由于干擾素具有良好的廣譜抗病毒活性和有效的免疫調節(jié)功能,對于研發(fā)有效的抗病毒生物制劑及增強疫苗效果的佐劑具有重要的意義。本研究利用基因工程技術,以吉林白鵝α/γ干擾素基因（JGIFN-α/γ）為研究對象,對其進行了克隆、表達及抗病毒活性研究。同時為了進一步研究JGIFN-γ作為佐劑的免疫增強作用,成功構建了帶有分子免疫佐劑JGIFN-γ的GPV-VP3基因疫苗并對雛鵝進行了免疫,為研發(fā)高效的鵝細小病毒基因疫苗奠定了基礎,本研究具體進行了以下幾方面的工作：1、吉林白鵝α干擾素成熟肽原核表達及抗病毒活性的研究參照已克隆得到的JGIFN-α完整的ORF基因序列設計了一對特異性引物,克隆得到了編碼α干擾素的成熟肽基因（mJGIFN-a）。利用pET28a （+）作為原核表達載體,成功構建了吉林白鵝α干擾素基因的原核表達質粒pET-mJGIFN-a。將該重組表達質粒轉化入E.coli Rossetta菌中進行了表達,經IPTG誘導、SDS-PAGE和western-blot分析表明獲得了分子量為22ku的包涵體蛋白。將包涵體蛋白經Ni-IMAC親和層析法純化及稀釋透析復性后,得到了與預期結果一致... 

【文章來源】：吉林農業(yè)大學吉林省

【文章頁數】：119 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻綜述
    第一章 干擾素的研究進展
        1.1 干擾素分類及結構
        1.2 干擾素作用機制
        1.3 干擾素的生物學活性
        1.4 禽類IFN的研究進展
    第二章 鵝細小病毒研究進展
        2.1 鵝細小病毒分子生物學研究進展
        2.2 小鵝瘟免疫防治的研究進展
第二篇 研究內容
    第一章 吉林白鵝α干擾素成熟肽基因的克隆表達及抗病毒活性的研究
        1.1 材料與方法
        1.2 結果
        1.3 討論
        1.4 小結
    第二章 吉林白鵝γ干擾素基因序列分析、原核表達及抗病毒活性測定
        2.1 材料與方法
        2.2 結果
        2.3 討論
        2.4 小結
    第三章 吉林白鵝IFN-γ及其與VP3融合基因的真核表達
        3.1 材料與方法
        3.2 結果
        3.3 討論
        3.4 小結
    第四章 JGIFN-VP3真核表達質粒對雛鵝的免疫研究
        4.1 材料與方法
        4.2 結果
        4.3 討論
        4.4 小結
結論
參考文獻
中英文縮略語
作者簡介
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]吉林白鵝α干擾素在大腸桿菌中的表達及抗病毒活性檢測[J]. 李公美,李玉梅,胡靜濤,劉可越,錢愛東.  中國獸醫(yī)雜志. 2012(02)
[2]鵝γ-干擾素的原核表達及抗病毒活性研究[J]. 胡曉靜,劉棋,付薇,徐賢坤,熊毅.  畜牧與獸醫(yī). 2012(02)
[3]Ⅲ型干擾素——新型抗病毒細胞因子[J]. 楊祎,侯煒.  生命科學. 2011(08)
[4]鵝α干擾素基因在COS-7細胞中的瞬時表達及抗病毒功能初探[J]. 劉菲,唐衛(wèi)杰,程安春,汪銘書,趙婷婷,高麗芹.  浙江大學學報(農業(yè)與生命科學版). 2011(04)
[5]天府肉鵝IFN-α成熟肽基因的原核表達及抗病毒活性[J]. 劉菲,高麗芹,程安春,汪銘書,韓清林,趙婷婷,唐衛(wèi)杰,嚴曉玲.  四川農業(yè)大學學報. 2011(02)
[6]小鵝瘟病毒VP3真核表達質粒與弱毒疫苗誘導鵝體免疫應答的比較[J]. 朱德康,黎敏,車茜,程安春,汪銘書,陳孝躍.  中國農業(yè)科學. 2011(03)
[7]天府肉鵝IFN-α基因的克隆及生物信息學分析[J]. 劉菲,趙婷婷,程安春,汪銘書,韓清林,高麗芹,唐衛(wèi)杰.  中國獸醫(yī)科學. 2010(12)
[8]重組獅頭鵝α干擾素的制備及其抗病毒活性[J]. 鄭曉靈,劉艷芬,陳紹紅,劉鈾.  中國獸醫(yī)科學. 2010(07)
[9]鵝細小病毒野毒的分離及VP3基因的克隆及序列分析[J]. 李公美,邵洪澤,劉海軍,錢愛東.  湖北農業(yè)科學. 2010(04)
[10]鵝細小病毒VP3基因真核表達載體的構建及其在Vero細胞中表達[J]. 高光,張鑫,徐佳,王淳玉,許洪潔,胡桂學.  中國獸醫(yī)學報. 2010(03)

博士論文
[1]天府肉鵝α干擾素基因克隆、表達及其生物學活性研究[D]. 劉菲.四川農業(yè)大學 2011
[2]豬α干擾素、豬β干擾素與豬γ干擾素的抗病毒活性及其免疫佐劑的研究[D]. 姚清俠.華中農業(yè)大學 2007
[3]雞干擾素與干擾素受體重組蛋白的生物學特性及其相互作用[D]. 韓春來.中國農業(yè)大學 2005

碩士論文
[1]豬干擾素α、β、γ基因克隆、原核表達及其單克隆抗體制備的研究[D]. 王曉杜.華中農業(yè)大學 2007
[2]雞γ干擾素基因的克隆和表達及其多克隆抗體的制備[D]. 丁忠慶.東北農業(yè)大學 2003



本文編號：3368568