湖北省一株豬肺炎支原體的分離鑒定及其生物學(xué)特性分析
發(fā)布時(shí)間:2022-02-09 13:10
豬支原體肺炎是危害全球養(yǎng)豬業(yè)的重要疫病。為了能對(duì)該病進(jìn)行更好的防控,從湖北地區(qū)規(guī);B(yǎng)殖場(chǎng)疑似臨床病料中成功檢測(cè)并分離獲得了一株豬肺炎支原體,并通過多重PCR鑒別、纖毛黏附試驗(yàn)和流式細(xì)胞術(shù)對(duì)其生物學(xué)特性進(jìn)行了研究。結(jié)果表明,多重PCR鑒別檢測(cè)以及16SrRNA序列測(cè)定進(jìn)一步證實(shí)分離菌株為豬肺炎支原體,命名為Hubei-1;纖毛黏附試驗(yàn)結(jié)果顯示Hubei-1具有較強(qiáng)的纖毛黏附能力;Annexin V-FITC/PI雙染法流式細(xì)胞試驗(yàn)提示Hubei-1能誘導(dǎo)單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞的凋亡;炎癥因子檢測(cè)發(fā)現(xiàn)Hubei-1能激活豬肺泡巨噬細(xì)胞TNF-α的分泌。
【文章來源】:動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2020,41(06)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
TNF-α分泌結(jié)果
豬支原體肺炎疑似病料經(jīng)處理過濾后按照1∶5的比例接種至KM2液體培養(yǎng)基中,37℃恒溫培養(yǎng),在液體培養(yǎng)基連續(xù)傳5代后,樣品培養(yǎng)物顏色變化趨于穩(wěn)定,36h開始變黃,72h后呈現(xiàn)明顯的黃色(圖1)。2.2 PCR鑒定與測(cè)序分析
將采集的豬支原體肺炎臨床疑似樣品按照材料與方法所述的步驟進(jìn)行處理,盲傳后利用豬肺炎支原體鑒別引物,通過PCR方法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示擴(kuò)增出大小約1 000bp的目的片段(圖2),與預(yù)期目的條帶大小一致,提示豬肺炎支原體的存在。隨后對(duì)分離菌株進(jìn)行16SrRNA的PCR擴(kuò)增和序列測(cè)定,并將16SrRNA測(cè)序結(jié)果在NCBI上進(jìn)行分析比對(duì),進(jìn)一步從基因水平上證實(shí)了分離菌株為豬肺炎支原體。2.3 纖毛黏附能力
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬支原體肺炎流行病學(xué)和診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 王華,張清,王君瑋,徐天剛,吳延功,王志亮. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(09)
[2]豬肺炎支原體的分離及PCR鑒定[J]. 張鋒鋼,沈志強(qiáng),高云英,李浩波,王金良,謝印乾,管宇,劉吉山. 中國獸醫(yī)雜志. 2007(04)
本文編號(hào):3617066
【文章來源】:動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2020,41(06)北大核心
【文章頁數(shù)】:5 頁
【部分圖文】:
TNF-α分泌結(jié)果
豬支原體肺炎疑似病料經(jīng)處理過濾后按照1∶5的比例接種至KM2液體培養(yǎng)基中,37℃恒溫培養(yǎng),在液體培養(yǎng)基連續(xù)傳5代后,樣品培養(yǎng)物顏色變化趨于穩(wěn)定,36h開始變黃,72h后呈現(xiàn)明顯的黃色(圖1)。2.2 PCR鑒定與測(cè)序分析
將采集的豬支原體肺炎臨床疑似樣品按照材料與方法所述的步驟進(jìn)行處理,盲傳后利用豬肺炎支原體鑒別引物,通過PCR方法對(duì)其進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示擴(kuò)增出大小約1 000bp的目的片段(圖2),與預(yù)期目的條帶大小一致,提示豬肺炎支原體的存在。隨后對(duì)分離菌株進(jìn)行16SrRNA的PCR擴(kuò)增和序列測(cè)定,并將16SrRNA測(cè)序結(jié)果在NCBI上進(jìn)行分析比對(duì),進(jìn)一步從基因水平上證實(shí)了分離菌株為豬肺炎支原體。2.3 纖毛黏附能力
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]豬支原體肺炎流行病學(xué)和診斷技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 王華,張清,王君瑋,徐天剛,吳延功,王志亮. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(09)
[2]豬肺炎支原體的分離及PCR鑒定[J]. 張鋒鋼,沈志強(qiáng),高云英,李浩波,王金良,謝印乾,管宇,劉吉山. 中國獸醫(yī)雜志. 2007(04)
本文編號(hào):3617066
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