發(fā)布時間：2021-10-25 22:51

　　利用環(huán)介導等溫擴增（LAMP）與pH指示劑結合的方式建立偽狂犬病病毒（PRV）野毒株的快速檢測方法,并優(yōu)化反應體系。結果顯示,該方法特異性良好、敏感性較高,檢測限達100.5TCID50,與熒光定量PCR的敏感性一致。對52份臨床樣品進行檢測,用熒光定量PCR檢測出30份陽性樣品,LAMP檢測出27份陽性樣品,二者的符合率為94.2%。結果表明,PRV野毒株新型可視化LAMP檢測方法操作簡便、結果判別明顯、檢測成本低,可預期應用于PRV帶毒豬的快速篩查,這對于豬偽狂犬病的凈化具有重要意義。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)科學. 2020,50(08)北大核心CSCD

【文章頁數】：5 頁

【部分圖文】：

LAMP的擴增結果

LAMP的特異性試驗

顯。本研究中建立的新型可視化LAMP檢測方法的陽性結果為黃色，陰性結果為紫紅色，檢測結果直觀且容易分辨。其靈敏度和熒光定量PCR一致，檢測限可以達到100.5TCID50。采用本研究中建立的方法與熒光定量PCR分別對52份臨床樣品進行檢測，二者的符合率為94.2％。其中，LAMP檢測結果為假陰性的樣品的Ct值分別為37.43、37.19、37.67，這3個樣品屬于弱陽性。本研究中建立的豬偽狂犬病病毒野毒株新型可視化LAMP快速檢測方法可預期應用于PRV帶毒豬的快速篩查，這對于豬偽狂犬病的凈化具有重要意義。12345678圖3LAMP的敏感性試驗Figure3ThesensitivitytestofLAMP1～7：105.5、104.5、103.5、102.5、101.5、100.5、10-0.5TCID50；8：陰性對照。1—7：105.5，104.5，103.5，102.5，101.5，100.5，10-0.5TCID50；8：Negativecontrol.10.2649.2648.2647.2646.2645.2644.2643.2642.2641.2640.264熒光強度Fluorescence（533-580）12345651015202530354045循環(huán)數Cycles78檢測結果ResultLAMP熒光定量PCRQuantitativePCR陽性數Positivecounts1720陰性數Negativecounts3532總計Total5252參考文獻（References）［1］高澤文，范桂芳，趙婷婷，等.豬偽狂犬病病毒流行株遺傳進化及序列比對分析［J］.中國獸醫(yī)學報，2018，38（1）：1-10.GAOZe-wen，FANGui-fang，ZHAOTing-ting，etal.Phy-logeneticandsequencealignmentanalysisofepi-demicswinepseudorabiesvirus［J］.ChineseJournalofVeterinaryScience，2018，38（1）：1-10.（inChi-nese）［2］龍曉婷，劉俊磊，郭洪，等.

【參考文獻】：
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