精液的稀釋和保存是人工授精技術(shù)的關(guān)鍵環(huán)節(jié),而豬人工授精時(shí)廣泛采用的常溫保存豬精液在保存過(guò)程中會(huì)受到各種因素的影響。隨著保存時(shí)間的延長(zhǎng),精液質(zhì)量會(huì)不斷下降,其中一個(gè)重要因素就是精液中活性氧（ROS）的過(guò)量積累對(duì)精子造成的損害。精液中適量的ROS對(duì)精子有一定的生理促進(jìn)作用,而過(guò)量的ROS則會(huì)導(dǎo)致精子產(chǎn)生病理?yè)p傷,影響精子的正常功能。因此,在豬精液常溫保存稀釋液中外源補(bǔ)充抗氧化劑成為提高精液抗氧化能力的一個(gè)重要手段,從而有效降低由過(guò)量ROS引起的精子氧化應(yīng)激的產(chǎn)生。丹參素和迷迭香酸均為天然酚酸類化合物,具有良好的抗氧化活性。本研究在中效型自配稀釋液中分別添加不同濃度的丹參素和迷迭香酸對(duì)豬精液進(jìn)行稀釋,并在17℃保存的不同時(shí)間測(cè)定精子活率、質(zhì)膜完整率、頂體完整率、線粒體膜電位、總抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、過(guò)氧化氫酶（CAT）活性、丙二醛（MDA）含量、ATP含量和3-磷酸甘油醛脫氫酶（GAPDH）活性等指標(biāo),探究?jī)煞N抗氧化劑對(duì)豬精液常溫保存效果的影響,篩選出最適添加濃度。并通過(guò)兩種抗氧化劑的聯(lián)合添加,篩選出兩者的最佳配伍濃度,優(yōu)化稀釋粉配方。本研究獲得以下主要結(jié)果... 

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【部分圖文】：

豬精子質(zhì)膜完整性檢測(cè)Fig.2-1Detectionofboarspermplasmamembraneintegrity

b2.2.3 丹參素對(duì)豬精子頂體完整率的影響用FITC-PNA/DAPI熒光染色法對(duì)豬精子頂體完整性進(jìn)行檢測(cè)（圖2-2），統(tǒng)計(jì)精子頂體完整率。由表2-5可知，保存第1 d，25 μmol/L組精子頂體完整率顯著高于對(duì)照組（P < 0.05）；保存第5 d，25 μmol/L組精子頂體完整率顯著高于對(duì)照組、1 μmol/L組和100 μmol/L組（P < 0.05）；保存第7 d，25 μmol/L組精子頂體完整率顯著高于對(duì)照組和其余各濃度組（P < 0.05）；保存第9 d，25 μmol/L組精子頂體完整率顯著高于對(duì)照組和除50 μmol/L組的其余各濃度組（P < 0.05）。圖 2-2 豬精子頂體完整性檢測(cè)Fig. 2-2 Detection of boar sperm acrosome integrity注：FITC-PNA/DAPI 熒光染色檢測(cè)豬精子頂體完整性。豬精子頂體經(jīng) FITC-PNA 染色呈綠色熒光（白色三角標(biāo)記代表頂體完整的精子，白色箭頭標(biāo)記代表頂體破損的精子），豬精子細(xì)胞核

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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[4]茶多酚和殼聚糖對(duì)豬精液常溫保存效果的研究[D]. 謝東淇.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
[5]白藜蘆醇對(duì)豬精子在常溫保存和冷打擊過(guò)程中的保護(hù)作用[D]. 范曉騰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2016
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[8]GSH和SOD對(duì)豬精液常溫保存效果的研究[D]. 朱林煒.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2015
[9]丹酚酸組分整體藥劑學(xué)性質(zhì)的表征及其釋藥單元的建立[D]. 陳小云.南京中醫(yī)藥大學(xué) 2014
[10]α-硫辛酸、β-胡蘿卜素及兩種維生素對(duì)豬精子冷凍保存效果的影響[D]. 胡曉辰.西北農(nóng)林科技大學(xué) 2013



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