牛多殺性巴氏桿菌是一種能引起牛出血性敗血癥和牛肺炎的重要病原,給肉牛養(yǎng)殖帶來了巨大的經(jīng)濟損失。根據(jù)其莢膜抗原不同可分為A、B、D、E、F等5種血清型,其中血清B和E型主要導致牛出血性敗血癥,血清A和F型主要引起牛呼吸系統(tǒng)疾病,導致牛肺炎。近年來,隨著肉牛養(yǎng)殖的迅速發(fā)展,肉牛的頻繁調運導致的運輸應激致使牛多殺性巴氏桿菌病的流行呈上升趨勢。目前,我們對牛多殺性巴氏桿菌致病機制還知之甚少,同時針對這方面的研究也較少,本文擬通過研究牛多殺性巴氏桿菌誘導細胞炎性的信號通路,探討牛多殺性巴氏桿菌的致病機制,為牛多殺性巴氏桿菌病新的控制策略及新型疫苗研發(fā)提供思路。本實驗以牛多殺性巴氏桿菌A型（Pm A）和B型（Pm B）菌株分別感染小鼠巨噬細胞RAW264.7,通過q RT-PCR、Western Blot、ELISA等技術手段研究其炎癥機制,其主要目標為:（1）在體外條件下,探究Pm A和Pm B是否可以誘導巨噬細胞的炎性反應;（2）Toll樣受體是否參與炎癥信號通路的激活;（3）NF-κB、MAPK信號通路是否參與了炎癥信號通路的調節(jié);（4）炎性小體是否參與炎癥信號通路的調節(jié);（5）細胞吞噬作用... 

【文章來源】：西南大學重慶市 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：76 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
第一章 文獻綜述
    1.1 牛多殺性巴氏桿菌概述
        1.1.1 牛多殺性巴氏桿菌病
        1.1.2 牛多殺性巴氏桿菌致病機制
    1.2 炎癥機制
        1.2.1 炎癥反應
        1.2.2 炎癥反應的重要核心–IL-1β
        1.2.3 TNF-α
        1.2.4 炎性小體
    1.3 NF-κB信號通路與炎癥反應
    1.4 MAPK信號通路與炎癥反應
        1.4.1 JNK信號通路
        1.4.2 P38信號通路
    1.5 Toll樣受體與炎癥反應
        1.5.1 TLR2
        1.5.2 TLR4
    1.6 細胞吞噬作用對炎癥信號通路的影響
第二章 引言
    2.1 研究目的及意義
    2.2 研究的主要內容
        2.2.1 Pm A、Pm B誘導細胞的炎癥反應
        2.2.2 Pm A、Pm B誘導細胞炎癥反應與Toll樣受體的關系
        2.2.3 Pm A、Pm B誘導細胞炎癥與NF-κB、MAPK信號通路關系
        2.2.4 Pm A、Pm B誘導細胞炎癥反應與炎性小體的關系
        2.2.5 NF-κB、MAPK信號通路與炎性小體
        2.2.6 細胞吞噬作用與Pm A、Pm B誘導炎癥信號通路的激活
    2.3 技術路線
第三章 材料與方法
    3.1 材料
        3.1.1 菌株
        3.1.2 細胞
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要儀器
    3.2 方法
        3.2.1 Pm A、Pm B的培養(yǎng)及PCR鑒定
        3.2.2 小鼠巨噬細胞RAW264.7 的培養(yǎng)
        3.2.3 樣本的制備
        3.2.4 提取小鼠巨噬細胞RAW264.7 總RNA
        3.2.5 c DNA的合成
        3.2.6 SYBR Green I實時定量PCR
        3.2.7 ELISA的檢測
        3.2.8 Western Blot檢測目的蛋白在巨噬細胞中的表達
        3.2.9 數(shù)據(jù)分析
第四章 結果與分析
    4.1 Pm A、Pm B的培養(yǎng)及PCR鑒定
    4.2 q RT-PCR擴增曲線和熔解曲線
    4.3 Pm A、Pm B誘導炎癥反應
    4.4 TLR2、TLR4介導炎癥信號通路的激活
    4.5 NF-κB、MAPK信號通路參與炎癥信號通路的激活
    4.6 炎性小體參與Pm A、Pm B誘導的炎癥信號通路
        4.6.1 炎性小體接頭蛋白ASC的激活
        4.6.2 Pm A、Pm B誘導炎癥信號通路的激活依賴于Caspase-1
        4.6.3 NLRP3、NLRP6參與Pm A、Pm B誘導的炎癥反應
    4.7 NF-κB、MAPK信號通路參與調控NLRP3、NLRP6炎性小體
    4.8 細胞吞噬作用參與炎癥信號通路的激活
第五章 討論與結論
    5.1 討論
    5.2 結論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3588701