實(shí)驗(yàn)犬是目前教學(xué)和科學(xué)研究工作中最廣泛應(yīng)用的動(dòng)物之一，每年有大量的實(shí)驗(yàn)犬用于藥物安全性評(píng)價(jià)和體外循環(huán)研究等試驗(yàn)。質(zhì)量控制是目前實(shí)驗(yàn)犬標(biāo)準(zhǔn)化過(guò)程中面臨的一大難題。我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB14922.2-2011《實(shí)驗(yàn)動(dòng)物微生物學(xué)等級(jí)及監(jiān)測(cè)》中規(guī)定犬瘟熱病毒為實(shí)驗(yàn)犬必檢項(xiàng)目。而且無(wú)特定病原體實(shí)驗(yàn)犬不能免疫接種犬瘟熱疫苗，必須為犬瘟熱病毒抗體陰性。目前，能夠檢測(cè)犬血清抗體水平的技術(shù)主要有免疫熒光技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等方法。這些方法有一個(gè)共同的缺點(diǎn)：一次試驗(yàn)只能檢測(cè)一種病原抗體水平，無(wú)法實(shí)現(xiàn)對(duì)多種病原抗體的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。液相芯片是一種新型生物芯片技術(shù)平臺(tái)，具有操作簡(jiǎn)便、敏感性強(qiáng)、靈活多變、檢測(cè)范圍廣等顯著特點(diǎn)，其最大的優(yōu)勢(shì)是可以同時(shí)對(duì)同一血清樣品中多種病原抗體進(jìn)行定性分析，實(shí)現(xiàn)多種病原抗體的實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)。本研究利用小鼠IgG與熒光微球D6偶聯(lián)，通過(guò)偶聯(lián)驗(yàn)證試驗(yàn)，評(píng)估偶聯(lián)效率，優(yōu)化偶聯(lián)過(guò)程的主要影響因素。最終確定偶聯(lián)過(guò)程中：二硫蘇糖醇（1M，DTT）使用量為2μL，反應(yīng)時(shí)間為1h；4-（N-馬來(lái)酰亞胺甲基）環(huán)己烷-1-羧基磺酸基琥珀酰亞胺酯鈉鹽（2mg/L，sulfo-SMCC）使用量為2μL，反應(yīng)時(shí)間為1h... 

【文章來(lái)源】：吉林大學(xué)吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】：71 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

液相芯片技術(shù)原理圖

A1孔儀器設(shè)置Fig.1.1InstrumentsettingsofA1

A2孔儀器設(shè)置

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]液相芯片技術(shù)檢測(cè)痰濕體質(zhì)人群TNF-α、IL-6、CRP及MCP-1的表達(dá)研究[J]. 鄭璐玉,楊玲玲,李玲孺,井慧如,王濟(jì),王前飛,王琦.  中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合雜志. 2013(07)
[2]犬瘟熱病毒間接免疫酶組化檢測(cè)方法的建立[J]. 劉雯,馬麗敏,李琳,何曄,李葉,任秀梅,靳朝,夏志平.  中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2011(02)
[3]斑點(diǎn)雜交法檢測(cè)犬瘟熱病毒[J]. 張永霞,王金福,張似青.  中國(guó)畜牧獸醫(yī). 2010(12)
[4]犬瘟熱診斷方法的研究進(jìn)展[J]. 王好,張宇,錢愛(ài)東.  畜牧與飼料科學(xué). 2009(10)
[5]抗犬瘟熱病毒熒光標(biāo)記單抗的制備和初步鑒定[J]. 蘇建青,褚秀玲,楊松濤,夏咸柱,岳妙姝.  安徽農(nóng)業(yè)科學(xué). 2009(08)

碩士論文
[1]猴源犬瘟熱病毒體內(nèi)分布的比較病理學(xué)研究[D]. 劉雯.吉林大學(xué) 2011
[2]人血清腫瘤標(biāo)志物液相芯片檢測(cè)系統(tǒng)的研制[D]. 彭娟.南方醫(yī)科大學(xué) 2007



本文編號(hào)：3385252