為表達(dá)藍(lán)舌病病毒NS3蛋白,將藍(lán)舌病病毒血清8型NS3序列克隆至pFastBac-HTA載體上,經(jīng)轉(zhuǎn)座、轉(zhuǎn)染后獲得重組桿狀病毒rBac-NS3;用間接免疫熒光（IFA）檢測(cè)NS3蛋白的表達(dá)情況,并采用親和層析進(jìn)行純化;以Western Blot和間接ELISA方法鑒定NS3蛋白的反應(yīng)原性。IFA結(jié)果顯示,重組桿狀病毒rBac-NS3感染的Sf9細(xì)胞可以大量表達(dá)NS3蛋白。Western Blot結(jié)果顯示,純化后的NS3蛋白與抗His單抗和綿羊藍(lán)舌病陽(yáng)性血清能夠發(fā)生特異性反應(yīng);以純化的NS3蛋白為包被抗原建立的間接ELISA方法可以區(qū)分藍(lán)舌病陽(yáng)性血清和陰性血清,進(jìn)一步驗(yàn)證本試驗(yàn)利用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)成功表達(dá)并純化出藍(lán)舌病病毒NS3蛋白,表明純化后的NS3蛋白具有良好的反應(yīng)原性,可作為開發(fā)鑒別診斷試劑盒的備選蛋白及NS3蛋白的結(jié)構(gòu)和生物學(xué)功能研究。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)獸醫(yī)雜志. 2020,56(04)北大核心

【文章頁(yè)數(shù)】：6 頁(yè)

【部分圖文】：

NS3蛋白表達(dá)純化SDS-PAGE結(jié)果

間接ELISA結(jié)果

間接免疫熒光試驗(yàn)結(jié)果(200×)


本文編號(hào)：3304028