發(fā)布時(shí)間：2021-08-26 02:22

　　馬立克�。∕arek’s Disease,MD）是由馬立克病病毒（Marek’s DiseaseVirus,MDV）感染雞引起的一種高度接觸性、傳染性、淋巴組織增生性疾病,MD可引起免疫抑制并增加其他疾病易感性,給世界家禽業(yè)造成了巨大的經(jīng)濟(jì)損失。MDV主要以直徑約85¹00 nm的六角形無(wú)囊膜裸病毒粒子存在于細(xì)胞中,是具有嚴(yán)格地細(xì)胞結(jié)合性的α皰疹病毒,完整的病毒粒子具有囊膜,徑約為273⁴00nm,不具有細(xì)胞結(jié)合性,可脫離細(xì)胞獨(dú)立生存,這是該病持續(xù)傳播并爆發(fā)的主要原因。本研究通過(guò)純化雞胚成纖維細(xì)胞（CEF）培養(yǎng)的MDV超強(qiáng)毒株GX0101作為免疫原,制備特異識(shí)別MDV的單克隆抗體。GX0101感染CEF,96h后收集細(xì)胞,10mLPBS重懸,反復(fù)凍融3次,選用100kD的切向流超濾離心管濃縮得到峰尖病毒濃縮液至5mL,病毒濃縮液經(jīng)0.22μL濾膜過(guò)濾后,通過(guò)Sepharose 4 Fast Flow（4FF）凝膠作為層析介質(zhì)分離純化病毒粒子,聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）和實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qRT-PCR）分析不同收集峰MDV病毒含量,并經(jīng)過(guò)透射... 

【文章來(lái)源】：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)河南省

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

MD臨床癥狀進(jìn)化圖譜

Nitish Boodhoo, et al.（2016）圖 2 MDV 爆發(fā)流行區(qū)Fig.2 The outbreak areaof MDV當(dāng)前，60 年代初我國(guó)雞場(chǎng)中就存在 MDV 毒株，有強(qiáng)毒株 vMDV（如 GA 株），后來(lái)

MDV基因組Fig.3ThegenomeofMDV

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]豬繁殖與呼吸綜合征病毒純化方法的建立[J]. 田書(shū)苗,郅玉寶,王林建,喬松林,郭軍慶,陳靜,柴書(shū)軍,張改平,楊艷艷.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2016(05)
[2]馬立克氏病病毒gE蛋白單克隆抗體的制備及鑒定[J]. 李巧玲,崔紅玉,牛軍偉,閆帥,高明,楊紅亞,趙妍,王云峰.  中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2013(05)
[3]抗Ⅰ型馬立克氏病毒sorf2蛋白的多克隆抗體制備及其特異性鑒定[J]. 崔寧,蘇帥,李久慶,趙鵬,李延鵬,丁家波,崔治中.  微生物學(xué)報(bào). 2013(03)
[4]應(yīng)用桿狀病毒載體在昆蟲(chóng)細(xì)胞表達(dá)馬立克氏病病毒Meq基因[J]. 韋平,LucyFLee.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2000(03)
[5]馬立克氏病病毒囊膜糖蛋白B抗原Ⅰ型特異性和群共同性決定簇的單克隆抗體[J]. 陸長(zhǎng)明,崔治中,秦愛(ài)建,ＬｅｅＬＦ.  中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1997(04)
[6]以桿狀病毒為載體在昆蟲(chóng)細(xì)胞中表達(dá)雞馬立克病病毒糖蛋白B抗原基因[J]. 李毅,崔治中,隋德新.  病毒學(xué)報(bào). 1994(01)
[7]用重組基因產(chǎn)物PP38作為抗原檢測(cè)抗雞馬立克氏病毒抗體[J]. 秦愛(ài)建,萬(wàn)洪全,段玉友,崔治中.  中國(guó)獸醫(yī)雜志. 1994(02)

博士論文
[1]馬立克氏病病毒gB、gI、pp38基因的原核系統(tǒng)表達(dá)及其特異性單抗的研制和初步應(yīng)用[D]. 韓凌霞.揚(yáng)州大學(xué) 2001

碩士論文
[1]雞馬立克氏病病毒超強(qiáng)毒株RB1B pp38基因的真核表達(dá)及其特異性單克隆抗體的研制[D]. 劉明亮.揚(yáng)州大學(xué) 2008



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