發(fā)布時(shí)間：2021-09-05 17:55

　　1982年，痘苗病毒（WR株）作為外源基因表達(dá)載體首次正確表達(dá)了皰疹病毒的TK基因，引起了科研學(xué)者們的極大關(guān)注。1984年，中國(guó)自主研究分離了獨(dú)有的痘苗病毒天壇株，用于表達(dá)外源基因，同時(shí)亦是防患再次出現(xiàn)天花的應(yīng)急疫苗毒株。痘苗病毒因基因容量大，同時(shí)可插入大片段的外源基因，因此，可用于構(gòu)建多聯(lián)疫苗。隨著社會(huì)發(fā)展，人們面臨著越來越多疾病。與此同時(shí)，疫苗的接種量也隨之增加，造成了資源浪費(fèi)以及感染機(jī)率的增加等諸多問題。多聯(lián)疫苗減少了疫苗的接種次數(shù)，降低了副反應(yīng)的發(fā)生率，同時(shí)避免了多種疫苗之間的相互作用。本實(shí)驗(yàn)以痘苗病毒天壇株為基礎(chǔ)，分別以TC7L-TK2L和TJ2R側(cè)翼基因?yàn)橹亟M臂，通過重組DNA技術(shù)構(gòu)建多聯(lián)重組痘苗病毒疫苗。其中篩選的外源基因包括黃熱病毒E基因、漢坦病毒S基因、克里米亞-剛果出血熱病毒M基因、炭疽桿菌POAX2基因、埃博拉病毒S基因、馬爾堡病毒G基因、辛諾柏病毒G2基因及非洲歐尼恩病毒E2基因。設(shè)計(jì)構(gòu)建含有重組臂、外源基因、啟動(dòng)子及標(biāo)記基因的穿梭質(zhì)粒。在脂質(zhì)體的作用下，穿梭質(zhì)粒進(jìn)入感染痘苗病毒的細(xì)胞，與病毒基因組發(fā)生基因重組。待細(xì)胞病變后，通過倒置熒光顯微鏡篩選具有熒光噬斑的... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁(yè)數(shù)】：58 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    1.1 痘病毒的復(fù)制循環(huán)
    1.2 痘病毒的細(xì)胞入侵
    1.3 痘苗病毒與細(xì)胞的膜融合
    1.4 感染痘病毒小鼠體內(nèi) NK 細(xì)胞反應(yīng)
    1.5 激活有關(guān) NK 細(xì)胞識(shí)別感染痘病毒的細(xì)胞受體
    1.6 痘病毒和 MHC-I 表達(dá)調(diào)節(jié)和其他抑制配體
    1.7 鼠痘病毒抵抗力的遺傳基因
第二篇 研究?jī)?nèi)容
    第一章 穿梭載體質(zhì)粒的構(gòu)建
        1.1 材料與方法
        1.2 結(jié)果
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第二章 重組痘苗病毒的構(gòu)建
        2.1 材料與方法
        2.2 結(jié)果
        2.3 討論
        2.4 小結(jié)
    第三章 重組痘苗病毒的鑒定
        3.1 材料與方法
        3.2 結(jié)果
        3.3 討論
        3.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介
附錄
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]缺失E3L基因減毒天壇株痘苗病毒的構(gòu)建及篩選[J]. 王宇航,李霄,王浩然,闞式紱,王卓越,齊延新,吳娜,杜壽文,金寧一.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(11)
[2]馬爾堡病毒核蛋白的原核表達(dá)及純化[J]. 王皓婷,王水明,史子學(xué),邵東華,魏建超,劉學(xué)輝,王志亮,王雪敏,馬志永.  中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2011(10)
[3]重組黃熱病毒E蛋白結(jié)構(gòu)域Ⅲ作為亞單位疫苗的抗原性和免疫原性[J]. 楊鵬,黃鶯,劉珊,孫志偉,俞煒源.  生物技術(shù)通訊. 2009(05)
[4]新疆出血熱病毒糖蛋白基因的克隆與表達(dá)[J]. 馬本江,杭長(zhǎng)壽,趙云,王世文,解燕鄉(xiāng).  病毒學(xué)報(bào). 2002(03)

博士論文
[1]減毒痘苗病毒天壇株的構(gòu)建、致病性及免疫原性研究[D]. 闞式紱.吉林大學(xué) 2013



本文編號(hào)：3385814