究[D]. 陸兆靜.山西農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
本文編號:3625085
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