牛奶中的脂肪酸含量及成分決定著牛奶的品質(zhì),而miRNA能夠調(diào)控哺乳動物乳腺中脂質(zhì)代謝途徑,進而影響脂質(zhì)含量及其成分。本研究旨在通過miRNA轉(zhuǎn)染技術(shù)揭示miR-206對牛（Bos taurus）乳腺上皮細胞（bovine mammary epithelial cells, BMECs）中脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達、甘油三酯含量及脂肪酸組成的影響。在牛乳腺上皮細胞中轉(zhuǎn)染60 nmol/L miR-206模擬物和抑制物,應(yīng)用qRT-PCR技術(shù)和生化方法分別檢測脂質(zhì)合成相關(guān)基因的表達和細胞內(nèi)甘油三酯含量,使用氣相色譜檢測脂肪酸組成的變化。結(jié)果表明,miR-206模擬物抑制甘油三酯合成相關(guān)基因線粒體甘油-3-磷酸�；D(zhuǎn)移酶（glycerol-3-phosphate acyltransferase mitochondrial, GPAM）、磷酸甘油�；D(zhuǎn)移酶6 （1-acylglycerol-3-phosphate O-acyltransferase6, AGPAT6）、二酰甘油�；D(zhuǎn)移酶1 （diacylglycerol O-acyltransferase 1, DGAT1）、脂素1 （lipin ... 

【文章來源】：農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報. 2020,28(11)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：9 頁

【部分圖文】：

mi R-206模擬物(A)和抑制物(B)對牛乳腺上皮細胞脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達的影響

mi R-206對牛乳腺上皮細胞中甘油三酯含量的影響

乳腺上皮細胞中的甘油三酯主要在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)合成。脂肪酸從頭合成過程中產(chǎn)生的脂酰輔酶A及外源攝取的脂肪酸被酯化后形成3-磷酸甘油骨架，然后經(jīng)GPAM作用而生成溶血磷脂酸(lysobisphosphatidic acids,LPA);LPA經(jīng)AGPAT家族催化生成磷脂酸，進而在磷脂酸酶作用下發(fā)生去磷酸化反應(yīng)生成甘油二酯，通過DGAT家族催化生成甘油三酯。本研究結(jié)果顯示，在牛乳腺上皮細胞中，過表達mi R-206使甘油三酯合成相關(guān)酶的基因表達均顯著下調(diào)，抑制mi R-206則顯著上調(diào)。GPAM是合成甘油三酯第一步反應(yīng)的限速酶，細胞內(nèi)甘油三酯水平受到GPAM酶含量的調(diào)控(Roy et al.,2002;Roy et al.,2006)，敲除GPAM可顯著降低牛胚胎成纖維細胞中甘油三酯合成和脂質(zhì)代謝相關(guān)基因的表達(Yu et al.,2017)。AGPAT6作為AGPAT家族亞型之一，是小鼠、牛、羊等哺乳動物組織中甘油三酯和三�；视蜕锖铣傻年P(guān)鍵酶，AGPAT6在哺乳期的表達顯著上調(diào)(Bionaz,Loor,2008a)。DGAT1催化三酰基甘油合成中的末端，是甘油三酯合成的關(guān)鍵酶，存在于所有細胞類型中，在甘油三酯合成最活躍的組織和器官中表達最高(Yen et al.,2008)。多個研究結(jié)果表明，DGAT1與乳脂含量顯著相關(guān)(Tabaran et al.,2015;Pacheco-Pappenheim et al.,2019;Tzompasosa et al.,2016)，在牛肌肉細胞中過表達DGAT1可以使三酰基甘油含量升高(Liu et al.,2007)。此外LPIN1屬于LPIN家族，主要有兩方面的功能：一是編碼Mg2+依賴性的磷脂酶，促進甘油三酯和磷脂合成；二是作為轉(zhuǎn)錄協(xié)同刺激因子調(diào)控過氧化物酶體活化過氧化物酶體增殖物激活受體γ(peroxisome proliferators-activated receptors,PPARγ)和PPARα等，進而調(diào)控脂肪酸細胞分化和脂類代謝，對動物脂肪沉積有重要影響。LPIN1具有促進甘油二酯和甘油三酯生物合成的作用(Bionaz et al.,2012)。本研究中，過表達mi R-206使上述與甘油三酯合成相關(guān)的基因表達下調(diào)，同時細胞內(nèi)甘油三酯含量降低。圖2 mi R-206模擬物(A)和抑制物(B)對牛乳腺上皮細胞脂質(zhì)合成相關(guān)基因表達的影響


本文編號：3606468