哺乳動物精子通過附睪的運輸、保護和儲存過程中,獲得受精能力,是精子成熟和儲存的主要場所。精子也和其他任何一種細胞一樣面對氧化損傷。精子對脂質(zhì)過氧化、DNA損傷的進攻極為敏感,從而影響活力及受精能力。附睪為精子提供免受外界壓力的環(huán)境并促進其成熟。附睪含有一系列抗氧化劑,包括谷胱甘肽過氧化物酶5（GPx5）,GPx5可以保護精子免受氧化應(yīng)激,維持公畜生殖道內(nèi)自由基正常水平,促進精子發(fā)育成熟,其在提高雄性動物繁殖力上發(fā)揮著重要作用。國內(nèi)現(xiàn)沒有關(guān)于GPx5基因在駱駝附睪中的研究,因此,本研究以駱駝為研究對象,檢測了不同年齡段（三歲、五歲、六歲）駱駝附睪不同部位GPx5的表達規(guī)律。研究結(jié)果如下:1.采用熒光定量PCR技術(shù)檢測GPx5基因在不同年齡駱駝附睪不同部位上的mRNA水平表達情況。結(jié)果表明:各年齡階段（三歲、五歲、六歲）駱駝附睪表達量存在差異。在三歲駱駝、五歲駱駝及六歲駱駝附睪頭部為GPx5 mRNA的主要表達部位,表達量極顯著高于附睪體部和附睪尾部（P<0.01）。五歲駱駝附睪頭部表達量極顯著高于三歲駱駝和六歲駱駝（P<0.01）,三歲駱附睪頭部表達量與六歲頭部表達量無顯著差... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學內(nèi)蒙古自治區(qū)

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語表
1 引言
    1.1 附睪的概述
    1.2 附睪的功能
    1.3 附睪蛋白分泌特點
    1.4 附睪氧化應(yīng)激
        1.4.1 精子與活性氧
        1.4.2 附睪中的主要抗氧化劑
    1.5 附睪特異谷胱甘肽過氧化物酶-5(GPx5)
        1.5.1 附睪特異谷胱甘肽氧化物酶的結(jié)構(gòu)
        1.5.2 谷胱甘肽過氧化物酶-5(GPx5)的作用
        1.5.3 GPx5表達特性
        1.5.4 GPx5表達調(diào)控
        1.5.5 GPx5基因的功能研究
        1.5.6 GPx5和頂體反應(yīng)的關(guān)系
    1.6 研究目的和意義
2 技術(shù)路線
3 實驗材料與方法
    3.1 實驗材料
    3.2 主要實驗試劑
    3.3 主要儀器
    3.4 實驗方法
        3.4.1 總RNA的提取
        3.4.2 總RNA反轉(zhuǎn)錄
        3.4.3 目的基因熒光定量PCR
        3.4.4 總蛋白的提取
        3.4.5 Western Blot
        3.4.6 石蠟切片
        3.4.7 免疫組化
4 結(jié)果與分析
    4.1 組織總RNA電泳檢測
    4.2 RT-qPCR產(chǎn)物檢測
    4.3 GPx5與GAPDH基因RT-qPCR結(jié)果
    4.4 GPx5基因的時空表達特異性
    4.5 蛋白濃度測定
    4.6 GPx5蛋白在不同年齡駱駝附睪上的表達
    4.7 GPx5蛋白在不同年齡駱駝附睪上的定位
5 討論
6 結(jié)論
7 展望
致謝
參考文獻
作者簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]牦牛GPX5基因CDS區(qū)的克隆和表達研究[J]. 朱江江,袁夢,李鵬程,趙旺生.  中國畜牧雜志. 2019(10)
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博士論文
[1]谷胱甘肽過氧化物酶5在內(nèi)蒙古絨山羊附睪的表達與調(diào)控[D]. 范曉梅.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2017
[2]綿羊附睪GPx5基因表達調(diào)控的分子機制[D]. 烏亞罕.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2016

碩士論文
[1]永生化綿羊附睪上皮細胞系的建立及其生物學特性分析[D]. 宋慧子.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學 2019
[2]綿羊附睪特異谷胱甘肽過氧化物酶（GPx5）基因的克隆與表達[D]. 程彩虹.山西農(nóng)業(yè)大學 2013



本文編號：3205548