發(fā)布時間：2021-08-20 01:15

　　本研究將鸚鵡熱衣原體的MOMP基因經(jīng)PCR擴(kuò)增后與pET-22b（+）載體連接構(gòu)建重組質(zhì)粒,轉(zhuǎn)化入E.coli,通過IPTG誘導(dǎo)表達(dá)MOMP蛋白,鑒定重組蛋白的表達(dá)和反應(yīng)性。結(jié)果顯示,重組蛋白被成功表達(dá),分子質(zhì)量大小為40 ku,經(jīng)溶解、透析純化后,重組MOMP蛋白純度為91%,能與鼠抗重組MOMP蛋白抗體產(chǎn)生特異性反應(yīng),與鸚鵡熱衣原體陽性血清呈強(qiáng)陽性反應(yīng)。重組MOMP蛋白與ISA201佐劑乳化制成鸚鵡熱衣原體亞單位疫苗,免疫綿羊后抗體效價高達(dá)1∶4 222,用強(qiáng)毒株攻毒后保護(hù)率達(dá)100%,表明此鸚鵡熱衣原體亞單位疫苗具有良好的免疫原性和免疫保護(hù)性。 

【文章來源】：中國獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(07)北大核心CSCD

【文章頁數(shù)】：5 頁

【部分圖文】：

重組MOMP蛋白表達(dá)的SDS-PAGE電泳檢測

采用Western-blot檢測重組MOMP蛋白的免疫活性，檢測3個復(fù)孔。結(jié)果（圖3）顯示，制備純化的重組MOMP蛋白能與鼠抗重組MOMP蛋白抗體產(chǎn)生特異免疫結(jié)合活性，由此說明，E.coli-Cps MOMP菌株表達(dá)的重組MOMP蛋白抗原具有免疫活性。圖3 重組MOMP蛋白抗原免疫結(jié)合活性的Western-blot檢測

重組MOMP蛋白抗原免疫結(jié)合活性的Western-blot檢測


本文編號：3352513