為研究不同濃度的芒硝對體外培養(yǎng)的驢皮成纖維細胞增殖、凋亡的影響,本試驗采用組織塊法體外培養(yǎng)驢皮成纖維細胞,并用HE、Masson染色鑒定;再添加高（2 000、1 500μg/mL）、中（1 000、500、250μg/mL）和低濃度（100、50、10μg/mL）芒硝體外培養(yǎng)驢皮成纖維細胞,用MTT和Caspase-3法分別檢測成纖維細胞增殖率和凋亡率;最后用實時熒光定量PCR、ELISA法檢測不同濃度（1 500、250、10μg/mL）芒硝培養(yǎng)液中影響驢皮成纖維細胞膠原蛋白合成的相關基因表達量及蛋白濃度。結果顯示,培養(yǎng)5 d時,驢皮成纖維細胞開始從組織塊邊緣爬出,25 d后長滿培養(yǎng)皿;HE染色呈典型的梭形,驢皮成纖維細胞中膠原纖維經(jīng)Masson染色呈藍色。中濃度芒硝培養(yǎng)液組成纖維細胞的增殖率顯著高于高、低濃度組（P<0.05）,相應地,中濃度組的凋亡因子Caspase-3活性顯著低于其他兩組（P<0.05）。相比于24 h,芒硝作用于成纖維細胞48 h能顯著提高膠原蛋白合成相關基因的表達量（P<0.05）,250μg/mL濃度的效果最佳。綜合上述結果,組織塊培養(yǎng)... 

【文章來源】：中國畜牧獸醫(yī). 2020,47(07)北大核心

【文章頁數(shù)】：12 頁

【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 試驗動物
    1.2 主要試劑及儀器
    1.3 細胞培養(yǎng)
    1.4 細胞鑒定
        1.4.1 細胞HE染色
        1.4.2 細胞Masson染色
    1.5 MTT法檢測不同濃度芒硝對成纖維細胞的影響
    1.6 Caspase-3法檢測不同濃度芒硝對成纖維細胞的影響
    1.7 實時熒光定量PCR法檢測各基因mRNA的表達量
    1.8 ELISA法檢測各蛋白濃度
    1.9 數(shù)據(jù)分析
2 結 果
    2.1 細胞培養(yǎng)與鑒定
        2.1.1 組織塊法培養(yǎng)成纖維細胞
        2.1.2 成纖維細胞HE染色鑒定
        2.1.3 成纖維細胞Masson染色鑒定
    2.2 芒硝對成纖維細胞增殖、凋亡的影響
        2.2.1 成纖維細胞增殖率
        2.2.2 Caspase-3蛋白活性
    2.3 芒硝對成纖維細胞合成膠原蛋白相關基因表達的影響
        2.3.1 TGF-β1、Smad3及Smad7基因
        2.3.2 COL1A1、COL1A2及COL3A1基因
    2.4 芒硝對成纖維細胞TGF-β1、COL1A1、COL1A2蛋白濃度的影響
3 討 論
4 結 論


【參考文獻】：
期刊論文
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[3]SiRNA-Smad3沉默人瘢痕疙瘩成纖維細胞中Smad3對纖維連接蛋白及Ⅰ型膠原表達的影響[J]. 劉波,果磊.  重慶醫(yī)科大學學報. 2010(04)
[4]人心房成纖維細胞體外組織塊貼壁培養(yǎng)與鑒定[J]. 張建成,黃宇堅.  莆田學院學報. 2010(02)
[5]中藥芒硝外敷對腹部手術后患者胃腸功能恢復的影響[J]. 覃梅梅,盤雪瑩.  護理學報. 2009(15)
[6]機械破碎法分離奶牛乳腺上皮細胞的體外培養(yǎng)研究[J]. 林桂娟,王恬,陳才勇.  畜牧與獸醫(yī). 2004(07)
[7]牛乳腺上皮細胞的分離培養(yǎng)[J]. 李震,王英,劉惠莉,張德福.  上海農(nóng)業(yè)學報. 2000(03)

碩士論文
[1]芒硝外用在創(chuàng)面愈合中的作用及機制的研究[D]. 劉飛.西南醫(yī)科大學 2018
[2]芒硝溶液對于大鼠機械性皮損作用的實驗研究[D]. 劉莎.長春中醫(yī)藥大學 2015



本文編號：3161121