發(fā)布時(shí)間：2022-01-26 03:36

　　為了研究重組雞α干擾素/白細(xì)胞介素-2融合蛋白（rChIFN-α-Linker-ChIL-2，重組融合蛋白）在雞體外的生物學(xué)活性及在雞體內(nèi)的最佳使用劑量，從而為重組融合蛋白作為抗病毒制劑和免疫增強(qiáng)劑在臨床上推廣應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，本研究采用夾心ELISA方法分別檢測重組融合蛋白與抗rChIFN-和rChIL-2單抗發(fā)生特異性免疫反應(yīng)的活性；采用50%細(xì)胞病變抑制法進(jìn)行了重組融合蛋白和rChIFN-蛋白對(duì)照在CEF細(xì)胞上抗水泡性口炎病毒（VSV）和傳染性法氏囊病病毒（IBDV） LX強(qiáng)毒株的活性比較研究；采用MTS法進(jìn)行了重組融合蛋白和rChIFN-α在體外促外周血T淋巴細(xì)胞（PBLC）和脾臟淋巴細(xì)胞增殖活性實(shí)驗(yàn)。將IBDV LX強(qiáng)毒株人工感染37日齡SPF雞，同時(shí)分別選取在CEF細(xì)胞上抗VSV活性單位為200IU、1000IU、3000IU、5000IU的重組融合蛋白和rChIFN-蛋白采用注射方式進(jìn)行雞體內(nèi)活性比較實(shí)驗(yàn)，以篩選重組融合蛋白和rChIFN-蛋白在雞體內(nèi)發(fā)揮最佳抗病毒和免疫增強(qiáng)活性的使用劑量；分別通過臨床觀察、檢測攻毒前和攻毒后（dpc）不同時(shí)間雞體的排毒率、IBDV在不同... 

【文章來源】：河南科技大學(xué)河南省

【文章頁數(shù)】：95 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

rChIFN-蛋白陽性對(duì)照與抗ChIFN-單抗反應(yīng)的ELISA檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線

圖 2-1 rChIFN- 蛋白陽性對(duì)照與抗 ChIFN- 單抗反應(yīng)的 ELISA 檢測標(biāo)準(zhǔn)曲線Fig. 2-1 The ELISA detection standard curve of the 2×serial dilution of recombinant chickenpositive control2. 重組融合蛋中 rChIL-2 的定量重組融合蛋白和標(biāo)準(zhǔn)品蛋白都可以和 rChIL-2 單抗反應(yīng)，測定重組融的 OD450值為 0.637，依據(jù)試劑盒中 rChIL-2 蛋白標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照曲線及其標(biāo)函數(shù)公式 y=43.29x2+161.12x-14.236，計(jì)算重組融合蛋白中 rChIL-2 蛋白含量約為 1.06×103pg.mL-1（圖 2-2）。說明重組融合蛋白中的 rChIL-2 具rChIL-2 單抗發(fā)生特異性免疫反應(yīng)的生物學(xué)活性。

0204060801001201400dpc 3dpc 7dpc 14dpc 21dpc 28dpc食量采（g）nIaket fo fodo攻毒后時(shí)間（d）Days post challenge200IU第1組第2組第3組第4組第11組第12組圖 3-1 200IU 的重組融合蛋白和 rChIFN- 蛋白實(shí)驗(yàn)組雞攻毒后不同時(shí)間采食量變化.3-1 The chickens feed intake changes at different days before and after inoculated by IBDV and 200IrChIFN- -Linker-rChIL-2 complex protein or rChIFN- protein

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[10]雞白細(xì)胞介素-2原核表達(dá)與生物學(xué)活性初探[J]. 王黎霞,王彩霞,徐賡,安健.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2009(11)

碩士論文
[1]雞白細(xì)胞介素6基因的克隆及對(duì)新城疫LaSota疫苗的免疫增強(qiáng)作用研究[D]. 劉蕊娜.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008



本文編號(hào)：3609736