小花棘豆中苦馬豆素對羊的毒性作用及大鼠星形膠質(zhì)細胞影響的研究
本文關(guān)鍵詞:小花棘豆中苦馬豆素對羊的毒性作用及大鼠星形膠質(zhì)細胞影響的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:本文通過在羊飼糧中添加小花棘豆,研究小花棘豆中苦馬豆素對羊的毒性作用及體外腦細胞的影響。試驗內(nèi)容分為以下3個方面。試驗一:小花棘豆的攻毒試驗本試驗旨在驗證小花棘豆對卡拉庫爾羊組織器官的損傷,為研究其抗氧化指標(biāo)的變化提供依據(jù)。試驗選取12只體重為16.00±1.40 kg的卡拉庫爾羊,采用單因素隨機分組設(shè)計,將其分為2個組,每組6只羊,每只羊為1個重復(fù),對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗組在基礎(chǔ)飼糧中添加400 g/d小花棘豆干粉。試驗期42 d,每7 d進行一次稱重、采血,在42 d時,開展屠宰試驗,并對羊只的組織進行取樣。應(yīng)用全自動生化分析儀和HE染色分別對血清指標(biāo)和組織病理進行測定。結(jié)果表明:與對照組相比,試驗組出現(xiàn)典型的臨床癥狀,組織和器官出現(xiàn)病理變化,AST、ALT、AKP、BUN、GLU、TC含量極顯著升高(P0.01),而TG極顯著降低(P0.01)。本試驗表明小花棘豆中能夠引起卡拉庫爾羊的組織器官發(fā)生病變和損傷。試驗二:小花棘豆對羊血漿及腦組織抗氧化指標(biāo)的影響本試驗旨在研究小花棘豆對卡拉庫爾羊血漿及腦組織抗氧化指標(biāo)的影響,為進一步完善小花棘豆中毒機理提供依據(jù)。試驗選取12只體重為16±1.4 kg的卡拉庫爾羊,采用單因素隨機分組設(shè)計,將其分為2個組,每組6只羊,每只羊為1個重復(fù),對照組飼喂基礎(chǔ)飼糧,試驗組基礎(chǔ)飼糧中添加400 g/d小花棘豆干粉。試驗期42 d,每7 d進行一次稱重和采血,在42 d時,開展屠宰試驗,并對羊只的腦組織進行取樣。應(yīng)用紫外可見分光光度計和酶標(biāo)儀分別對血漿和腦組織指標(biāo)進行測定。結(jié)果表明:與對照組相比,1)試驗組血漿中SOD活性在連續(xù)攻毒15 d時顯著降低(P0.05),攻毒21 d至42 d時極顯著降低(P0.01);試驗組GSH含量在連續(xù)攻毒8 d時顯著降低(P0.05),攻毒15 d至試驗終止時極顯著降低(P0.01);MDA含量在連續(xù)攻毒15 d至42 d時極顯著升高(P0.01);TSH和NPSH含量在連續(xù)攻毒21 d時顯著降低(P0.05),攻毒到28 d至42 d時極顯著降低(P0.01);連續(xù)攻毒21 d時測得AMA含量顯著降低(P0.05),攻毒到36 d至42 d時極顯著降低(P0.01);試驗組羊NO含量在攻毒21 d至42 d時極顯著升高(P0.01);試驗組羊ET-1含量在攻15d至21 d時顯著升高(P0.05),攻毒36d時表現(xiàn)差異不顯著(P0.05);試驗組羊CGRP含量在攻毒21 d時顯著升高(P0.05),攻毒28 d至42 d時極顯著升高(P0.01);2)腦組織中SOD活性和GSH含量極顯著低于對照組(P0.01),而MDA、NO和ET-1含量極顯著高于對照組(P0.01)。本試驗表明小花棘豆能夠?qū)е聶C體抗氧化能力降低,使得組織器官受到損傷。試驗三:小花棘豆中苦馬豆素對大鼠星形膠質(zhì)細胞AQP1、AQP4的影響本試驗旨在研究小花棘豆中苦馬豆素對星形膠質(zhì)細胞的毒性作用及水通道蛋白的影響,為研究小花棘豆中苦馬豆素與腦水腫之間的關(guān)系提供依據(jù)。試驗采用不同濃度SW(0、0.5、1.0、2.0 mg/mL)細胞培養(yǎng)液對星形膠質(zhì)細胞進行培養(yǎng),分別培養(yǎng)3h、6h、12h、24h,采用MTT方法和Western Blot技術(shù)對細胞活性、存活率及AQP1、AQP4相對表達量進行測定。結(jié)果表明:1)攻毒劑量越大和攻毒時間越長,細胞的存活率越低;2)與對照組相比,各試驗組中AQP1、AQP4的相對表達量都有所升高,其中1.0 mg/mL SW組和2.0 mg/mL SW組中AQP1和AQP4相對表達量均極顯著增加(P0.01)。本試驗表明小花棘豆中苦馬豆素能夠降低細胞存活率及調(diào)節(jié)水通道蛋白的表達。
