腸出血性大腸桿菌（Enterohemorrhagic E. coli, EHEC）感染是一種重要的人畜共患病,在世界各地包括發(fā)達及發(fā)展中國家都有流行,其感染具有暴發(fā)性、強烈的致病性與致死性等特點,已成為全球性的公共衛(wèi)生問題,對人類健康構成巨大威脅。EHEC感染可使人患腹瀉（Diarrhea）、出血性結腸炎（Hemorrhagic Colitis, HC）,還可引發(fā)溶血性尿毒綜合征（Hemolytic Uremic Syndrome, HUS）、血栓性血小板減少性紫癜（Thromboric Thromobocytopenic Porpura, TTP）等嚴重并發(fā)癥,特別是HUS可對患者腎臟造成不可恢復性的功能損傷,病死率較高。EHEC所分泌的志賀毒素（Shiga toxin, Stx）是介導細菌致病的重要因子,Stx可以穿越破損的腸上皮細胞進入血液循環(huán),與其受體-丙糖�；拾贝迹╣lobotriaosylceramide, Gb3）或丁糖酰基鞘氨醇（globotetraosylceramide, Gb4）結合,造成腸道、中樞神經系統(tǒng)等器官的損傷,特別是Gb3受體含量較高的腎臟,受損后易引... 

【文章來源】：南京農業(yè)大學江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：76 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
第一章 文獻綜述
    1 EHEC研究進展
        1.1 EHEC概述
        1.2 EHEC病原學
        1.3 EHEC傳播途徑
        1.4 EHEC流行特征
        1.5 EHEC臨床癥狀
    2 EHEC致病機理
        2.1 EHEC粘附因子
        2.2 志賀毒素(Stx)
    參考文獻
第二章 腸出血性大腸桿菌O157：H7志賀毒素Ⅰ型A亞單位的表達
    摘要
    1 材料
        1.1 菌種與載體
        1.2 實驗動物
        1.3 主要試劑
        1.4 主要試劑的配制
        1.5 主要儀器設備
    2 方法
        2.1 Stx1A基因的克隆
        2.2 Stx1A重組蛋白的表達和純化
        2.3 重組蛋白的質譜鑒定
        2.4 Stx1A免疫血清的制備
        2.5 免疫轉印
    3 結果
        3.1 Stx1毒素A亞單位基因的克隆
        3.2 菌落PCR鑒定
        3.3 重組質粒pET22b(+)-Stx1A核苷酸序列分析
        3.4 重組工程菌的誘導表達和純化
        3.5 質譜鑒定結果
        3.6 免疫轉印
    4 討論
    參考文獻
    ABSTRACT
第三章 腸出血性大腸桿菌志賀毒素Ⅰ型A亞單位(Stx1A)單克隆抗體的制備和鑒定
    摘要
    1 材料和設備
        1.1 實驗動物
        1.2 材料
        1.3 主要儀器設備
    2 方法
        2.1 動物免疫
        2.2 間接ELISA檢測方法的建立
        2.3 ELISA檢測三次免疫后小鼠血清效價
        2.4 雜交瘤細胞系的建立及鑒定
        2.5 免疫共沉淀實驗
        2.6 單克隆抗體穩(wěn)定性檢測結果
        2.7 單克隆抗體的純化、保存
    3 結果
        3.1 間接ELISA方法的建立
        3.2 免疫小鼠ELISA分析結果
        3.3 雜交瘤細胞株的篩選和亞克隆
        3.4 菌株志賀毒素檢測
        3.5 免疫共沉淀結果
        3.6 單克隆抗體穩(wěn)定性檢測結果
    4 討論
    參考文獻
    ABSTRACT
全文總結
致謝
研究生期間所發(fā)表的文章



本文編號：3487071