骨骼肌是動物機體的重要組成器官,是肉質(zhì)生產(chǎn)中的重要的經(jīng)濟性狀,也是人體蛋白質(zhì)營養(yǎng)的主要來源。骨骼肌的生長主要取決于蛋白質(zhì)的沉積,蛋白質(zhì)沉積是蛋白質(zhì)合成和降解的差值。m TOR是哺乳動物細胞蛋白質(zhì)合成的核心調(diào)節(jié)因子,其活性受細胞內(nèi)外的一系列信號調(diào)控,包括氨基酸、激素、生長因子和能量狀態(tài)等。G蛋白偶聯(lián)受體T1R1/T1R3是細胞膜上的一個重要的氨基酸感受器,能夠感應(yīng)胞外氨基酸,通過與其偶聯(lián)的胞內(nèi)G蛋白,調(diào)節(jié)細胞內(nèi)的m TOR活性。T1R1/T1R3感應(yīng)氨基酸具有種屬特異性,鼠源T1R1/T1R3能感應(yīng)多達18種L-氨基酸,人源T1R1/T1R3僅能感應(yīng)L-谷氨酸和L-天冬氨酸,豬T1R1/T1R3最多可能感應(yīng)6種L-氨基酸,包括L-谷氨酸和L-天冬氨酸,以及L-丙氨酸、L-谷氨酰胺、L-絲氨酸和L-蘇氨酸。因而,不同種屬通過T1R1/T1R3調(diào)節(jié)m TOR活性的氨基酸種類也可能不一樣。根據(jù)以上問題,本研究主要設(shè)計兩個方面的實驗,其一是鑒定與T1R1/T1R3偶聯(lián)參與m TOR活性調(diào)控的G蛋白,其二是篩選豬源T1R1/T1R3感應(yīng)氨基酸并驗證其功能。得出的主要結(jié)果如下:1、在C2C12和HE... 

【文章來源】：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：65 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

LRS介導(dǎo)的mTORC1活性調(diào)節(jié)Lysosme

參與 mTOR 活性調(diào)控的 G 蛋白鑒定及豬源 T1R1/T1R3 感應(yīng)氨基酸篩選Nicklin 等（2009）的研究證實了這一假設(shè)。作者發(fā)現(xiàn)：無論是降低 LAT1 的表達或抑制其活性，還是降低 ASCT2 的表達或抑制其活性，都會對 mTORC1 信號和癌細胞生長產(chǎn)生抑制作用；并且，細胞對谷氨酰胺的攝取是 mTOR 信號激活的限速步驟，細胞內(nèi)必須首先累積一定濃度的谷氨酰胺之后才能接著發(fā)生必需氨基酸的攝取和 mTORC1 的激活。據(jù)此，作者提出一個氨基酸依賴性的 mTORC1 活性調(diào)節(jié)的兩步氨基酸轉(zhuǎn)運機制：第一步，ASCT2（SLC1A5）轉(zhuǎn)運谷氨酰胺進入細胞內(nèi)并在細胞內(nèi)累積；第二部，當細胞內(nèi)谷氨酰胺累積到一定濃度時，LAT1/CD98(SLC7A5/SLC3A2) 以細胞內(nèi)谷氨酰胺為流出底物，與細胞外的亮氨酸進行交換，從而將細胞外的亮氨酸轉(zhuǎn)運進入細胞內(nèi)，進入細胞內(nèi)的亮氨酸進而調(diào)節(jié) mTORC1的活性(Nicklin et al 2009)。

圖3T1R1/T1R3 介導(dǎo)的氨基酸依賴性mTORC1 活性調(diào)節(jié)機制Fig.3 The mechanism that T1R1/T1R3 participates into the regulation of mTORC1 by amino acids5 T1R1/T1R3 通過 G 蛋白傳遞氨基酸信號雖然知道 T1R1/T1R3 能夠感應(yīng)氨基酸，影響胞內(nèi) Ca2+濃度，從而參與 mTOR活性調(diào)節(jié)，但是作為一個膜受體，T1R1/T1R3 到底是如何將氨基酸信號傳入細胞內(nèi)的尚沒有研究清楚。GPCRs 所介導(dǎo)的細胞信號通路主要包括：以腺苷酸環(huán)化酶（cAMP）為第二信使的信號通路和以肌醇-1,4,5-三磷酸（IP3)和二酰甘油（DAG）作為雙信使的磷脂酰肌醇信號通路（《細胞生物學(xué)》第三版）。GPCRs 通常是通過細胞內(nèi)與其偶聯(lián)三聚體 G 蛋白而將細胞外信號傳遞進入細胞內(nèi)的。G 蛋白也叫做鳥苷酸結(jié)合蛋白，屬于GTPases 家族，是細胞內(nèi)一類重要的信號轉(zhuǎn)導(dǎo)分子，負責(zé)將細胞外的各種刺激信號


本文編號：3427341