發(fā)布時(shí)間：2021-05-21 00:42

　　為準(zhǔn)確地鑒別診斷新澤西型水泡性口炎病毒（VSV-NJ）和印第安納型水泡性口炎病毒（VSV-IND）,本研究建立了可以同時(shí)檢測(cè)和鑒別診斷VSV-NJ和VSV-IND的雙重?zé)晒釸T-PCR方法,并對(duì)方法性能進(jìn)行了測(cè)試和初步應(yīng)用。結(jié)果顯示,建立的雙重?zé)晒釸T-PCR特異性為100%,最低檢測(cè)限1～10個(gè)拷貝/μL,擴(kuò)增效率E值均在99%左右,R2值分別為0.999和0.998。VSV-NJ和VSV-IND單熒光RT-PCR與雙重?zé)晒釸T-PCR的相關(guān)性系數(shù)分別為0.999 7和0.999 4,與單熒光RT-PCR相比,該引物和探針的雙重體系混合對(duì)特異性和敏感性均未產(chǎn)生明顯干擾。用已知VSV-NJ及VSV-IND陽(yáng)性核酸驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)符合率為100%,對(duì)50份臨床樣品的檢測(cè)均為陰性,與單熒光RT-PCR結(jié)果一致。本研究建立的雙重?zé)晒釸T-PCR方法實(shí)現(xiàn)了VSV-NJ和VSV-IND的同步檢測(cè)和鑒別,為水泡性口炎的防控提供了技術(shù)儲(chǔ)備。 

【文章來(lái)源】：中國(guó)動(dòng)物檢疫. 2020,37(10)

【文章頁(yè)數(shù)】：5 頁(yè)

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗(yàn)質(zhì)控品
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 引物和探針設(shè)計(jì)與合成
    1.4 陽(yáng)性質(zhì)控品濃度測(cè)定
    1.5 雙重?zé)晒釸T-PCR反應(yīng)
    1.6 標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和最低檢測(cè)限確定
    1.7 特異性測(cè)試
    1.8 雙重?zé)晒釸T-PCR和單熒光RT-PCR比較
    1.9 方法驗(yàn)證
2 結(jié)果
    2.1 陽(yáng)性質(zhì)控品定量
    2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和最低檢測(cè)限
    2.3 特異性檢測(cè)
    2.4 雙重?zé)晒釸T-PCR和單熒光RT-PCR比較
    2.5 驗(yàn)證
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