豬圓環(huán)病毒2型（Porcine Circovirus type 2, PCV2）可引起豬肉芽腫性腸炎,該病可經(jīng)消化道傳播,多致使仔豬腹瀉,近年來給養(yǎng)豬業(yè)帶來一定經(jīng)濟(jì)損失。微絲骨架是細(xì)胞骨架的重要組成之一,其處于高度變化的動態(tài)過程中。它們一般以成束或成網(wǎng)的形式存在于細(xì)胞質(zhì)膜內(nèi),參與調(diào)控細(xì)胞的分裂、黏附、遷移和物質(zhì)運(yùn)輸?shù)冗^程。由于病毒的生命進(jìn)程嚴(yán)格依賴宿主細(xì)胞,所以病毒為了創(chuàng)造有利于其入侵、復(fù)制、釋放和傳播的條件,逐漸進(jìn)化為能與宿主細(xì)胞微絲骨架相互作用的類型。既往研究表明,病毒可以利用囊泡運(yùn)輸和/或參與調(diào)控微絲骨架的信號通路完成自身的生命進(jìn)程。本試驗以豬小腸上皮細(xì)胞系（intestinal porcine epithelial cell line, IPEC-J2）為試驗對象,嘗試建立了PCV2感染腸道的體外細(xì)胞模型,并初步探索了其與宿主細(xì)胞微絲骨架之間的相互作用,為今后對PCV2通過消化道感染機(jī)制的深入研究奠定基礎(chǔ)。1.豬圓環(huán)病毒2型對豬小腸上皮細(xì)胞感染模型的初步建立本試驗以TCID50為104.5/mL的PCV2為試驗材料,感染豬小腸上皮細(xì)胞（IPEC-J2）。結(jié)果發(fā)現(xiàn),PCV2雖不能... 

【文章來源】：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：77 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－３?ＰＣＶ２在鉛細(xì)胞中的復(fù)制和釋放Ｗ??

白陣列或網(wǎng)絡(luò)。??Ｈ個最基本的肌動蛋白網(wǎng)絡(luò)的例子是應(yīng)為纖維（ｓｔｒｅｓｓ化ｅｒｓ）、絲狀偽足??（ｆｉｌｏｐｏｄｉａ）和片狀偽足（ｌａｍｅ山ｐｏｄｉａ）（圖２－１）。應(yīng)力纖維橫貫于細(xì)胞長軸，是較短??且具有交替極性的收縮束。通過與二聚結(jié)合蛋白ａ－輔肌動蛋白和馬達(dá)蛋白肌球蛋白ＩＩ??的互作，這些絲狀物結(jié)合在起。這些纖維對維持細(xì)胞黏附和形態(tài)變化是必不可少的。??絲狀偽足包含聘硬的、緊密結(jié)合的呈平行排列的肌動蛋白束，向質(zhì)膜聚合，形成較薄??的刺狀突起。這些結(jié)構(gòu)可Ｗ探測或感受細(xì)胞外環(huán)境，并且包含一些信號、整合素和巧??粘素（細(xì)她粘附分子）的受體。片狀偽足是高度分支化的肌動蛋白絲網(wǎng)絡(luò)，具有質(zhì)膜??附近最高的分支頻率。絲狀肌動蛋白的這種叫對枝狀＂片狀陣列還涉及細(xì)胞遷移和膜皺??１３??

?ｉｏｔｎｉＨｓｏ?ｌｏｗｅｏｅｅ?ｔｉｗｏＳｗａｃ?ｉｎｏｏｏｏｏｏｅｏ??＜ｈｎｎｔｉｔｙ??圖３－５?ＰＣＶ２標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒的標(biāo)準(zhǔn)曲線??Ｆｉｇ．?３－５?Ｓｔａｎｄａｒｄ?Ｃｕｒｖｅ?ｏｆ?ＰＣ?Ｖ２?Ｓｔａｎｄａｒｄ?Ｐｌａｓｍｉｄ??ＰＣＶ２感染ＩＰＥＣ－Ｊ２細(xì)胞后，經(jīng)絕對定量ＰＣＲ得到細(xì)胞和培養(yǎng)上清液中病毒拷貝??數(shù)的總和，進(jìn)而繪制ＰＣＶ２在ＩＰＥＣ－Ｊ２細(xì)胞上的生長曲線。具體為：感染后從６ｈ到??９６ｈ，ＰＣＶ２的拷貝數(shù)呈上升趨勢，之后開始下降（圖３－６）。在盲傳試驗中，ＷＰＣＶ２??初次感染細(xì)胞中的病毒拷貝數(shù)為１，之后將帶毒傳代細(xì)胞中的病毒拷貝數(shù)與之相比得??到相對值。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，隨著ＩＰＥＣ－Ｊ２細(xì)施傳代次數(shù)的增加，ＰＣＶ２的拷貝數(shù)呈急劇上??升趨勢。傳代至第６代時細(xì)胞嚴(yán)重調(diào)亡，從而終止傳代（圖３－７）。??（ｌｏｇ）??巧??Ｅ?１２－??ｆｅｗ－??�。福�??〇??〇??６－?ＩＩＩ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?Ｉ?

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]多重PCR/RT-PCR技術(shù)檢測PRRSV、PPV、PRV和PCV-2[J]. 王娟萍,姚敬明,高英杰,金擴(kuò)世,丁馥香,周勝花,曹日亮,賀東昌,雷宇平.  中國獸醫(yī)學(xué)報. 2009(03)
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本文編號：3386892