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旋毛蟲不同發(fā)育時(shí)期基因重組蛋白的免疫原性分析及保護(hù)性研究

發(fā)布時(shí)間:2021-12-09 08:22
  旋毛蟲病是一種重要的食源性人獸共患病,可感染人和100多種哺乳動(dòng)物,當(dāng)人類生食或半生食含感染期幼蟲的肉類時(shí)可感染旋毛蟲病。由于寄生蟲抗原在發(fā)育期間的變異及多種分子參與寄生過程,單獨(dú)使用一種蛋白很難產(chǎn)生有效的免疫保護(hù)效力,因此,多種抗原聯(lián)合疫苗可能產(chǎn)生有效的保護(hù)。本研究選用來自旋毛蟲不同發(fā)育時(shí)期c DNA文庫中的4種高豐度基因:旋毛蟲腸道感染性肌幼蟲期半胱氨酸蛋白酶抑制劑類似物基因(Ts-clp)、旋毛蟲成蟲期絲氨酸蛋白酶基因(Ts-Adsp)、旋毛蟲新生幼蟲期絲氨酸蛋白酶基因(Ts-NBLsp)和旋毛蟲肌幼蟲期絲氨酸蛋白酶抑制劑基因(Ts-serpin)。通過分析實(shí)驗(yàn)室已成功構(gòu)建的4種基因p ET-28a表達(dá)載體重組菌的反應(yīng)原性和免疫原性,以期研制出高效安全的旋毛蟲重組蛋白聯(lián)合疫苗。首先,誘導(dǎo)表達(dá)4種重組蛋白并進(jìn)行親和層析純化。4種重組蛋白均可與旋毛蟲感染豬、鼠血清反應(yīng),說明旋毛蟲不同發(fā)育時(shí)期基因重組蛋白具有較強(qiáng)的反應(yīng)原性。純化后的4種重組蛋白制備多克隆抗體,然后與旋毛蟲ES產(chǎn)物、蟲體粗提物抗原反應(yīng),結(jié)果顯示4種重組蛋白均為高反應(yīng)原性抗原,且其抗血清可與天然抗原產(chǎn)生免疫反應(yīng)。其次,利用... 

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