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檢測(cè)禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒抗體的ELISA方法的建立及其初步應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2022-01-14 10:41
  禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥是禽類(lèi)的一種重要的致瘤性和免疫抑制性疾病,由反轉(zhuǎn)錄病毒科的禽網(wǎng)狀內(nèi)皮增生癥病毒(Reticuloendotheliosisvirus,REV)引起的雞、鴨、鵝及其他禽類(lèi)發(fā)生的病理綜合征,感染禽可引發(fā)腫瘤、生長(zhǎng)矮小綜合征、腺胃炎、急性網(wǎng)狀細(xì)胞腫瘤、淋巴組織與其他組織慢性腫瘤形成等,特別要注意的是其感染胸腺和腔上囊等主要免疫器官,引起免疫組織器官萎縮,降低家禽的免疫能力,導(dǎo)致免疫抑制,從而為病毒和細(xì)菌的繼發(fā)感染提供了便利,是繼馬立克氏病病毒(Marek’s disease virus,MDV)、禽白血病病毒(Avian leukosis virus,ALV)之后的第三種禽病毒性腫瘤病,是近幾年危害嚴(yán)重的雞病之一。隨著養(yǎng)禽業(yè)的迅速發(fā)展,免疫抑制病越來(lái)越受到人們的重視,尤其是REV已經(jīng)給我國(guó)養(yǎng)禽業(yè)帶來(lái)重大經(jīng)濟(jì)損失,迫切需要REV感染的快速診斷方法。目前雖然國(guó)外有檢測(cè)REV抗體的試劑盒,但國(guó)內(nèi)相關(guān)產(chǎn)品缺乏,且國(guó)外進(jìn)口試劑盒價(jià)格昂貴,在雞場(chǎng)進(jìn)行大批量檢測(cè)成本很高,不能滿(mǎn)足實(shí)際需求,亟需研發(fā)一種簡(jiǎn)便快速,特異性強(qiáng),物美價(jià)廉,適合我國(guó)養(yǎng)禽生產(chǎn)實(shí)際的方法和試劑盒。1.以合成肽為抗原檢... 

【文章來(lái)源】:揚(yáng)州大學(xué)江蘇省

【文章頁(yè)數(shù)】:55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【部分圖文】:

檢測(cè)禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒抗體的ELISA方法的建立及其初步應(yīng)用


圖1-2封閉條件的優(yōu)化??Fig.?1-2?Optimization?of?blocking?Condition??

稀釋度,最佳稀釋倍數(shù),封閉條件,陽(yáng)性血清


?3h??孵育時(shí)間??圖1-2封閉條件的優(yōu)化??Fig.?1-2?Optimization?of?blocking?Condition??3.4.3?—抗最佳稀釋倍數(shù)的確定??將上述試驗(yàn)確定的多肽REV-gp90-p5,以0.469ng/mL的濃度包被酶標(biāo)板,用己知REV??陽(yáng)性血清及?SPF?雞血清分別按?1?:?300、1?:?400、1?:?500、1?:?600、1?:?700、1?:?800、1?:??900、1:1000進(jìn)行稀釋?zhuān)靠自O(shè)2個(gè)重復(fù),測(cè)定各孔的OD450nm,并計(jì)算P/N值,由表??1-5和圖1-3可以看出1?:?400稀釋時(shí)

血清,揚(yáng)州大學(xué),碩士學(xué)位論文


2〇?揚(yáng)州大學(xué)碩士學(xué)位論文???表1-6待檢血清最佳孵育時(shí)間的優(yōu)化???Table.?1-6?Optimization?of?the?optimal?incubation?time?for?serum?to?be?tested???一抗孵育時(shí)間?45min?60min?90min?120min?150min??Positive?0.8985?1.3095?1.521?1.501?1.581??Negative?0.0645?0.07?0.0765?0.081?0.0885??P/N?13.93?18.71?19.88?18.53?17.86??

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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博士論文
[1]我國(guó)部分種雞群REV感染血清學(xué)調(diào)查與亞單位疫苗探索[D]. 李衛(wèi)華.山東農(nóng)業(yè)大學(xué) 2015

碩士論文
[1]不同宿主感染REV情況調(diào)查及分離株gp90基因序列分析[D]. 楊波.東北林業(yè)大學(xué) 2013
[2]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生病病毒囊膜基因gp90的克隆表達(dá)及間接ELISA方法的初步建立[D]. 余沖.四川農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[3]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒env基因蛋白抗原的表達(dá)及其檢測(cè)應(yīng)用[D]. 牛星.廣西大學(xué) 2008
[4]禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增生癥病毒分子生物學(xué)特性的研究[D]. 吉榮.揚(yáng)州大學(xué) 2002



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