牦牛肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的分離培養(yǎng)與鑒定
發(fā)布時(shí)間:2021-06-23 23:48
比較組織塊貼壁法和酶消化法對(duì)牦牛肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞(PASMCs)原代培養(yǎng)的差異,為牦牛PASMCs的分離培養(yǎng)及后續(xù)的研究建立細(xì)胞模型。采用組織塊貼壁法和0.2%Ⅰ型膠原酶消化法分別獲取牦牛PASMCs,倒置相差顯微鏡下比較2種方法分離的細(xì)胞形態(tài);臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力;α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(α-SMA)和鈣調(diào)節(jié)蛋白(calponin)免疫熒光法對(duì)細(xì)胞進(jìn)行鑒定;細(xì)胞計(jì)數(shù)法獲得細(xì)胞生長(zhǎng)曲線(xiàn)并進(jìn)行觀察。結(jié)果顯示,顯微鏡下2種方法獲得的PASMCs均為長(zhǎng)梭形,呈典型的"峰-谷"狀結(jié)構(gòu),且傳代存活率均在98.5%以上;2種細(xì)胞免疫熒光鑒定結(jié)果均表明培養(yǎng)的細(xì)胞為PASMCs;組織塊貼壁法和酶消化法的PASMCs生長(zhǎng)曲線(xiàn)無(wú)明顯差別(P>0.05)。結(jié)果表明,2種方法均能順利分離得到較純的PASMCs,但各有優(yōu)缺點(diǎn),因此可根據(jù)具體情況選用牦牛PASMCs的原代分離培養(yǎng)方法。
【文章來(lái)源】:中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(10)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【部分圖文】:
倒置顯微鏡觀察PASMCs形態(tài)(100×)
α-SMA和calponin細(xì)胞鑒定(320×)
PASMCs生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖
本文編號(hào):3245903
【文章來(lái)源】:中國(guó)獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(10)北大核心CSCD
【文章頁(yè)數(shù)】:6 頁(yè)
【部分圖文】:
倒置顯微鏡觀察PASMCs形態(tài)(100×)
α-SMA和calponin細(xì)胞鑒定(320×)
PASMCs生長(zhǎng)曲線(xiàn)圖
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