鴨疫里氏桿菌（Riemerella anatipestifer,RA）感染是當前危害全球養(yǎng)鴨業(yè)的重要傳染病之一。目前發(fā)現(xiàn)RA至少有21種血清型。但即使是在同一種血清型中,不同來源菌株之間的毒力也存在較大差異。一旦鴨疫里氏桿菌感染鴨群,它可以造成該病的廣泛流行且徹底根除十分困難,而且存在反復感染發(fā)作的可能性,所以我們急需要一種安全有效的疫苗以預防該病。而目前有關鴨疫里氏桿菌感染的分子致病機理及免疫機制的研究報道較少。運用分子生物學的方法深入研究鴨疫里氏桿菌感染的分子致病機理及免疫機制來預防該病的發(fā)生是當前研究的熱點。本研究以鴨疫里氏桿菌血清1型云夢株（RA-YM）為親本株,選取了其中一對雙組份調控系統(tǒng)06537/06542為研究對象,通過構建重組自殺性質粒,采用接合轉移方法構建了RA-YM株的06537/06542基因缺失株,對該基因缺失株的生物學特性進行了研究,并比較了其與RA-YM親本株對雛鴨的致病性。取得的主要研究結果如下:1構建了RA-YM 06537/06542基因缺失株根據(jù)RA-YM株06537/06542基因的序列,通過重組自殺性質粒p RE112-LSR,利用接合轉移同源... 

【文章來源】：華中農業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：63 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

pMD18-T質粒圖譜

cript II SK（+），自殺性質粒 pRE112（圖 3-2）及宿主菌 保存。觀霉素抗性（SpcR）基因 pIC333 質粒由本實驗室保存。體的結構示意圖如下：圖 3-1:pMD18-T 質粒圖譜Fig.3-1:Restriction map of pMD18-T

結構 RNA 聚合酶發(fā)生相互作用。而在 373bp-462bp 的位置上還有蛋白甘露糖基轉移酶結構域。從中可以看出，06542 基因符合反應調控因子 RR 一般結構特點。通過生物信息學分析，發(fā)現(xiàn) 06537/06542 是一對分別具有 BaeS 和 OmpR 保守性區(qū)域的雙組份調控系統(tǒng)。已有的研究報道發(fā)現(xiàn) BaeS 通常與 BaeR 組成一對雙組份調控系統(tǒng)，而 OmpR 則通常與 EnvZ 組成一對雙組份調控系統(tǒng)，BaeS 和 OmpR 這種組合的雙組份系統(tǒng)當前尚無研究報道。而且，06537 基因的 BaeS 保守性區(qū)域前還具有一個與細菌 SNF2 解旋酶相關的結構域，這種 SNF2_assoc-HisKA-HATPase_c 的HK 結構域組合當前也未被報道過（附錄圖 3）。因此，這種新的 HK 結構域組合和新的 TCS 組合對鴨疫里氏桿菌生物學特性和致病性的影響也是后續(xù)研究的重點。運用TMHMM 軟件對RAYM_06537和RAYM_06542的跨膜螺旋區(qū)域進行分析（圖 4-1A，圖 4-1B），結果發(fā)現(xiàn) RAYM_06537 有兩個跨膜區(qū)，其中第 1-4 氨基酸位于細胞膜內，第 5-27 氨基酸為跨膜螺旋區(qū)，第 28-258 氨基酸在細胞膜外，第259-281 氨基酸為第二個跨膜螺旋區(qū)，第 282-514 氨基酸在細胞膜內；RAYM_06542上無跨膜區(qū)。

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3239925