Pax7基因調(diào)控骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的增殖和分化，是一個(gè)重要的轉(zhuǎn)錄因子。Pax7基因在遺傳突變方面的研究，多集中于人、小鼠等，對(duì)于畜禽來說較少，目前，在雞上還沒有Pax7基因遺傳變異的相關(guān)報(bào)道。本試驗(yàn)利用DNA混池測(cè)序技術(shù)對(duì)雞Pax7基因篩選變異位點(diǎn)，用PCR-RFLP技術(shù)分析其變異位點(diǎn)，并在固始雞安卡雞F2代資源群中分析其群體遺傳特性，對(duì)雞的生長(zhǎng)性狀、屠體性狀、肉質(zhì)性狀等經(jīng)濟(jì)性狀及血液生化指標(biāo)與多態(tài)位點(diǎn)進(jìn)行關(guān)聯(lián)分析；根據(jù)雞Pax7基因在DNA水平上遺傳變異的分析及該基因突變對(duì)雞生長(zhǎng)發(fā)育的影響，我們進(jìn)一步在mRNA水平上研究Pax7基因不同發(fā)育階段的表達(dá)規(guī)律，進(jìn)一步推測(cè)進(jìn)一步該基因的表達(dá)與雞生長(zhǎng)發(fā)育之間的關(guān)系，為研究Pax7基因功能提供更多的線索。主要結(jié)果如下:1、在雞Pax7基因的第5外顯子和第3內(nèi)含子發(fā)現(xiàn)了兩個(gè)SNP位點(diǎn)命名為g.42723T>C位點(diǎn)、g.3194-3224缺失位點(diǎn)。其中g(shù).42723T>C位點(diǎn)屬于同義突變，缺失位點(diǎn)g.3194-3224在第三內(nèi)含子上，是一個(gè)31bp的缺失。2、關(guān)聯(lián)分析結(jié)果可知：Pax7基因g.42723T>C位點(diǎn)對(duì)雞4、8、10、12... 

【文章來源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：64 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

Pax7基因蛋白結(jié)構(gòu)示意圖

圖 1-2 肌纖維形成過程示意圖[19]Fig.1-2 The schematic representation of myofibers[19]Pax7 基因功能研究ax7 基因在胚胎發(fā)育早期表達(dá)，參與胚胎早期近軸中胚層的發(fā)育，對(duì)機(jī)體骨骼肌的自和修復(fù)有著不可替代的作用[13]。胚胎發(fā)育時(shí)，Pax7 基因的缺乏會(huì)導(dǎo)致肌肉衛(wèi)星細(xì)胞減，無法完成細(xì)胞周期從而細(xì)胞開始凋亡；Pax7基因有一定的抗凋亡作用[20]。年來，關(guān)于 Pax7 基因的研究主要在其功能上，主要研究 Pax7 基因在肌肉形成、受復(fù)、維持狀態(tài)中自我更新等過程中的作用。有研究報(bào)道：在小鼠上，敲除 Pax7 基因組織，無法形成正常的肌纖維，小鼠在此后的 2-3 周會(huì)死亡[21]； Pax7 基因的正常表miRNA 干擾后，其下游基因 Myf5 和 MyoD 表達(dá)受到影響，肌肉不能正常發(fā)育[22]；構(gòu)x7-EnR 結(jié)構(gòu)（與 Pax7 基因起拮抗作用），發(fā)現(xiàn)肌肉衛(wèi)星細(xì)胞能正常分化成肌肉細(xì)胞eale 等研究證明 Pax7 基因可作為治療肌肉發(fā)育障礙或肌肉萎縮等肌肉疾病的靶標(biāo)基shido 等在過度肥大的大鼠肌肉中研究 Pax7 基因的表達(dá)模式，發(fā)現(xiàn)大鼠發(fā)育早期的肌過量，這是因?yàn)?Pax7 調(diào)節(jié)肌肉衛(wèi)星細(xì)胞時(shí)自我更新的作用[25]。Kirkpatrick 研究報(bào)道

圖 1-3 熒光定量 PCR 擴(kuò)增曲線Fig. 1-3 The real-time PCR dynamic curve資料來源：www.ibioo.com學(xué)種類學(xué)包括熒光染料和熒光探針。熒光探針[48]是在熒光能量共振轉(zhuǎn)移的基交探針[49]、分子信標(biāo)等。SYBR Green 染料是一種 DNA 結(jié)合染料，嵌出熒光[50]，它的非特異性很強(qiáng)，可以結(jié)合多個(gè)模板，不受反應(yīng)體系的量 PCR 的定量方法量 PCR 可分為相對(duì)定量和絕對(duì)定量。相對(duì)定量通過計(jì)算樣本與參照品，絕對(duì)定量通過比較樣本與已知標(biāo)準(zhǔn)曲線而推算的樣本目的 DNA 的量量需要選擇內(nèi)參基因來標(biāo)準(zhǔn)化模板的量，一般選擇持家基因作為內(nèi)參基Ct 值法，假設(shè)每經(jīng)過一次循環(huán)，產(chǎn)物數(shù)量增加一倍，通過 Ct值反應(yīng)起算出相對(duì)表達(dá)量。量需要制定標(biāo)準(zhǔn)曲線，通常選取質(zhì)粒 DNA 作為絕對(duì)定量的標(biāo)準(zhǔn)品[52]

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]中國(guó)部分地方雞種肌肉組織學(xué)特點(diǎn)及其肉品質(zhì)的比較研究[J]. 吳信生,陳國(guó)宏,陳寬維,王克華,常洪,童海兵,吳兆林,李碧春,張學(xué)余.  江蘇農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào). 1998(04)
[2]江西玉山豬肌肉組織學(xué)特征與肉質(zhì)的關(guān)系[J]. 王亞鳴,劉龍芳.  江西農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 1994(03)

碩士論文
[1]雞肌纖維特性及Myogenin基因多態(tài)性的研究[D]. 秦召.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007
[2]雞血清生化指標(biāo)與部分脂肪性狀相關(guān)性及谷草轉(zhuǎn)氨酶同工酶的研究[D]. 梅承君.河南農(nóng)業(yè)大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3400878