豬圓環(huán)病毒2型（Porcine circovirus-2，PCV-2）是目前為止發(fā)現(xiàn)最小的動物致病性病毒，是引起斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（PMWS）的主要病因之一，除此之外還能夠引起母豬繁殖障礙、腸炎、斷奶仔豬與育肥豬的呼吸道疾病等，這類疾病統(tǒng)稱為豬圓環(huán)病毒病（PCVAD）。目前，該病在世界各養(yǎng)豬國家都有分布，是對養(yǎng)豬業(yè)造成重大危害的三大疫病之一。本研究針對從廣東多個豬場采集的病料進(jìn)行病毒分離并接種到PK-15細(xì)胞系傳代培養(yǎng)，通過間接免疫熒光技術(shù)初步鑒定分離的毒株為PCV-2。采用RT-PCR，將已同步接種該病毒PK-15細(xì)胞總RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，根據(jù)GenBank中PCV-2序列（登錄號：JQ809462.1）設(shè)計編碼PCV-2結(jié)構(gòu)蛋白全長的特異性引物，利用PCR技術(shù)，成功擴(kuò)增出PCV-2ORF2基因，確定分離到的病毒為PCV-2。利用分子生物學(xué)技術(shù)將本實(shí)驗(yàn)室保存的PCV-2GD10-01毒株的ORF2基因連接到pMD-18T克隆載體上，根據(jù)限制性核酸內(nèi)切酶酶切分析得重組質(zhì)粒PCV2-Cap-T。經(jīng)序列測定驗(yàn)證正確后，將目的基因連接到原核表達(dá)載體pET-28a-c（+），獲得重組質(zhì)粒p... 

【文章來源】：吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)吉林省

【文章頁數(shù)】：42 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
前言
第一篇 文獻(xiàn)綜述
    第一章 豬圓環(huán)病毒病的研究進(jìn)展
        1.1 圓環(huán)病毒感染相關(guān)疾病的病原學(xué)
        1.2 圓環(huán)病毒病的流行病學(xué)
        1.3 圓環(huán)病毒病的臨床癥狀
        1.4 圓環(huán)病毒病的診斷技術(shù)
    第二章 圓環(huán)病毒的分子生物學(xué)研究進(jìn)展
        2.1 圓環(huán)病毒的病原學(xué)研究
        2.2 圓環(huán)病毒的形態(tài)與結(jié)構(gòu)
        2.3 圓環(huán)病毒的基因組結(jié)構(gòu)
        2.4 圓環(huán)病毒的主要結(jié)構(gòu)蛋白及其功能特點(diǎn)
    第三章 圓環(huán)病毒疫苗的研究進(jìn)展
        3.1 傳統(tǒng)疫苗的研究進(jìn)展
        3.2 新型疫苗的研究進(jìn)展
第二篇 研究內(nèi)容
    第一章 PCV-2 病毒的分離與鑒定
        1.1 材料和方法
        1.2 結(jié)果
        1.3 討論
        1.4 小結(jié)
    第二章 豬圓環(huán)病毒 2 型 ORF2 基因的原核表達(dá)及 Cap 蛋白的純化
        2.1 材料
        2.2 方法
        2.3 結(jié)果
        2.4 討論
    第三章 純化的 Cap 與間接免疫熒光染色檢測方法的建立
        3.1 材料
        3.2 主要儀器與試劑
        3.3 方法
        3.4 結(jié)果
        3.5 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡介
致謝
附錄


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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