豬流行性腹瀉（Porcine epidemic diarrhea,PED）是由豬流行性腹瀉病毒（Porcine epidemic diarrhea virus,PEDV）引起的一種以仔豬水樣腹瀉、嘔吐、脫水和高死亡率為主要特征的高度接觸性傳染病。該病首先在歐洲出現(xiàn)地區(qū)性暴發(fā),2000年后在亞洲流行嚴(yán)重,給全球養(yǎng)豬業(yè)造成了巨大的損失。由于PEDV毒株變異迅速,研究對(duì)PEDV具有抑制作用的天然活性化合物對(duì)于了解病毒感染致病機(jī)制以及防控PED具有重要意義。本研究通過(guò)RT-PCR、空斑形成試驗(yàn)、Western Blot和MTT試驗(yàn)等方法探究黃腐酚是否對(duì)PEDV感染具有抑制作用,并驗(yàn)證其作用效果。結(jié)果顯示,黃腐酚能夠明顯抑制PEDV感染Vero-E6細(xì)胞中病毒M基因mRNA水平,顯著降低細(xì)胞內(nèi)和上清中病毒粒子的產(chǎn)生;黃腐酚對(duì)Vero-E6細(xì)胞幾乎無(wú)毒性,抑制PEDV呈劑量依賴性且半數(shù)有效濃度為3.865μM;黃腐酚處理能明顯降低PEDV不同毒株（如CV777和SQ2014毒株）感染細(xì)胞中N蛋白表達(dá)水平。本研究為進(jìn)一步探究黃腐酚抗PEDV感染機(jī)制,研制抗PEDV或廣譜抗冠狀病毒藥物奠定了基礎(chǔ)。 

【文章來(lái)源】：病毒學(xué)報(bào). 2020,36(05)北大核心CSCD

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黃腐酚抑制豬流行性腹瀉病毒（PEDV）感染

PEDV屬于α-冠狀病毒屬，能引起不同成長(zhǎng)階段和不同品種豬的水樣腹瀉、脫水以及嘔吐，在仔豬群體中引起極高的死亡率。因此，PED對(duì)養(yǎng)殖場(chǎng)的影響極大，也給各國(guó)經(jīng)濟(jì)帶來(lái)不小的損失。隨著PEDV強(qiáng)毒株的不斷出現(xiàn)，早期研制的疫苗已不足以控制和預(yù)防PED的傳播[14]，且目前養(yǎng)殖場(chǎng)內(nèi)尚無(wú)能夠明顯改善PED癥狀和抑制PEDV的藥物，因此，開(kāi)發(fā)抗病毒藥物具有重要的意義。目前一些抗病毒藥物以及天然化合物已被報(bào)道具有抑制PEDV的作用，如利巴韋林，一種廣譜抗病毒藥物，目前已被證明具有抑制PEDV的潛力[15]；從紅藻中提取的格瑞弗森（Griffithsin）對(duì)PEDV具有抑制作用[16]；抗菌肽Caerin1.1通過(guò)與PEDV直接結(jié)合抑制病毒的體外增殖[17]。本研究中，經(jīng)驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，黃腐酚對(duì)PEDV具有較好的抑制效果，且對(duì)Vero-E6細(xì)胞幾乎無(wú)毒性。圖3 黃腐酚對(duì)CV777毒株和SQ2014毒株的抑制作用

圖2 黃腐酚半數(shù)細(xì)胞毒性濃度（CC50）和半數(shù)有效濃度（EC50）值黃腐酚是僅存于酒花中的異戊二烯基黃酮（圖4），是酒花中重要的黃酮類物質(zhì)之一，僅占酒花干重的0.1%～1%[18]。黃腐酚生物活性顯著，目前已有部分研究表明，黃腐酚在體外通過(guò)激活Nrf2-HMOX1通路抑制豬繁殖與呼吸障礙綜合征病毒（Porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV）的增殖并抑制PRRSV誘導(dǎo)的的氧化應(yīng)激[19]，臨床試驗(yàn)中能減輕PRRSV引起的臨床癥狀和炎癥反應(yīng)[20]。另外，黃腐酚對(duì)丙型肝炎病毒（Hepatitis C virus,HCV）具有一定的抑制作用：一方面，黃腐酚對(duì)HCV的替代模型牛病毒性腹瀉病毒（Bovine viral diarrhea virus,BVDV）有抑制作用[21,22]；另一方面，黃腐酚主要通過(guò)抑制氧化反應(yīng)和調(diào)節(jié)細(xì)胞的凋亡來(lái)改善HCV誘導(dǎo)的肝炎癥狀、脂肪變性和纖維化[23,24]，但尚無(wú)關(guān)于黃腐酚抑制PEDV感染的研究。本研究為后續(xù)研究黃腐酚抑制PEDV的作用機(jī)制以及探究其是否具有廣譜抗冠狀病毒的效果奠定了基礎(chǔ)。


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