空腸彎曲桿菌（Campylobacter20Jejuni）是一種人畜共患病的病原菌,在世界范圍內(nèi)引起大規(guī)模的感染,該菌對(duì)生存條件的要求較為嚴(yán)苛。近年來有學(xué)者發(fā)現(xiàn),該菌在一定條件下可以形成一種能夠抵抗外界環(huán)境不良影響的生物膜,這也是該菌能夠在嚴(yán)峻的環(huán)境中存活并產(chǎn)生耐藥性的重要原因。本研究臨床采取豬的盲腸部位作為分離空腸彎曲桿菌的試驗(yàn)樣品,對(duì)空腸彎曲桿菌進(jìn)行分離培養(yǎng),分別采用常規(guī)生化鑒定以及PCR檢測(cè)兩種方法對(duì)分離到的菌株進(jìn)行鑒定,比較兩種方法的差異。經(jīng)鑒定確認(rèn)為空腸彎曲桿菌的菌株,通過結(jié)晶紫染色、掃描電鏡等方法,確認(rèn)空腸彎曲桿菌是否具有在體外形成生物膜的能力,建立其生物膜體外模型,并對(duì)其形成的過程進(jìn)行了觀察；正交實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)空氣條件,環(huán)境溫度以及培養(yǎng)基類型3個(gè)因素對(duì)空腸彎曲桿菌生物膜形成的影響。結(jié)果表明：用厭氧罐與焦性沒食子酸結(jié)合的方法分離空腸彎曲桿菌是經(jīng)濟(jì)有效的；PCR法鑒定空腸彎曲桿菌,相對(duì)常規(guī)生化方法來說具有省時(shí)省力且靈敏準(zhǔn)確的優(yōu)點(diǎn)；分離所得到的空腸彎曲桿菌具有在體外形成生物膜的能力；空腸彎曲桿菌生物膜形成的的最佳條件為常規(guī)空氣條件,即37℃以及MHB培養(yǎng)基。生物膜菌在其生存方式、胞... 

【文章來源】：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)黑龍江省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：88 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 前言
    1.1 空腸彎曲桿菌的病原學(xué)特征
        1.1.1 生物學(xué)
        1.1.2 致病性及致病機(jī)理
    1.2 空腸彎曲桿菌的流行病學(xué)
        1.2.1 流行的基本狀況
        1.2.2 傳染源、傳播途徑、易感動(dòng)物
    1.3 空腸彎曲桿菌耐藥性
    1.4 空腸彎曲桿菌的診斷方法的研究
    1.5 細(xì)菌生物膜概述
        1.5.1 生物膜的形成以及影響因素
        1.5.2 細(xì)菌生物膜的致病機(jī)理
        1.5.3 細(xì)菌生物膜的耐藥性及耐藥機(jī)制
        1.5.4 細(xì)菌生物膜鑒定方法的研究進(jìn)展
        1.5.5 生物膜菌對(duì)機(jī)體免疫功能的影響
    1.6 細(xì)胞因子與抗氧化系統(tǒng)
        1.6.1 細(xì)胞因子
        1.6.2 抗氧化系統(tǒng)與自由基
    1.7 空腸彎曲桿菌生物膜的研究進(jìn)展
    1.8 研究的目的和意義
2 試驗(yàn)材料
    2.1 試驗(yàn)儀器
    2.2 試驗(yàn)材料及培養(yǎng)基
3 試驗(yàn)方法
    3.1 空腸彎曲桿菌的分離、鑒定
        3.1.1 空腸彎曲桿菌的分離純化
        3.1.2 鑒定
        3.1.3 細(xì)菌保存
    3.2 生物膜體外模型建立
        3.2.1 生物膜形成能力的分析
        3.2.2 光鏡及掃描電鏡觀察
    3.3 空腸彎曲桿菌生物膜的相關(guān)特性的研究
        3.3.1 環(huán)境因素對(duì)生物膜形成的影響
        3.3.2 生物膜菌與浮游菌在合成胞外物質(zhì)的差異
    3.4 浮游細(xì)菌和粘附細(xì)菌對(duì)動(dòng)物致病性的研究
        3.4.1 菌株處理
        3.4.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理
        3.4.3 宿主肝臟內(nèi)細(xì)菌清除的研究
        3.4.4 小鼠血漿中細(xì)胞因子及氧化抗氧化指標(biāo)的檢測(cè)
4 結(jié)果
    4.1 病原菌分離及鑒定
        4.1.1 空腸彎曲桿菌分離
        4.1.2 空腸彎桿菌的鑒定
    4.2 空彎生物膜體外模型的建立結(jié)果
        4.2.1 空腸彎曲桿菌可形成生物膜能力的分析結(jié)果
    4.3 空彎生物膜相關(guān)特性的研究結(jié)果
        4.3.1 環(huán)境因素對(duì)空腸彎曲桿菌生物膜形成的影響
        4.3.2 兩種細(xì)菌胞外多糖和菌體總蛋白的測(cè)定
        4.3.3 菌體總蛋白含量的測(cè)定
    4.4 兩種空腸彎曲桿菌對(duì)感染動(dòng)物機(jī)體的影響
        4.4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物感染
        4.4.2 兩種狀態(tài)空腸彎曲桿菌對(duì)動(dòng)物的致病性
        4.4.3 兩種細(xì)菌在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體內(nèi)的清除情況
        4.4.4 感染小鼠血漿中炎性因子和氧化抗氧化指標(biāo)的檢測(cè)
        4.4.5 感染小鼠抗氧化指標(biāo)的檢測(cè)
5 討論
    5.1 病原菌分離及鑒定
    5.2 C.jejuni生物膜體外模型的建立
    5.3 空彎生物膜相關(guān)特性的研究結(jié)果
        5.3.1 環(huán)境因素對(duì)空腸彎曲桿菌生物膜形成的影響
        5.3.2 兩種細(xì)菌胞外多糖和菌體總蛋白的測(cè)定
    5.4 兩種空腸彎曲桿菌對(duì)動(dòng)物的致病性
        5.4.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的處理
        5.4.2 兩種空腸彎曲桿菌對(duì)動(dòng)物的致病性
        5.4.3 兩種細(xì)菌在感染動(dòng)物肝臟內(nèi)的清除情況
        5.4.4 對(duì)感染動(dòng)物細(xì)胞因子和氧化抗氧化指標(biāo)的檢測(cè)
6 結(jié)論
致謝
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文



本文編號(hào)：3176322