隨著高通量測(cè)序技術(shù)的廣泛應(yīng)用,肌肉組織中大量環(huán)狀RNA（circRNAs）被發(fā)現(xiàn)。已有報(bào)道circRNA-FC/T10、circRNA-WDR77、circ-ZNF09與肌肉的生長(zhǎng)發(fā)育密切相關(guān)。作為目前研究最為深入的環(huán)狀RNA,CDR1as可競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合miR-7調(diào)控靶基因IGF1R和Sp1的表達(dá)。同時(shí)發(fā)現(xiàn)CDR1as促進(jìn)山羊骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞的分化。此外,生肌決定因子MyoD是肌衛(wèi)星細(xì)胞活化的標(biāo)志物,可以調(diào)控肌肉特異性基因的表達(dá)促進(jìn)成肌分化,并且在全基因組范圍內(nèi)具有廣泛的調(diào)控作用。故推測(cè),在肌細(xì)胞分化過(guò)程中,MyoD可能直接或間接地調(diào)控肌肉相關(guān)的circRNAs表達(dá),但迄今為止尚未見(jiàn)報(bào)道。因此,本研究旨在探討MyoD對(duì)CDR1as基因表達(dá)的調(diào)控作用及其機(jī)制。具體結(jié)果如下:1.利用RT-qPCR分析了 CDR1as及MyoD基因在胎兒期120 d母山羊的不同肌肉組織及SMSCs分化過(guò)程中的表達(dá)模式;發(fā)現(xiàn)CDR1as在腓腸肌中表達(dá)最高,其次為背最長(zhǎng)肌,半腱肌中最低。而與MyoD、MyH 和MyoGmRNA的表達(dá)變化趨于一致。此外,CDR1as與MyoD基因在SMSCs分化過(guò)程中均呈先上升后下降... 

【文章來(lái)源】：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)四川省 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：70 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖１－１環(huán)狀ＲＮＡ的生物起源網(wǎng)??

２．１試驗(yàn)材料??２．１．１樣品采集??試驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源于四川南江黃羊原種場(chǎng)。在胎兒期１２０日齡各采集３只母山羊的不同??肌肉組織，包括同上�。ǎ樱鳎穑恚螅穑鳎幔簦澹�，背最長(zhǎng)肌、半膜肌??（＆腿？騰、半腱肌、腰大�。ǎ遥幔幔恚瘢铮颍┖碗枘c肌??（Ｇｆｌ對(duì)ｒａｃｗｅｍ／ｗ＊ｓＯ，樣品置液氮中速凍，隨后保存于＿８０°Ｃ。??２．１．２試驗(yàn)細(xì)胞??本試驗(yàn)所用山羊骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞，小鼠Ｃ２Ｃ１２及人ＨｅＬａ細(xì)胞均來(lái)自實(shí)驗(yàn)室凍存。??２．１．３試驗(yàn)載體??（１）?ＰＭＤ１９－Ｔ載體購(gòu)于北京擎科（ＴＳＩＮＧＫＥ）。??（２）構(gòu)建過(guò)表達(dá)的載體為ｐＥＧＦＰ－Ｎｌ，購(gòu)于Ｐｒｏｍｅｇａ公司產(chǎn)品。其結(jié)構(gòu)圖如下??

Ｆｉｇ．?２－２?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆ?ｐＧＬ３－Ｂａｓｉｃ?ｖｅｃｔｏｒ??２２２３?ＢａｍＨ?Ｉ．?ｏｒｉ?＼??ＳＶ４０?ｌａｔｅ?＼??Ｐ〇＿?Ｖ??１９７１?Ｉ－Ｗ?＾?■＂ｅ３／ＩＭ??＼?＼?（４〇４５ｂｐ）?ｍ??＾＾ＶｈＳＶＴＫ??＼＼?＼?ｊ７?Ｐｒｏｍｏｔｅｒ??＼＾Ｓ＾＼＾ｏｍｃｉｔｅｉｒ?Ｋ??Ｉ?６４９??＾－Ｈｉｎｄ?Ｈｉ?７６０??（１０４０）?Ｃｓｐ４５?Ｉ?＾Ｎｈｅ?＼?１０２４??圖２－３ｐＲＬ－ＴＫ載體結(jié)構(gòu)圖??Ｆｉ．?２－３?Ｓｔｒｕｃｔｕｒｅ?ｏｆＲＬ－ＴＫ?ｖｅｃｔｏｒ??


本文編號(hào)：3285036