本文關鍵詞：日糧添加鋅對綿羊睪丸、附睪鋅轉運蛋白Zips表達的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：本文旨在研究日糧中添加不同水平鋅對綿羊睪丸、附睪組織中鋅轉運蛋白Zips(s：1、3、6和8)表達的影響。選擇體重相近(26±1.5 kg)健康的6月齡杜寒雜種公羊30只。隨機分為5組,每組6只,分別飼喂基礎日糧(對照組)、基礎日糧+50mg/kg無機鋅(ZnSO4)、基礎日糧+25 mg/kg、50 mg/kg和75 mg/kg氨基酸鋅。預飼期10 d,正式期60 d。最后采集睪丸、附睪頭、附睪體和附睪尾。運用qRT-PCR法檢、Western Blotting技術、免疫組化技術對睪丸、附睪組織中Zips(1、3、6、8) mRNA表達和Zip6蛋白表達及定位的研究。主要結果如下：1 qRT-PCR分析表明：(1)添加有機鋅綿羊睪丸中Zip1 mRNA表達量顯著降低(P0.05)；附睪頭中Zip1 mRNA表達量隨著有機鋅添加量的增加而升高,且50mg/kg有機鋅組和75 mg/kg有機鋅組附睪頭Zip1 mRNA表達量顯著高于其他試驗組(P0.05)；在綿羊附睪體中Zip1 mRNA表達量與附睪頭中基本一致;附睪尾中Zip1 mRNA表達量因添加鋅均明顯下降(P0.05);(2)添加無機鋅綿羊睪丸中Zip3 mRNA的表達量顯著升高,而添加有機鋅Zip3 mRNA的表達量明顯下降(P0.05)。添加75 mg/kg有機鋅組附睪頭和附睪體中Zip3 mRNA的表達量顯著升高(P0.05);添加鋅綿羊附睪尾中Zip3 mRNA的表達量顯著降低(P0.05);(3)添加75 mg/kg有機鋅睪丸和附睪中Zip6 mRNA表達量顯著升高(P0.05)。(4)添加兩種鋅源均可使綿羊睪丸中Zip8 mRNA表達量顯著下降(P0.05),使附睪頭中Zip8 mRNA表達量顯著升高(除25 mg/kg有機鋅組)(P0.05),有機鋅對附睪體和附睪尾中Zip8 mRNA表達量均顯著升高(P0.05)。2 Western Blotting結果：鋅添加組綿羊睪丸中Zip6的蛋白表達量顯著高于對照組(P0.05)；有機鋅組綿羊附睪頭中Zip6蛋白表達量顯著升高(P0.05);添加50 mg/kg無機鋅和25 mg/kg有機鋅使綿羊附睪體中Zip6蛋白表達量顯著升高(P0.05)。各組附睪尾中Zip6蛋白表達量沒有顯著差異(P0.05)。3免疫組化結果：鋅轉運蛋白Zip6主要定位于睪丸和附睪頭中。平均光密度值顯示,鋅添加組睪丸和附睪頭平均光密度值顯著高于對照組(P0.05)。無機鋅添加組附睪體平均光密度顯著高于對照組(P0.05),附睪尾中各組平均光密度沒有明顯變化(P0.05)。結論：(1)日糧中添加鋅對綿羊睪丸、附睪中Zip1、Zip3、Zip6和Zip8 mRNA表達有一定的影響,Zip6 mRNA在綿羊睪丸中特異性高表達,添加有機鋅促進其表達且添加75 mg/kg有機鋅表達量最高,而添加無機鋅其表達沒有顯著變化;Zip8 mRNA在綿羊附睪體中特異性高表達,添加有機鋅顯著促進其表達且添加75 mg/kg有機鋅表達量最高,而添加無機鋅其表達沒有顯著變化。說明日糧添加有機鋅對Zip1、Zip3、Zip6和Zip8 mRNA表達的影響大于添加無機鋅。(2)日糧添加鋅能促進睪丸和附睪頭中鋅轉運蛋白Zip6的表達。(3)鋅轉運蛋白Zip6主要定位于精原細胞、精母細胞和附睪頭假復層柱狀上皮細胞。
【關鍵詞】：綿羊 鋅 睪丸 附睪 Zips表達
【學位授予單位】：山西農業(yè)大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：S826.5
【目錄】：

• 摘要7-9
• 1 綜述9-15
• 1.1 鋅的生物學功能9-11
• 1.1.1 鋅對動物生長發(fā)育的影響9
• 1.1.2 鋅對免疫機能的影響9-10
• 1.1.3 鋅的抗氧化10
• 1.1.4 鋅對繁殖的影響10-11
• 1.2 鋅在飼料中的添加形式11-12
• 1.3 鋅在動物機體內消化吸收機制12-13
• 1.4 鋅轉運蛋白13-15
• 1.4.1 Zip(SLC39A)家族13-14
• 1.4.2 ZnT(SLC30A)家族14-15
• 2 引言15-16
• 3 材料與方法16-23
• 3.1 試驗動物與處理16
• 3.2 飼料配制與飼養(yǎng)管理16-17
• 3.3 樣品采集17-18
• 3.4 試驗儀器18-19
• 3.5 試驗試劑19-20
• 3.6 試驗方法20-23
• 3.6.1 引物設計20
• 3.6.2 總RNA提取20
• 3.6.3 總RNA濃度及完整性20-21
• 3.6.4 cDNA合成21
• 3.6.5 常規(guī)RT-PCR檢測21
• 3.6.6 QRT-PCR檢測21
• 3.6.7 Western blotting分析21-22
• 3.6.8 免疫組化分析22-23
• 3.7 數(shù)據處理23
• 4 試驗結果23-37
• 4.1 RNA檢測結果23-24
• 4.2 PCR產物測序結果24-25
• 4.3 熒光定量結果25-30
• 4.3.1 標準曲線的建立25-26
• 4.3.2 睪丸和附睪中Zip1 mRNA表達量26-27
• 4.3.3 睪丸和附睪中Zip3 mRNA表達量27-28
• 4.3.4 睪丸和附睪中Zip6 mRNA表達量28-29
• 4.3.5 睪丸和附睪中Zip8 mRNA表達量29-30
• 4.4 睪丸和附睪中Zip6的蛋白表達量30-32
• 4.5 睪丸和附睪中Zip6的免疫組化結果32-37
• 5 分析與討論37-40
• 5.1 飼糧不同鋅水平對綿羊睪丸、附睪中鋅轉運蛋白Zips mRNA表達影響37-39
• 5.2 不同鋅水平對綿羊睪丸、附睪組織Zip6蛋白表達的影響39-40
• 5.3 不同鋅水平組對睪丸和附睪組織中Zip6免疫組化結果的影響40
• 6 結論40-41
• 參考文獻41-45
• Abstract45-47
• 致謝47

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1 夏龍鋼;日糧添加鋅對綿羊睪丸、附睪鋅轉運蛋白Zips表達的影響[D];山西農業(yè)大學;2016年

  本文關鍵詞：日糧添加鋅對綿羊睪丸、附睪鋅轉運蛋白Zips表達的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：348941