為確定2019年河南焦作某豬場哺乳仔豬發(fā)生腹瀉的病因,本研究采用RT-PCR方法對該發(fā)病豬場送檢的5份仔豬腸內容物樣品進行仔豬腹瀉相關病毒檢測,對檢測的豬流行性腹瀉病毒（PEDV）陽性樣品進行病毒分離,對分離的PEDV S基因和ORF3基因進行PCR擴增,并分析這兩個基因與GenBank中的PEDV參考株相應基因的同源性及遺傳進化分析。結果顯示,送檢的5份豬腸道內容物樣品PEDV檢測結果均為陽性,而豬傳染性胃腸炎病毒（TGEV）和豬輪狀病毒（PoRV）的檢測結果均為陰性;將隨機選取的1份PEDV陽性樣品接種Vero細胞并經傳代培養(yǎng),對培養(yǎng)5代的病毒經PCR檢測表明分離到一株PEDV,并將其命名為jiaozuo1012/2019株;基于S基因同源性分析結果顯示,該分離株與河南分離的PEDV CH/HNLH/2015株同源性最高,為99.3%,與近期河南分離株的同源性為96.4%～99.0%,與經典PEDV CV777株的同源性較低為93.4%。分離株S基因編碼的氨基酸在aa59～aa62位存在4個氨基酸(⁵⁹QGVN⁶²)的插入,在aa140和... 

【文章來源】：中國預防獸醫(yī)學報. 2020,42(09)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

圖1 分離病毒的IFA鑒定結果

利用1.2中引物對分離的PEDV進行S基因和ORF3基因的PCR擴增。結果顯示，分別擴增出大小約4 000 bp、600 bp的目的基因，均與預期的S基因和ORF3基因大小一致（圖2）；測序結果顯示，分離的PEDV S基因全長為4 161 bp,ORF3基因全長為675 bp。表明，正確克隆了PEDV分離株的S基因和ORF3基因。2.4分離病毒S基因和ORF基因同源性及其遺傳進化分析結果

本研究鑒定了2019年河南某豬場發(fā)生仔豬腹瀉疫情的病原為PEDV，并利用Vero細胞分離獲得了PEDV自然感染株（jiaozuo1012/2019）。分離株經S基因和ORF3基因的克隆、測序及分析，進一步證實該株PEDV與近年來河南地區(qū)PEDV流行株突變特征一致，為PEDV新的流行株[13]。本研究結果為深入探究PEDV新流行株的致病性和致病機理奠定了基礎。

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3524509