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抗幽門螺桿菌特異性卵黃抗體IgY制備和效果評價

發(fā)布時間:2021-08-23 17:23
  幽門螺旋桿菌(Helicobacter pylori, H. pylori)是引起胃相關(guān)疾病的重要因素,世界衛(wèi)生組織將其列為I類致癌因子。目前“三聯(lián)”或“四聯(lián)”療法是臨床治療H. pylori相關(guān)疾病的主要手段,但是耐藥菌株的出現(xiàn)導(dǎo)致該方法的治愈率越來越低,因此開發(fā)高效、安全、經(jīng)濟且不會產(chǎn)生耐藥性的藥物顯得尤為迫切和重要。卵黃抗體(Specific egg yolk immunoglobulin) IgY,是禽類主要的血清免疫球蛋白,國內(nèi)外研究表明幽門螺桿菌全菌或某類致病因子的重組蛋白制備的抗H. pylori特異性IgY也可以達到治療感染H. pylori的效果。H. pylori在胃部低pH(<2)情況下利用尿素酶水解從血液中擴散出的尿素為氨水和二氧化碳,在菌體周圍形成“氨云”中和胃酸。有利于H. pylori穿過胃黏液層,定植于胃上皮細(xì)胞表面。H. pylori尿素酶B亞單位是主要的功能單位,包含尿素酶的活性中心。尿素酶膜通道蛋白UreI對幽門螺桿菌在人和動物體內(nèi)生存起關(guān)鍵作用。本實驗在前期對H. pylori的urel和ureB基因的生物學(xué)作用進行研究的基礎(chǔ)上,成功的制備... 

【文章來源】:四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
第一章 綜述
    1 幽門螺桿菌
    2 幽門螺桿菌感染
        2.1 流行病學(xué)概況
        2.2 中國區(qū)域幽門螺桿菌感染流行病學(xué)狀況及趨勢
        2.3 我國各年齡階段幽門螺桿菌感染情況
    3 幽門螺桿菌的治療方法
    4 卵黃抗體
        4.1 卵黃抗體的優(yōu)勢
        4.2 不同類型的抗幽門螺桿菌特異性IgY的研究現(xiàn)狀
            4.2.1 幽門螺桿菌全菌
            4.2.2 尿素酶
            4.2.3 空泡毒素VacA
            4.2.4 粘附素HpaA
            4.2.5 中性粒細(xì)胞激活蛋白Nap
            4.2.6 其他抗原
        4.3 商品化IgY
第二章 特異性IgY的制備
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
            1.2.1 抗原制備
            1.2.2 蛋雞免疫
            1.2.3 分離純化IgY
            1.2.4 IgY濃度與效價檢測
            1.2.5 IgY的純度檢測
    2 結(jié)果
        2.1 免疫后抗體IgY效價的變化
        2.2 抗H. pylori特異性IgY的濃度和純度
    3 討論
第三章 特異性IgY體外抑菌效果評價
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
            1.2.1 IgY體外抑菌涂板
            1.2.2 快速脲酶試驗
    2 結(jié)果
        2.1 IgY體外抑菌涂板
        2.2 快速尿酶試驗
    3. 討論
第四章 特異性IgY動物實驗效果評價
    1 材料與方法
        1.1 材料
        1.2 方法
            1.2.1 建立幽門螺桿菌感染BALB/c小鼠模型
            1.2.2 抗幽門螺桿菌特異性IgY對小鼠的治療
            1.2.3 革蘭氏染色鏡檢
            1.2.4 普通PCR檢測
            1.2.5 尿素酶試驗檢測
    2 結(jié)果
        2.1 建立幽門螺桿菌感染BALB/c小鼠模型
        2.2 抗幽門螺桿菌特異性IgY對小鼠的治療
            2.2.1 革蘭氏染色鏡檢
            2.2.2 普通PCR檢測
            2.2.3 快速脲酶試驗
    3 討論
結(jié)論
參考文獻
附錄
致謝


【參考文獻】:
期刊論文
[1]幽門螺桿菌BIB原核表達工程菌的構(gòu)建及微生物學(xué)特性分析[J]. 潘興,肖繼紅,楊靖,王保寧,李健春,周法庭,祝捷,周永君,李婉宜,李明遠(yuǎn).  西部醫(yī)學(xué). 2013(10)
[2]幽門螺桿菌新國際共識解讀[J]. 劉文忠,蕭樹東.  胃腸病學(xué). 2012(01)
[3]抗CtUBE IgY的制備及其抗幽門螺桿菌感染研究[J]. 段琳,丁建坤,趙文鋒,吳梧桐,劉景晶.  藥物生物技術(shù). 2011(04)
[4]硫糖鋁對幽門螺桿菌VacA IgY的保護作用的動物實驗評價[J]. 郭麗媛,吳金英,黃偉,楊致邦,吳敏,馬小京.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2010(11)
[5]H.pylori抗體雞蛋制品對H.pylori感染BALB/c小鼠的實驗研究[J]. 韓偉平,王朝暉,李玉中.  中國微生態(tài)學(xué)雜志. 2010(10)
[6]ureI和ctB-ureI真核質(zhì)粒構(gòu)建及表達分析[J]. 王保寧,楊遠(yuǎn),鄺玉,曹康,李明遠(yuǎn),李婉宜.  細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志. 2010(08)
[7]卵黃抗體開發(fā)現(xiàn)狀及應(yīng)用進展[J]. 段琳,趙文鋒,丁建坤,吳梧桐,劉景晶.  中國生化藥物雜志. 2010(03)
[8]單克隆卵黃抗體技術(shù)研究進展[J]. 陳紅秀,張小鶯,陳琛,趙建樂,韓水仲,李引乾,劉曉強.  生物化學(xué)與生物物理進展. 2010(04)
[9]HpaA IgY抑制小鼠胃內(nèi)幽門螺桿菌的定植[J]. 黃進,秦思棟,楊致邦,黃偉,鄧穎,葉翠蓮.  免疫學(xué)雜志. 2008(05)
[10]百貝寧治療嬰幼兒輪狀病毒性腸炎療效觀察[J]. 王永明.  中國實用醫(yī)藥. 2008(19)



本文編號:3358285

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