藍(lán)舌病病毒1型VP2、VP5蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定
發(fā)布時(shí)間:2022-01-17 16:34
藍(lán)舌。˙luetongue,BT)是由呼腸孤病毒科環(huán)狀病毒屬藍(lán)舌病病毒(BTV)引起的可感染山羊、綿羊、牛、鹿和駱駝等反芻動(dòng)物的傳染病。該病可經(jīng)媒介昆蟲(如庫(kù)蠓、伊蚊等)傳播,病畜以口腔、鼻腔和胃腸道黏膜發(fā)生潰瘍性炎癥變化為特征。BTV血清型眾多,目前已至少存在26個(gè)血清型。由于BT各個(gè)血清學(xué)之間沒(méi)有交叉保護(hù)作用,因此,盡早鑒別診斷爆發(fā)的BT血清型并在該病流行區(qū)域接種相應(yīng)的疫苗是防治本病的關(guān)鍵。BTV基因組由10個(gè)雙股正鏈RNA組成,10個(gè)節(jié)段基因編碼7種結(jié)構(gòu)蛋白(VP1~VP7)和4種非結(jié)構(gòu)蛋白(NS1、NS2、NS3、NS3a)。其中VP2蛋白和VP5蛋白是BT的血清型特異性抗原。根據(jù)Genbank中BTV1L2基因序列(登錄號(hào):JN848760.1)和M5基因序列(登錄號(hào):JN848763.1)各設(shè)計(jì)1對(duì)引物,從感染BTV1的BHK-21細(xì)胞沉淀中提取病毒RNA,經(jīng)RT-PCR擴(kuò)增L2基因和M5基因。將這兩段基因酶切后分別克隆至pMAL-c4x原核表達(dá)載體和pFastBacHTA真核表達(dá)載體,分別表達(dá)重組的VP2蛋白和VP5蛋白。分別以原核系統(tǒng)表達(dá)的VP2蛋白和VP5蛋白免疫4...
【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
M5、L2基因的PCR擴(kuò)增Fig.2-2PCRamplificationofM5andL2gene
重組質(zhì)粒pC4X-VP2、pC4X-VP5的酶切鑒定和PCR鑒定Fig.2-3IdentificationoftherecombinantplasmidpC4X-VP5andplasmidpC4X-VP2byrestrictedenzymedigestionandPCRM:DNAMarker;1、8:pMAL-C4Xcontrol;2:pC4X-VP2;3:pMAL-C4XdigestedbyBamHⅠandHindⅢ;4:pC4X-VP2digestedbyBamHI;5:pC4X-VP2digestedbyHindⅢ;6:pC4X-VP2digestedbyBamHⅠandHindⅢ;7:Identificationofthe
重組VP2蛋白、VP5蛋白的Western-Blot分析
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]抗藍(lán)舌病病毒VP6和VP7蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[J]. 魏鵬,孫恩成,劉霓紅,楊濤,徐青元,秦永麗,趙晶,馮瑜菲,王文世,張翠云,吳東來(lái). 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(05)
[2]抗原表位研究方法進(jìn)展[J]. 宋帥,李春玲,賈愛(ài)卿,楊冬霞,李淼. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(12)
[3]藍(lán)舌病病毒基因產(chǎn)物及其生物學(xué)功能[J]. 童亮,柴俊,張以芳,肖晶. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2010(07)
[4]藍(lán)舌病的流行狀況及防控措施[J]. 苗志強(qiáng),鄭明學(xué),古少鵬,郭彥,劉崢,李建慧. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2010(09)
[5]國(guó)內(nèi)外藍(lán)舌病檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 韓春來(lái),李全錄,盧旺. 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2010(01)
[6]群特異性藍(lán)舌病病毒單克隆抗體的制備和鑒定[J]. 楊姝,李文超,呂茂民,尹惠瓊,馬玉媛,劉明,章金剛. 生物技術(shù)通訊. 2008(06)
[7]昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的新技術(shù)[J]. 何芳青,吳小鋒. 蠶桑通報(bào). 2008(02)
[8]藍(lán)舌病研究進(jìn)展[J]. 林漢亮,冉多良,王文. 新疆畜牧業(yè). 2008(01)
[9]桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的應(yīng)用及展望[J]. 侯慶華,侯英奇,梁念慈. 廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2006(06)
[10]同時(shí)表達(dá)藍(lán)舌病毒四個(gè)主要結(jié)構(gòu)蛋白可裝配成病毒樣顆粒[J]. 王健偉,姜慧英,屈建國(guó),趙同興,洪濤. 病毒學(xué)報(bào). 2000(02)
碩士論文
