發(fā)布時間：2021-11-09 02:35

　　為了建立可同時檢測超級細菌bla_NDM-1基因和mcr-1基因的快速檢測方法,針對bla_NDM-1基因和mcr-1基因保守序列設計特異性引物和TaqMan探針,以構建含有bla_NDM-1基因和mcr-1基因片段的重組質粒作為陽性標準品,通過優(yōu)化各種反應條件,建立同時檢測bla_NDM-1基因和mcr-1基因的雙重熒光定量PCR方法。該方法能夠特異性擴增bla_NDM-1基因和mcr-1基因質粒標準品,而對照標準菌株的檢測結果均為陰性。兩種質粒標準品的檢出下限均為1.63×10¹拷貝/μL,比常規(guī)PCR敏感性高100倍;組內和組間重復試驗的變異系數(shù)均小于2%。應用所建立的方法對55株雞源致病性沙門氏菌、10株生鮮畜禽產品源大腸桿菌臨床分離株進行檢測,未發(fā)現(xiàn)攜帶bla_NDM-1基因和mcr-1基因的沙門氏菌分離株,發(fā)現(xiàn)2株攜帶bla_NDM-1基因和1株攜帶mcr-1基因的大腸桿菌分離株。結果表明,本研究所建立的雙重熒光定... 

【文章來源】：中國動物傳染病學報. 2020,28(05)北大核心

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

重組質粒p-NDM-1(A)和p-mcr-1(B)的鑒定

圖3 雙重熒光定量PCR特異性試驗

以等比例混合的濃度為1.63×103、1.63×104、1.63×105拷貝/μL的質粒標準品p-NDM-1、p-mcr-1為模板進行重復性試驗。結果顯示,組內和組間重復性試驗的變異系數(shù)為0.58%～1.90%,均小于2%(表2),具有良好的重復性。2.7 臨床樣品檢測

【參考文獻】：
期刊論文
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博士論文
[1]肉雞產業(yè)鏈NDM和MCR-1陽性大腸桿菌分子流行病學研究[D]. 張榮民.中國農業(yè)大學 2017



本文編號：3484460