發(fā)布時間：2021-12-09 03:55

　　氟中毒是一種地球化學性疾病,氟能夠通過血腦屏障對大腦產生毒害作用,造成中樞神經系統(tǒng)的功能障礙。近年來,高氟損傷機體神經系統(tǒng)的研究已經成為氟中毒研究領域的熱點。課題組前期研究發(fā)現(xiàn)氟中毒可以降低子代大鼠學習記憶能力,大腦皮質和海馬結構損傷,出現(xiàn)病理學改變,神經細胞凋亡率升高,DNA損傷嚴重等現(xiàn)象。神經細胞體外培養(yǎng)的成功為神經系統(tǒng)疾病的研究提供了很好的細胞模型,神經細胞也廣泛應用于神經細胞毒性效應和神經毒性作用機制的研究。為了進一步豐富氟中毒理論,本試驗以體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質神經細胞為研究對象,采用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L5個不同濃度的氟化鈉(NaF)進行細胞攻毒試驗,研究不同濃度氟化鈉對神經細胞形態(tài)、細胞活性、細胞骨架及細胞內微管相關蛋白MAP2表達的影響。 本試驗應用新生3天以內的SD乳鼠作為試驗材料,無菌分離大腦皮質神經細胞,以DMEM完全培養(yǎng)基培養(yǎng),待4h細胞貼壁后更換為無血清培養(yǎng)基Neurobasal,第3d半量換液,建立穩(wěn)定的SD大鼠大腦皮質神經細胞體外培養(yǎng)體系。神經細胞于培養(yǎng)第7天采用0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L5個不同濃度的...

【文章來源】： 河南科技學院河南省

【文章頁數(shù)】：68 頁

【文章目錄】：
英文縮略詞表
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1 前言
    2 氟能通過血-腦屏障
    3 高氟對智商的影響
    4 高氟對行為的影響
    5 高氟對動物腦重的影響
    6 氟對中樞神經系統(tǒng)的直接損傷
        6.1 氟對大腦內神經遞質、受體及蛋白的影響
        6.2 氟對中樞神經組織結構的影響
        6.3 氟對大腦氧化代謝的影響
    7 氟中毒與細胞骨架的研究情況
    8 體外培養(yǎng)神經細胞的應用
第二章 SD大鼠大腦皮質神經細胞的的原代培養(yǎng)
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 試驗動物
        1.2 相關試驗試劑
        1.3 主要試劑的配制
        1.4 主要儀器設備
    2 試驗方法
        2.1 試驗相關材料準備
        2.2 SD大鼠大腦皮質神經細胞的培養(yǎng)
        2.3 SD大鼠大腦皮質神經細胞的尼氏染色(Nissl's staining)鑒定
    3 結果與分析
        3.1 原代培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質神經細胞不同時期的形態(tài)觀察
        3.2 原代培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質神經細胞尼氏染色(Nissl's staining)鑒定
    4 討論
        4.1 神經細胞的原代培養(yǎng)及意義
        4.2 大腦皮質神經細胞原代培養(yǎng)方法的改進
        4.3 大腦皮質神經細胞Nissl's染色的特異性
    5 小結
第三章 高氟對SD大鼠大腦皮質神經細胞細胞形態(tài)、細胞活性及細胞骨架的影響
    摘要
    1 材料與方法
        1.1 試驗動物
        1.2 相關試驗試劑
        1.3 主要試驗試劑的配制
        1.4 主要試驗儀器設備
    2 試驗方法
        2.1 光學顯微鏡觀察高氟致神經細胞細胞形態(tài)變化
        2.2 掃描電鏡觀察氟致神經細胞細胞形態(tài)變化
        2.3 透射電鏡觀察氟致神經細胞超微結構變化
        2.4 MTT比色法檢測高氟對大腦皮質神經細胞細胞活性的影響
        2.5 高氟對體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質神經細胞細胞骨架的影響
        2.6 免疫熒光方法檢測高氟對神經細胞微管相關蛋白MAP2的影響
    3 結果與分析
        3.1 光學顯微鏡觀察氟致神經細胞細胞形態(tài)變化
        3.2 掃描電鏡觀察氟致神經細胞細胞形態(tài)變化
        3.3 透射電鏡觀察氟致神經細胞細胞形態(tài)變化
        3.4 高氟對體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質神經細胞細胞活性的影響
        3.5 高氟對SD大鼠大腦皮質神經細胞細胞骨架的影響
        3.6 高氟對神經細胞內微管相關蛋白MAP2表達的影響
    4 討論
        4.1 氟中毒對中樞神經系統(tǒng)的毒性影響
        4.2 高氟對體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質神經細胞的形態(tài)損傷
        4.3 MTT比色法測定高氟對神經細胞活性的影響
        4.4 高氟對體外培養(yǎng)SD大鼠大腦皮質神經細胞細胞骨架及細胞內MAP2表達的影響
    5 小結
全文結論
參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]慢性氟中毒對中樞神經系統(tǒng)的影響 [J]. 續(xù)嶺,謝明祥.  中國實用神經疾病雜志. 2013(04)
[2]新生大鼠大腦皮質神經元的原代培養(yǎng)及其鑒定 [J]. 宋海巖,王志勇,李娜娜.  實用兒科臨床雜志. 2012(02)
[3]高氟低碘對Wistar大鼠大腦組織病理學及DNA損傷的影響 [J]. 洪建華,牛瑞燕,葛亞明,王俊東.  中國實驗動物學報. 2009(01)
[4]高氟對新生兒行為神經發(fā)育的影響 [J]. 李晶 ,姚笠 ,邵慶亮 ,吳春燕.  中國地方病學雜志. 2004(05)
[5]慢性氟中毒患者認知功能缺損的初步研究 [J]. 邵千里,王亞南,李良文,李健.  中國地方病學雜志. 2003(04)
[6]大鼠海馬中氟濃度與膽堿酯酶活力的關系 [J]. 翟金霞,郭智勇,胡傳來,王取南,朱啟星.  中華勞動衛(wèi)生職業(yè)病雜志. 2003(02)
[7]氟對大鼠腦細胞DNA的損傷及誘導凋亡的作用 [J]. 陳軍,陳學敏,楊克敵,夏濤,謝虹.  中華預防醫(yī)學雜志. 2002(04)
[8]大鼠慢性氟中毒神經細胞病理改變的研究 [J]. 呂曉紅,李廣生,呂曉麗.  中國地方病學雜志. 2001(06)
[9]飲高氟水小鼠腦海馬回組織超微結構觀察 [J]. 孫增榮,劉風貞,楊海賢,白景文,于德奎,呂嚴,吳麗娜.  中國地方病學雜志. 2000(05)
[10]高氟區(qū)4～7歲兒童智商調查研究 [J]. 王國建,楊德龍,賈風格,王惠琴.  地方病通報. 1996(01)



本文編號：3529866