[1]藍(lán)舌病病毒8型VP2蛋白單克隆抗體制備及其抗原表位鑒定[D]. 秦永麗.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[2]藍(lán)舌病病毒17型VP2蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定[D]. 王凌鳳.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011
[3]西尼羅病毒NS1蛋白單克隆抗體的制備及B細(xì)胞表位鑒定[D]. 馬健男.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010
本文編號(hào):3595065
【文章來(lái)源】:中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院北京市
【文章頁(yè)數(shù)】:73 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【部分圖文】:
M5、L2基因的PCR擴(kuò)增Fig.2-2PCRamplificationofM5andL2gene
重組質(zhì)粒pC4X-VP2、pC4X-VP5的酶切鑒定和PCR鑒定Fig.2-3IdentificationoftherecombinantplasmidpC4X-VP5andplasmidpC4X-VP2byrestrictedenzymedigestionandPCRM:DNAMarker;1、8:pMAL-C4Xcontrol;2:pC4X-VP2;3:pMAL-C4XdigestedbyBamHⅠandHindⅢ;4:pC4X-VP2digestedbyBamHI;5:pC4X-VP2digestedbyHindⅢ;6:pC4X-VP2digestedbyBamHⅠandHindⅢ;7:Identificationofthe
重組VP2蛋白、VP5蛋白的Western-Blot分析
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]抗藍(lán)舌病病毒VP6和VP7蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[J]. 魏鵬,孫恩成,劉霓紅,楊濤,徐青元,秦永麗,趙晶,馮瑜菲,王文世,張翠云,吳東來(lái). 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2012(05)
[2]抗原表位研究方法進(jìn)展[J]. 宋帥,李春玲,賈愛(ài)卿,楊冬霞,李淼. 動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2010(12)
[3]藍(lán)舌病病毒基因產(chǎn)物及其生物學(xué)功能[J]. 童亮,柴俊,張以芳,肖晶. 中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2010(07)
[4]藍(lán)舌病的流行狀況及防控措施[J]. 苗志強(qiáng),鄭明學(xué),古少鵬,郭彥,劉崢,李建慧. 黑龍江畜牧獸醫(yī). 2010(09)
[5]國(guó)內(nèi)外藍(lán)舌病檢測(cè)技術(shù)研究進(jìn)展[J]. 韓春來(lái),李全錄,盧旺. 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2010(01)
[6]群特異性藍(lán)舌病病毒單克隆抗體的制備和鑒定[J]. 楊姝,李文超,呂茂民,尹惠瓊,馬玉媛,劉明,章金剛. 生物技術(shù)通訊. 2008(06)
[7]昆蟲桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的新技術(shù)[J]. 何芳青,吳小鋒. 蠶桑通報(bào). 2008(02)
[8]藍(lán)舌病研究進(jìn)展[J]. 林漢亮,冉多良,王文. 新疆畜牧業(yè). 2008(01)
[9]桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)的應(yīng)用及展望[J]. 侯慶華,侯英奇,梁念慈. 廣東醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào). 2006(06)
[10]同時(shí)表達(dá)藍(lán)舌病毒四個(gè)主要結(jié)構(gòu)蛋白可裝配成病毒樣顆粒[J]. 王健偉,姜慧英,屈建國(guó),趙同興,洪濤. 病毒學(xué)報(bào). 2000(02)
碩士論文
[1]藍(lán)舌病病毒8型VP2蛋白單克隆抗體制備及其抗原表位鑒定[D]. 秦永麗.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2012
[2]藍(lán)舌病病毒17型VP2蛋白單克隆抗體的制備及其抗原表位的鑒定[D]. 王凌鳳.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011
[3]西尼羅病毒NS1蛋白單克隆抗體的制備及B細(xì)胞表位鑒定[D]. 馬健男.中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2010
本文編號(hào):3595065
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