一株塞內(nèi)卡病毒的分離與鑒定
發(fā)布時(shí)間:2021-07-04 03:32
2018年11月,河南南陽地區(qū)某養(yǎng)殖場(chǎng)發(fā)生了豬水皰病,經(jīng)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)確診為塞內(nèi)卡病毒(SVV)感染。選擇SVV檢測(cè)陽性的臨床樣品,處理后接種PK-15細(xì)胞,經(jīng)多次傳代培養(yǎng),成功分離到1株塞內(nèi)卡病毒,命名為HeNNY-1/2018株,并在PK-15細(xì)胞上對(duì)該毒株進(jìn)行了空斑純化和生長(zhǎng)曲線的繪制。為進(jìn)一步研究其遺傳進(jìn)化特點(diǎn),采用RT-PCR技術(shù)擴(kuò)增了其全基因組序列,并分別構(gòu)建了基于VP1基因和全基因組的系統(tǒng)進(jìn)化樹。結(jié)果表明,分離株HeNNY-1/2018在感染后第24小時(shí)病毒效價(jià)最高為107.6TCID50/m L;蚪M核苷酸同源性分析顯示,分離株HeNNY-1/2018與我國(guó)廣西分離毒株GXHZH-1和美國(guó)毒株KS15-01呈現(xiàn)較高的核苷酸同源性,分別為98.0%和98.7%。進(jìn)一步分子進(jìn)化樹分析顯示,該毒株與2018年報(bào)道的廣西地區(qū)的毒株處于較近的進(jìn)化分支,而與我國(guó)早年間分離得到的其他毒株親緣關(guān)系較遠(yuǎn)。本研究為河南地區(qū)塞內(nèi)卡病毒流行狀況提供了新的證據(jù),也為下一步研究該病的診斷和防控提供了有力支撐。
【文章來源】:中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(09)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【部分圖文】:
臨床樣品的病原檢測(cè)
使用已發(fā)表的用于全基因組擴(kuò)增的引物進(jìn)行擴(kuò)增,成功獲得了7條目的條帶,條帶大小基本與預(yù)期相符(見圖5)。經(jīng)克隆測(cè)序后,拼接得到HeNNY-1/2018毒株的全基因組序列信息,全長(zhǎng)共7 285 bp,其中1~668 bp為5′-UTR區(qū),7 215~7 285 bp為3′-UTR區(qū),中間部分為ORF區(qū),詳細(xì)數(shù)據(jù)已提交至GenBank數(shù)據(jù)庫(登錄號(hào)MK357116)。圖3 病毒空斑
病毒空斑
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]健康豬體內(nèi)塞尼卡病毒的分離和鑒定[J]. 張志,張麗麗,張美晶,劉爽,張峰,董雅琴,張慧,崔進(jìn),吳發(fā)興,李曉成. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2019(04)
[2]塞內(nèi)卡谷病毒熒光RT-RPA快速檢測(cè)方法的建立[J]. 林彥星,曹琛福,花群俊,黃超華,楊俊興,徐錚,史衛(wèi)軍,阮周曦,花群義. 中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2018(12)
[3]豬塞尼卡谷病毒病現(xiàn)狀與未來防控思考[J]. 樊曉旭,遲田英,吳曉東,王志亮. 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2018(02)
本文編號(hào):3263943
【文章來源】:中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2020,50(09)北大核心CSCD
【文章頁數(shù)】:7 頁
【部分圖文】:
臨床樣品的病原檢測(cè)
使用已發(fā)表的用于全基因組擴(kuò)增的引物進(jìn)行擴(kuò)增,成功獲得了7條目的條帶,條帶大小基本與預(yù)期相符(見圖5)。經(jīng)克隆測(cè)序后,拼接得到HeNNY-1/2018毒株的全基因組序列信息,全長(zhǎng)共7 285 bp,其中1~668 bp為5′-UTR區(qū),7 215~7 285 bp為3′-UTR區(qū),中間部分為ORF區(qū),詳細(xì)數(shù)據(jù)已提交至GenBank數(shù)據(jù)庫(登錄號(hào)MK357116)。圖3 病毒空斑
病毒空斑
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]健康豬體內(nèi)塞尼卡病毒的分離和鑒定[J]. 張志,張麗麗,張美晶,劉爽,張峰,董雅琴,張慧,崔進(jìn),吳發(fā)興,李曉成. 中國(guó)預(yù)防獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2019(04)
[2]塞內(nèi)卡谷病毒熒光RT-RPA快速檢測(cè)方法的建立[J]. 林彥星,曹琛福,花群俊,黃超華,楊俊興,徐錚,史衛(wèi)軍,阮周曦,花群義. 中國(guó)獸醫(yī)科學(xué). 2018(12)
[3]豬塞尼卡谷病毒病現(xiàn)狀與未來防控思考[J]. 樊曉旭,遲田英,吳曉東,王志亮. 中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2018(02)
本文編號(hào):3263943
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