大豆球蛋白單抗制備和ELISA檢測試劑盒研究及其應用
發(fā)布時間:2021-04-16 12:19
大豆營養(yǎng)豐富,但是同時也含有多種抗營養(yǎng)因子(antinutritional factors, ANFs),是人和動物食品中一種重要的過敏原。大豆中含有的大豆球蛋白(glycinin)和p-伴大豆球蛋白(β-conglycinin)是最主要的大豆抗原蛋白。本試驗建立了檢測大豆及大豆制品中大豆球蛋白的一種雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附方法(enzyme-link immunosorbent assay, ELISA)。研究分為三個試驗,試驗一:用純化的大豆球蛋白分別免疫Balb/c小鼠和新西蘭白兔,制備了鼠抗大豆球蛋白單克隆抗體(monoclonal antibody, Mab)和兔抗大豆球蛋白多克隆抗體(polyclonal antibody, Pab)。經(jīng)間接法ELISA測定兔抗大豆球蛋白多克隆抗體滴度,在血清稀釋倍數(shù)為10,000時仍然為陽性反應,這個滴度滿足試驗的要求。通過與大豆中其它蛋白的交叉反應試驗表明,所制備的單克隆抗體6F2細胞株對大豆球蛋白有很高的特異性。經(jīng)間接法ELISA和Western blotting等方法鑒定鼠抗大豆球蛋白單克隆抗體,結果表明Mab6F2能識別大豆球蛋白的酸...
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)大學北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 研究目的和意義
1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
1.3 研究內(nèi)容和方法
第二章 試驗研究
試驗一 抗大豆球蛋白單克隆和多克隆抗體制備和鑒定
摘要
2.1.1 前言
2.1.2 材料與方法
2.1.3 結果與討論
2.1.4 小結
試驗二 雙抗夾心ELISA檢測大豆球蛋白方法的建立
摘要
2.2.1 前言
2.2.2 材料與方法
2.2.3 結果與討論
2.2.4 小結
試驗三 大豆種質(zhì)、大豆加工和深加工產(chǎn)品的檢測
摘要
2.3.1 前言
2.3.2 材料與方法
2.3.3 結果與討論
2.3.4 小結
第三章 結論與建議
3.1 本研究的主要結論
3.2 本研究的創(chuàng)新點
3.3 有待進一步研究的問腰
參考文獻
致謝
個人簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]大豆凝集素在模擬豬胃腸環(huán)境中的穩(wěn)定性研究[J]. 王利民,張亮亮,王彬,秦貴信. 吉林農(nóng)業(yè)大學學報. 2009(04)
[2]間接競爭ELISA檢測大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白[J]. 彭楠,劉建峰,梁運祥,葛向陽. 華中農(nóng)業(yè)大學學報. 2007(05)
[3]大豆抗原蛋白的研究進展[J]. 劉欣,馮杰. 中國飼料. 2004(20)
[4]大豆種子貯藏蛋白11S與7S組份的研究[J]. 王麗俠,郭順堂,付翠真,關榮霞,張其屬,常汝鎮(zhèn),邱麗娟. 中國糧油學報. 2004(04)
[5]大豆種子貯藏蛋白11S和7S組分的研究[J]. 黃麗華,麻浩,王顯生,崔國賢. 中國油料作物學報. 2003(03)
[6]大豆蛋白質(zhì)的構造和功能特性(上)[J]. 趙威祺. 糧食與食品工業(yè). 2003(02)
[7]大豆胰蛋白酶抑制因子酶聯(lián)免疫吸附測定方法的研究[J]. 張國龍,李德發(fā). 動物營養(yǎng)學報. 1997(01)
[8]日糧抗原與早期斷奶仔豬腹瀉的關系[J]. 陳代文. 國外畜牧科技. 1994(01)
碩士論文
[1]雙抗體夾心ELISA檢測大豆11S球蛋白方法的建立[D]. 韓景華.安徽農(nóng)業(yè)大學 2009
[2]大豆抗原在仔豬小腸組織中分布規(guī)律的研究[D]. 鮑男.吉林農(nóng)業(yè)大學 2007
本文編號:3141415
【文章來源】:中國農(nóng)業(yè)大學北京市 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:57 頁
【學位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 研究目的和意義
1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀
1.3 研究內(nèi)容和方法
第二章 試驗研究
試驗一 抗大豆球蛋白單克隆和多克隆抗體制備和鑒定
摘要
2.1.1 前言
2.1.2 材料與方法
2.1.3 結果與討論
2.1.4 小結
試驗二 雙抗夾心ELISA檢測大豆球蛋白方法的建立
摘要
2.2.1 前言
2.2.2 材料與方法
2.2.3 結果與討論
2.2.4 小結
試驗三 大豆種質(zhì)、大豆加工和深加工產(chǎn)品的檢測
摘要
2.3.1 前言
2.3.2 材料與方法
2.3.3 結果與討論
2.3.4 小結
第三章 結論與建議
3.1 本研究的主要結論
3.2 本研究的創(chuàng)新點
3.3 有待進一步研究的問腰
參考文獻
致謝
個人簡歷
【參考文獻】:
期刊論文
[1]大豆凝集素在模擬豬胃腸環(huán)境中的穩(wěn)定性研究[J]. 王利民,張亮亮,王彬,秦貴信. 吉林農(nóng)業(yè)大學學報. 2009(04)
[2]間接競爭ELISA檢測大豆11S球蛋白和7S伴球蛋白[J]. 彭楠,劉建峰,梁運祥,葛向陽. 華中農(nóng)業(yè)大學學報. 2007(05)
[3]大豆抗原蛋白的研究進展[J]. 劉欣,馮杰. 中國飼料. 2004(20)
[4]大豆種子貯藏蛋白11S與7S組份的研究[J]. 王麗俠,郭順堂,付翠真,關榮霞,張其屬,常汝鎮(zhèn),邱麗娟. 中國糧油學報. 2004(04)
[5]大豆種子貯藏蛋白11S和7S組分的研究[J]. 黃麗華,麻浩,王顯生,崔國賢. 中國油料作物學報. 2003(03)
[6]大豆蛋白質(zhì)的構造和功能特性(上)[J]. 趙威祺. 糧食與食品工業(yè). 2003(02)
[7]大豆胰蛋白酶抑制因子酶聯(lián)免疫吸附測定方法的研究[J]. 張國龍,李德發(fā). 動物營養(yǎng)學報. 1997(01)
[8]日糧抗原與早期斷奶仔豬腹瀉的關系[J]. 陳代文. 國外畜牧科技. 1994(01)
碩士論文
[1]雙抗體夾心ELISA檢測大豆11S球蛋白方法的建立[D]. 韓景華.安徽農(nóng)業(yè)大學 2009
[2]大豆抗原在仔豬小腸組織中分布規(guī)律的研究[D]. 鮑男.吉林農(nóng)業(yè)大學 2007
本文編號:3141415
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