【關(guān)鍵詞】:小花棘豆 苦馬豆素 羊 血漿指標(biāo) 星形膠質(zhì)細胞 AQP1 AQP4
【學(xué)位授予單位】:塔里木大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:S859.82
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-11
- 縮略語表(Abbreviations)11-12
- 第一章 緒論12-22
- 小花棘豆的毒理作用的研究12-14
- 1.1 小花棘豆的認識13-14
- 1.1.1 小花棘豆的毒性成分13
- 1.1.2 小花棘豆中毒引起的臨床癥狀13
- 1.1.3 小花棘豆的毒性作用13-14
- 水通道蛋白1和 4 在腦組織中的研究進展14-22
- 1.2 AQP認識14-21
- 1.2.1 腦中AQP1的分布、表達及功能15-16
- 1.2.3 腦中AQP4的分布、表達及功能16-18
- 1.2.4 腦中AQP1和AQP4的調(diào)節(jié)18-20
- 1.2.5 星形膠質(zhì)細胞(Astrocyte)簡介20-21
- 1.2.6 結(jié)束語與展望21
- 1.3 有待研究問題21-22
- 第二章 小花棘豆攻毒試驗驗證22-29
- 2.1 材料和方法22-25
- 2.1.1 試驗材料22
- 2.1.2 試劑與儀器22-23
- 2.1.3 方法23-25
- 2.2 結(jié)果與分析25-27
- 2.2.1 臨床癥狀25
- 2.2.2 剖檢觀察25
- 2.2.3 組織學(xué)觀察25-26
- 2.2.4 血漿檢測26
- 2.2.5 體重變化26-27
- 2.3 討論27-28
- 2.4 小結(jié)28-29
- 第三章 小花棘豆對羊血漿及腦組織指標(biāo)的影響29-41
- 3.1 材料和方法29-32
- 3.1.1 試驗材料29
- 3.1.2 試劑與儀器29-30
- 3.1.3 方法30-32
- 3.2 結(jié)果32-37
- 3.2.1 小花棘豆對羊血漿SOD活性的變化32-33
- 3.2.2 小花棘豆對羊血漿GSH含量的變化33
- 3.2.3 小花棘豆對羊血漿MDA含量的變化33
- 3.2.4 小花棘豆對羊血漿TSH含量的變化33-34
- 3.2.5 小花棘豆對羊血漿NPSH含量的變化34
- 3.2.6 小花棘豆對羊血漿AMA含量的變化34-35
- 3.2.7 小花棘豆對羊血漿NO含量的變化35
- 3.2.8 小花棘豆對羊血漿ET-1 含量的變化35-36
- 3.2.9 小花棘豆對羊血漿CGRP含量的變化36
- 3.2.10 小花棘豆腦組織中 SOD 活性及 GSH、MDA、NO 和 ET-1 含量的變化36-37
- 3.3 討論37-40
- 3.3.1 小花棘豆對羊血漿中SOD的變化37
- 3.3.2 小花棘豆對羊血漿中GSH的變化37-38
- 3.3.3 小花棘豆對羊血漿中MDA含量的變化38
- 3.3.4 小花棘豆苦馬豆素對羊血漿中TSH含量和NPSH含量的變化38-39
- 3.3.5 小花棘豆對羊血漿中NO含量的變化39
- 3.3.6 小花棘豆對羊血漿中ET-1 和CGRP含量的變化39-40
- 3.4 小結(jié)40-41
- 第四章 苦馬豆素對星形膠質(zhì)細胞AQP1、AQP4的影響41-52
- 4.1 材料和方法41-47
- 4.1.1 試驗材料41
- 4.1.2 試劑與儀器41-43
- 4.1.3 方法43-47
- 4.2 結(jié)果47-48
- 4.2.1 星形膠質(zhì)細胞的活性分布47
- 4.2.2 MTT法檢測苦馬豆素作用星形膠質(zhì)細胞IC50測定及體外細胞存活的影響47
- 4.2.3 Western blot檢測測不同濃度苦馬豆素作用星形膠質(zhì)細胞中AQP1、AQP4相對表達量的影響47-48
- 4.3 討論48-51
- 4.3.1 星形膠質(zhì)細胞的選擇48-49
- 4.3.2 星形膠質(zhì)細胞與AQP1和AQP4關(guān)系49
- 4.3.3 星形膠質(zhì)細胞AQP1和AQP4表達變化49-51
- 4.4 小結(jié)51-52
- 第五章 結(jié)論52-53
- 參考文獻53-60
- 致謝60-61
- 作者簡介61
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