水貂阿留申病分子流行病學調查和間接ELISA檢測方法的建立
發(fā)布時間:2021-08-06 23:39
水貂阿留申病(Aleutian Mink Disease, AD)是由細小病毒科(Parvoviridae)細小病毒亞科(Parvovirinae)阿留申病毒屬(Amdovirus)水貂阿留申病毒(Aleutian Mink Disease Virus, AMDV)引起的慢性傳染病。該病能夠導致感染動物腎小球腎炎、動脈血管炎和代謝異常,廣泛存在于世界各水貂養(yǎng)殖國家,造成重大的經濟損失,是水貂養(yǎng)殖業(yè)的三大疫病之一。近年來,由于我國水貂養(yǎng)殖規(guī)模的擴大和養(yǎng)殖密度的提高,養(yǎng)殖方式較為原始及AD的防范力度不夠等原因,導致AD在我國水貂養(yǎng)殖地區(qū)廣泛流行且有擴大的趨勢。國內缺乏AD流行病學的詳細研究資料,致使AD的致病機理等研究滯后。目前還沒有預防AD的疫苗,國際上普遍使用對流免疫電泳(Counterimmunoelectrophoresis, CIEP)技術來定期檢測篩查AD并淘汰病貂凈化貂群。但CIEP法繁瑣,很難在短時間內完成大量樣品的篩查。隨著基層養(yǎng)殖市場對AD篩查的逐漸重視,急需建立一種高通量、高靈敏度的AD診斷方法。本研究首先對國內主要水貂養(yǎng)殖地區(qū)進行AD分子流行病學調查。共收集五個主要...
【文章來源】:中國農業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
樣品采集養(yǎng)殖場所在區(qū)域
AMM-Utah-1-kit S 1.. 19<i2圖2. 2 DNAStar軟件對34株序列的氨基酸對比分析,只顯示出不同的氨基酸位點。Fig.2.2 Alignment of the amino acid sequences of the AMDV VP2 protein found in 34 AMDV samples. Only theamino acids that differ from the consensus sequence are shown.2.3.3系統(tǒng)分析
圖3.7表達產物的Western-blot檢測Fig3.7 Westem-blot test for expressed proteinHis標簽單抗為一抗,HRP標記的山羊抗小鼠的IgG為二抗;B:以感染水紹阿留申病毒的病紹陽性血清為,以HRP標記的兔抗紹的丨gG為二抗;M:預染的蛋白質分子量標準;1:重組桿狀病毒感染的sf9細胞的蛋白;2:阿留申病毒商業(yè)抗原;3:正常sf9細胞蛋白;Immunoblot analysis with Anti-His Tag mouse monoclonal antibody and goat anti-mouse IgG-HRP; B: Immunoblotysis with a pool of infected mink by ADV and rabbit anti-mink IgG-HRP as antibody; M: molecular weight markers: Total lysates of sf9 cells infected recombinant baculovirus: 2: Commercial antigen of ADV; 3: uninfected sf9 cells8重組蛋白與商業(yè)抗原的CIEP對比試驗用表達蛋白作為檢測抗原進行CIEP試驗,分別以水紹的AMDV陽性血清(60份),AMDV血清(20份),以及AMDV陰性MEV陽性血清(20份)為檢測對象,與AMDV商業(yè)抗原對比,每組均設重復。對重組蛋白與商此抗原的特異性、重復性和敏感性及穩(wěn)定性進行驗證。。8. 1重組蛋白與商業(yè)抗原的特異性和重復性試驗將重組蛋白作為檢測抗原進行CIEP試驗,分別以水紹的AMDV陽性血清(60份),AMDV
本文編號:3326704
【文章來源】:中國農業(yè)科學院北京市
【文章頁數(shù)】:64 頁
【學位級別】:碩士
【部分圖文】:
樣品采集養(yǎng)殖場所在區(qū)域
AMM-Utah-1-kit S 1.. 19<i2圖2. 2 DNAStar軟件對34株序列的氨基酸對比分析,只顯示出不同的氨基酸位點。Fig.2.2 Alignment of the amino acid sequences of the AMDV VP2 protein found in 34 AMDV samples. Only theamino acids that differ from the consensus sequence are shown.2.3.3系統(tǒng)分析
圖3.7表達產物的Western-blot檢測Fig3.7 Westem-blot test for expressed proteinHis標簽單抗為一抗,HRP標記的山羊抗小鼠的IgG為二抗;B:以感染水紹阿留申病毒的病紹陽性血清為,以HRP標記的兔抗紹的丨gG為二抗;M:預染的蛋白質分子量標準;1:重組桿狀病毒感染的sf9細胞的蛋白;2:阿留申病毒商業(yè)抗原;3:正常sf9細胞蛋白;Immunoblot analysis with Anti-His Tag mouse monoclonal antibody and goat anti-mouse IgG-HRP; B: Immunoblotysis with a pool of infected mink by ADV and rabbit anti-mink IgG-HRP as antibody; M: molecular weight markers: Total lysates of sf9 cells infected recombinant baculovirus: 2: Commercial antigen of ADV; 3: uninfected sf9 cells8重組蛋白與商業(yè)抗原的CIEP對比試驗用表達蛋白作為檢測抗原進行CIEP試驗,分別以水紹的AMDV陽性血清(60份),AMDV血清(20份),以及AMDV陰性MEV陽性血清(20份)為檢測對象,與AMDV商業(yè)抗原對比,每組均設重復。對重組蛋白與商此抗原的特異性、重復性和敏感性及穩(wěn)定性進行驗證。。8. 1重組蛋白與商業(yè)抗原的特異性和重復性試驗將重組蛋白作為檢測抗原進行CIEP試驗,分別以水紹的AMDV陽性血清(60份),AMDV
本文編號:3326704
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