乳對新生哺乳動物的發(fā)育至關重要,在能消化固體食物之前是唯一的理想食物。它不僅可以提供營養(yǎng),而且可以提供免疫防御因子。牛乳又是食用乳制品的最主要原料,因而提高牛乳產量改善牛乳品質成為泌乳生物學研究的重點目標之一。乳腺泌乳的過程受到神經和激素的雙重調節(jié),隨著泌乳生物學研究的發(fā)展,泌乳功能相關基因及其信號通路及表觀遺傳調控機制對乳腺發(fā)育泌乳的作用越來越受到研究者的關注。DNA甲基化作為表觀遺傳調控機制之一,以其可調控可遺傳的特性而被應用于農牧業(yè)的遺傳育種試驗中。近些年研究發(fā)現DNA甲基化水平與奶牛的乳品質調控相關,但其作用機制仍在探索中。本研究首先應用原代培養(yǎng)的奶牛乳腺上皮細胞（BMECs）確立DNA去甲基化狀態(tài)奶牛乳腺細胞上皮模型與DNA甲基化狀態(tài)奶牛乳腺上皮細胞模型目的在于探究DNA甲基化水平對奶牛乳腺上皮細胞功能的作用及其機制。實驗應用甲基轉移酶抑制劑5-Aza確立去甲基化奶牛乳腺細胞模型,而后應用細胞活力測試與甲基化敏感限制酶切法檢測去甲基化試劑5-Aza對奶牛乳腺上皮細胞DNA甲基化水平的影響;結果顯示5-Aza能降低BMECs基因組DNA甲基化水平,而后應用過表達甲基轉移酶3α（... 

【文章來源】：東北農業(yè)大學黑龍江省 211工程院校

【文章頁數】：60 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

DNA甲基化過程

基化的活化通路。5-mC能夠在兩個位點進行被化學修飾：胺基基團能被AID/APOBEC修飾（綠色），將5-mC轉移到胸腺嘧啶能夠被加入由 Tet 酶介導的羥基基團，從而形成5-hmC。5-hm胺基基團和羥基甲基基團。AID/APOBEC能夠修飾（綠色）5-一個5-hmC的化學通路中，Tet酶能后進一步氧化（黃色）5-hm-caC。最終，每條通路的產品（Thy、5-hmU、5-fC、5-caC）SMUG1將其切除，并由裸胞嘧啶替代。所有切除修復途徑均用 DNA demethylation pathways. 5-mC can be chemically modified nd the methyl group. The amine group of 5-mC can be deami converting 5-mC into thymine (Thy). The methyl group of 5-mC of a hydroxyl group mediated by Tet enzymes to generate 5-hmCodified at two sites：the amine group and the hydroxymethyl grou(green) 5-hmC to produce 5-hmU. In another chemical pathway f oxidize (yellow) 5-hmC to form5-fC and then 5-caC. Eventuallyhy, 5hmU, 5fC, and 5-caC-are recognized and cleaved off to replted by TDG and/or SMUG1, both components of the base excision(red).

圖1-3 DNA甲基化抑制基因轉錄。Fig. 1-3 Transcription of genes is inhibited by DNA methylation物學中 DNA 甲基化研究進展基化在與乳腺發(fā)育方面的影響，一直以來，人們的研究主要


本文編號：3579015