【目的】研究副豬嗜血桿菌脂寡糖合成相關(guān)基因lpxM對(duì)其生長(zhǎng)、生物被膜形成能力、抗50%豬血清殺菌能力、對(duì)巨噬細(xì)胞毒力和抗生素敏感性部分生物特性的影響,為揭示HPS致病機(jī)制,lpxM基因缺失疫苗的構(gòu)建奠定理論基礎(chǔ),為豬場(chǎng)防治HPS進(jìn)行藥物選擇時(shí)提供依據(jù)�！痉椒ā恳愿咧虏⌒匝�5型HPS地方分離株H45為研究對(duì)象,自殺性質(zhì)粒PK18mobsacB為載體,通過(guò)自然轉(zhuǎn)化法將構(gòu)建好的重組質(zhì)粒轉(zhuǎn)進(jìn)H45,使其在抗生素的壓力下發(fā)生同源重組,最終經(jīng)過(guò)抗生素篩選并通過(guò)PCR和測(cè)序驗(yàn)證得到lpxM基因缺失株H45-△lpxM,比較兩者之間部分生物學(xué)特性的差異。測(cè)定兩者的OD₆₀₀-t關(guān)系曲線比較生長(zhǎng)情況;用結(jié)晶紫染色法比較兩者在培養(yǎng)24h后生物被膜形成的能力;測(cè)定兩者在50%豬血清中存活率,比較兩者的抗血清補(bǔ)體殺菌能力;將兩者同時(shí)刺激小鼠單核巨噬細(xì)胞RAW264.7細(xì)胞,作用時(shí)間為6、12和24h,檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清液中LDH的釋放量,比較兩者對(duì)巨噬細(xì)胞毒力影響;利用K-B紙片擴(kuò)散法研究?jī)烧邔?duì)氨芐西林等臨床上常用13種抗生素和多粘菌素B抗生素敏感性,通過(guò)測(cè)定抑菌圈直徑來(lái)并參照耐藥標(biāo)準(zhǔn)判... 

【文章來(lái)源】：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué). 2020,53(16)北大核心CSCD

【文章頁(yè)數(shù)】：10 頁(yè)

【部分圖文】：

重組質(zhì)粒PKM-UKD雙酶切鑒定

生物被膜OD630值

血清存活能力


本文編號(hào)：3379993