本試驗(yàn)旨在研究不同濃度的組氨酸對(duì)體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞β-酪蛋白及酪氨酸激酶2（JAK2）-信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活子5（STAT5）/哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白（m TOR）信號(hào)通路相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)的影響。將原代奶牛乳腺上皮細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),分為對(duì)照組和7個(gè)試驗(yàn)組,采用無必需氨基酸的培養(yǎng)基,對(duì)照組不添加組氨酸,試驗(yàn)組是在對(duì)照組基礎(chǔ)上分別添加0.15、0.60、1.20、2.40、4.80、9.60、19.20 mmol/L的組氨酸。采用噻唑藍(lán)比色法檢測原代奶牛乳腺上皮細(xì)胞12 h增殖情況;運(yùn)用蛋白質(zhì)免疫印跡檢測β-酪蛋白和8個(gè)信號(hào)通路相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)。結(jié)果表明:1)當(dāng)組氨酸濃度為0.15⁹.60 mmol/L時(shí),與對(duì)照組相比,奶牛乳腺上皮細(xì)胞數(shù)量均增加。2)β-酪蛋白表達(dá)量隨組氨酸濃度的增加出現(xiàn)先升高后降低的趨勢,但試驗(yàn)組均極顯著高于對(duì)照組（P<0.01）。3)與對(duì)照組相比,組氨酸的添加可極顯著促進(jìn)各信號(hào)通路相關(guān)磷酸化蛋白的表達(dá)（P<0.01）;試驗(yàn)組中,隨著組氨酸濃度的升高,磷酸化哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白[P-m TOR（Ser2481）]和磷酸化真核細(xì)... 

【文章來源】：動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2016,28(03)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：10 頁

【文章目錄】：
1材料與方法
    1. 1試驗(yàn)材料
        1 . 1 . 1主要儀器
        1 . 1 . 2主要試劑
    1. 2試驗(yàn)方法
        1 . 2 . 1原代奶牛乳腺上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)
        1 . 2 . 2M TT檢測細(xì)胞增殖
        1.2.3蛋白質(zhì)免疫印跡(W B)檢測
            1.2.3.1試驗(yàn)處理
            1 . 2 . 3 . 2樣品總蛋白提取
            1 . 2 . 3 . 3蛋白質(zhì)免疫印跡檢測
    1. 3數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
2結(jié)果
    2. 1組氨酸對(duì)體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響
    2. 2 組氨酸對(duì)體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞 β - 酪蛋白表達(dá)的影響
    2.3組氨酸對(duì)體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞JAK2-STAT5信號(hào)通路相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)的影響
    2. 4組氨酸對(duì)體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞中m TOR信號(hào)通路相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)的影響
3 討論
    3. 1 組氨酸對(duì)體外培養(yǎng)奶牛乳腺上皮細(xì)胞增殖的影響
    3. 2 組氨酸對(duì)信號(hào)通路介導(dǎo) β - 酪蛋白合成相關(guān)磷酸化蛋白表達(dá)的影響
4 結(jié)論


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]亮氨酸和組氨酸通過mTOR信號(hào)通路調(diào)控奶牛腺上皮細(xì)胞中酪蛋白的合成（英文）[J]. Hai-na GAO,Han HU,Nan ZHENG,Jia-qi WANG.  Journal of Zhejiang University-Science B（Biomedicine & Biotechnology）. 2015(06)
[2]亮氨酸或組氨酸通過哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶蛋白信號(hào)通路影響奶牛乳腺上皮細(xì)胞中酪蛋白的合成[J]. 高海娜,胡菡,王加啟,鄭楠.  動(dòng)物營養(yǎng)學(xué)報(bào). 2015(04)
[3]eIF2α激酶和eIF2α磷酸化對(duì)特異的蛋白質(zhì)合成的激活作用研究進(jìn)展[J]. 韓欽.  國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 2002(06)

碩士論文
[1]奶牛乳腺上皮細(xì)胞JAK2-STAT5和mTOR信號(hào)通路協(xié)同調(diào)控乳蛋白合成[D]. 史琳琳.東北農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013
[2]精氨酸對(duì)乳腺上皮細(xì)胞中酪蛋白合成的影響及其調(diào)控機(jī)制[D]. 徐柏林.揚(yáng)州大學(xué) 2012
[3]奶牛乳腺上皮細(xì)胞中賴氨酸蛋氨酸配比模式對(duì)酪蛋白合成的影響及機(jī)理研究[D]. 李喜艷.中國農(nóng)業(yè)科學(xué)院 2011



本文編號(hào)：3449481