干擾素誘導(dǎo)的GBPs又稱p65GTPase,屬于干擾素誘導(dǎo)的GTPase超家族,是一種重要的干擾素刺激基因（ISGs）。GBPs最早發(fā)現(xiàn)于1979年,Gupta發(fā)現(xiàn)經(jīng)IFN-y刺激后,人的成纖維細(xì)胞可以產(chǎn)生一種67kDa的蛋白。GBP蛋白與Mx蛋白同屬GTPase家族。自1979年被發(fā)現(xiàn)以后,后續(xù)的研究中陸續(xù)發(fā)現(xiàn)干擾素誘導(dǎo)的GBPs家族在調(diào)控細(xì)胞增殖和抵抗病原體感染方面具有重要作用。目前對(duì)干擾素誘導(dǎo)的GBPs家族的研究主要集中在人和小鼠上,大量實(shí)驗(yàn)證實(shí)了干擾素誘導(dǎo)的GBPs家族具有抵抗病毒感染的作用,但具體機(jī)制尚不明晰。目前對(duì)豬源GBPs生物學(xué)功能的研究并不多,僅有豬源GBPs可以顯著抑制鼠傷寒沙門(mén)氏桿菌增殖的報(bào)道,豬源GBPs是否有抑制病毒增殖的作用目前尚無(wú)報(bào)道。PRRSV和PRV引發(fā)的疾病給世界養(yǎng)豬業(yè)帶來(lái)巨大經(jīng)濟(jì)損失。本研究以豬源干擾素誘導(dǎo)的鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白家族中GBP1和GBP2兩個(gè)成員為研究對(duì)象,研究豬GBPs對(duì)PRRSV和PRV增殖的影響,以及PRRSV和PRV感染對(duì)GBPs表達(dá)的影響,主要研究?jī)?nèi)容如下：1.豬GBP1和GBP2基因的擴(kuò)增和序列分析從PK-15細(xì)胞中克隆了豬GB... 

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【文章頁(yè)數(shù)】：55 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
目錄
摘要
Abstract
縮咯語(yǔ)表(Abbreviation)
1 文獻(xiàn)綜述
    1.1 抗病毒天然免疫
    1.2 干擾素的抗病毒作用
    1.3 干擾素誘導(dǎo)的鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白家族(GBPs)簡(jiǎn)介
        1.3.1 干擾素誘導(dǎo)的GTPase家族
        1.3.2 干擾素誘導(dǎo)的鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白家族(GBPs)研究現(xiàn)狀
    1.4 PRRSV簡(jiǎn)介
    1.5 PRV簡(jiǎn)介
2 研究目的與意義
3 材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 菌株、細(xì)胞、毒株、載體
        3.1.2 主要試劑及試劑盒
        3.1.3 其他試劑的配制方法
        3.1.4 分子生物學(xué)分析軟件
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 PRRSV和PRV的增殖
        3.2.2 目的基因的克隆和載體構(gòu)建
        3.2.3 瞬時(shí)轉(zhuǎn)染傳代細(xì)胞
        3.2.4 Western Blot檢測(cè)目的蛋白在真核細(xì)胞中的表達(dá)
        3.2.5 IFA檢測(cè)目的蛋白的表達(dá)及細(xì)胞定位
        3.2.6 病毒空斑實(shí)驗(yàn)
        3.2.7 熒光定量
        3.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
4 結(jié)果和分析
    4.1 豬GBP1和GBP2基因克隆,鑒定及序列分析
        4.1.1 豬GBP1和GBP2基因RT-PCR擴(kuò)增與克隆
        4.1.2 豬GBP1和GBP2基因序列分析
    4.2 豬GBP1和GBP2基因的真核表達(dá)及Western Blot鑒定分析
    4.3 豬GBP1和GBP2蛋白的亞細(xì)胞定位
    4.4 豬GBP1和GBP2蛋白與PRRSV的相互作用
    4.5 豬GBP1和GBP2蛋白與PRV的相互作用
5 討論與結(jié)論
    5.1 討論
    5.2 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]高致病性豬藍(lán)耳病病毒（PRRSV）的分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J]. 呂春花,馬曉艷,美熱木古麗.  新疆畜牧業(yè). 2009(05)
[2]DNA的識(shí)別分子及其識(shí)別模式[J]. 張偉娟,徐潔杰,徐薇,熊思東.  自然科學(xué)進(jìn)展. 2008(06)
[3]豬繁殖與呼吸綜合癥病毒生物學(xué)特性[J]. 韓銀濤,蘇柏光.  畜牧獸醫(yī)雜志. 2008(01)
[4]我國(guó)偽狂犬病流行現(xiàn)狀及新特點(diǎn)[J]. 鄧仕偉,汪勇,薛春芳.  動(dòng)物醫(yī)學(xué)進(jìn)展. 2006(09)
[5]天然免疫與獲得性免疫的進(jìn)化關(guān)系[J]. 劉燕明.  免疫學(xué)雜志. 2001(S1)
[6]豬繁殖與呼吸綜合征病毒形態(tài)學(xué)特征[J]. 李成,李六金,谷守林,蔡虹,姜煥宏,趙世君,張海,李秦.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2001(06)
[7]豬繁殖與呼吸綜合征及其在我國(guó)的現(xiàn)狀與對(duì)策[J]. 蔡雪暉,柴文君,翁長(zhǎng)江,劉光清,郭寶清.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2000(S1)
[8]PRRS免疫防制面臨的困惑與未來(lái)[J]. 仇華吉,童光志.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2000(01)
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博士論文
[1]偽狂犬病毒和豬傳染性胃腸炎病毒誘導(dǎo)β干擾素產(chǎn)生的分子機(jī)制研究[D]. 謝立蘭.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2011
[2]MITA介導(dǎo)的細(xì)胞抗病毒反應(yīng)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)及其調(diào)節(jié)機(jī)制[D]. 鐘波.武漢大學(xué) 2010
[3]偽狂犬病毒IE180和EP0基因的表達(dá)調(diào)控[D]. 郭洪.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2008

碩士論文
[1]豬干擾素刺激基因ISG20的克隆、真核表達(dá)及其對(duì)PRRSV增殖的影響[D]. 李燕.華中農(nóng)業(yè)大學(xué) 2010



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