發(fā)布時間：2021-05-24 00:18

　　IFN-τ和BoLA-Ⅰ在奶牛妊娠早期提高母體子宮對胎兒的容受性,提供子宮內免疫抑制環(huán)境,在建立妊娠穩(wěn)定著床等妊娠免疫問題上發(fā)揮了關鍵性作用。IFN-τ是反芻動物的特征性物質,又被定義為抗黃體溶解蛋白,在妊娠早期被胚胎滋養(yǎng)層細胞分泌。由于從IFN-τ出現到消失的時間非常短暫,所以有關IFN-τ在反芻動物妊娠早期的特異性調節(jié)功能還不是很清楚。主要組織相容性復合體（MHC）Ⅰ類抗原在妊娠早期發(fā)揮著在胚胎植入時抑制免疫排斥的作用,在牛被命名為BoLA-Ⅰ。奶牛子宮對胎兒的容受性和Bo LA-Ⅰ密切相關。IFN-τ調節(jié)BoLA-Ⅰ的機制尚不明確,妊娠早期母體-胎兒界面的妊娠免疫問題需要研究。本研究確認了胚胎滋養(yǎng)層分泌的IFN-τ通過作用于子宮內膜腔上皮細胞表達Bo LA-Ⅰ,進而調節(jié)早期妊娠免疫的潛在機制,主要研究內容和實驗結果如下:（1）為了研究妊娠早期的子宮內膜變化,我們選取妊娠早期9-20天內的三頭奶牛子宮內膜組織進行組織學分析,結果顯示懷孕早期奶牛子宮內膜組織明顯增生變厚,且子宮內膜腔上皮之間的間隙增寬、血管增多,有利于胚胎對子宮內膜的侵襲與附著以及生長和發(fā)育;此際子宮內膜幾乎沒有中性... 

【文章來源】：華中農業(yè)大學湖北省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數】：84 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
縮寫詞表
第一章 文獻綜述
    1 研究背景——奶牛妊娠免疫
    2 IFN-τ——反芻動物的“hCG”
    3 BoLA-Ⅰ——牛的Ⅰ型主要組織相容性復合體
    4 妊娠相關轉錄因子及信號通路
    5 研究的目的意義
    6 研究的主要內容
第二章 妊娠早期奶牛子宮內膜組織檢測
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 試驗材料
            2.1.1 試驗動物
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 主要試劑及耗材
            2.1.4 主要溶液及培養(yǎng)基的配制
        2.2 試驗方法
            2.2.1 樣品的采集及預處理
            2.2.2 引物設計
            2.2.3 總RNA的提取與反轉錄
            2.2.4 RT-qPCR檢測
            2.2.5 細胞蛋白的提取及Western Blot分析
            2.2.6 組織學檢測
            2.2.8 數據處理分析
    3 結果與分析
        3.1 奶牛子宮內膜組織學變化
        3.2 奶牛子宮內膜組織IL-6 及IL-10 的表達變化
        3.3 奶牛子宮內膜組織IFN-τ 及Bo LA-Ⅰ的表達變化
        3.4 奶牛子宮內膜組織相關核轉錄因子的表達變化
    4 討論
第三章 奶牛子宮內膜腔上皮細胞的培養(yǎng)及鑒定
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 試驗材料
            2.1.1 試驗動物
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 主要試劑及耗材
            2.1.4 主要溶液及培養(yǎng)基的配制
        2.2 試驗方法
            2.2.1 樣品的采集及預處理
            2.2.2 奶牛子宮內膜腔上皮細胞原代培養(yǎng)及傳代
            2.2.3 奶牛子宮內膜腔上皮細胞的純化
            2.2.4 免疫組化檢測
            2.2.5 激光共聚焦
    3 結果
        3.1 奶牛子宮內膜腔上皮細胞原代培養(yǎng)及傳代
        3.2 奶牛子宮內膜腔上皮細胞免疫組織化學鑒定
        3.3 奶牛子宮內膜腔上皮細胞激光共聚焦鑒定。
    4 討論
第四章 IFN-τ 對奶牛子宮內膜腔上皮細胞Bo LA-Ⅰ表達的影響
    1 前言
    2 材料與方法
        2.1 試驗材料
            2.1.1 實驗細胞
            2.1.2 主要儀器
            2.1.3 主要試劑及耗材
            2.1.4 主要溶液及培養(yǎng)基的配制
        2.2 試驗方法
            2.2.1 樣品的采集及預處理
            2.2.2 引物設計
            2.2.3 總RNA的提取與反轉錄
            2.2.4 RT-qPCR檢測
            2.2.5 細胞蛋白的提取及Western Blot分析
            2.2.6 ELISA檢測
            2.2.7 數據處理分析
    3 結果
        3.1 IFN-τ 對奶牛子宮內膜腔上皮細胞IL-6 和IL-10 表達的影響
        3.2 IFN-τ 對奶牛子宮內膜腔上皮細胞BoLA-Ⅰ表達的影響
        3.3 IFN-τ 對奶牛子宮內膜腔上皮細胞妊娠相關轉錄因子的影響
    4 討論
第五章 結論與展望
    1 結論
    2 展望
參考文獻
發(fā)表文章
致謝



本文編號：3203225