發(fā)布時間：2021-04-11 08:29

　　生長激素（GH）可通過調(diào)節(jié)動物體內(nèi)三大營養(yǎng)物質(zhì)代謝而影響動物體的生長發(fā)育，自GH被發(fā)現(xiàn)之后人們對GH的研究越來越多，其中關于在動物體內(nèi)受GH調(diào)控的基因一直以來都是人們研究的重點。近年來，隨著二代測序技術的發(fā)展成熟，人們將其應用于生物學研究的各個方面，其中轉(zhuǎn)錄組測序由于在研究基因表達情況等方面發(fā)揮著重要作用而引起了人們的重視。本研究使用改良型的兩步膠原酶灌流法成功在四周齡AA白羽肉雞中分離出了高活性的肝臟原代細胞，使用William’s E進行培養(yǎng)發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)的細胞生長狀態(tài)良好。在成功分離出雞原代肝細胞后我們使用雞生長激素（cGH）對其進行處理，發(fā)現(xiàn)GH處理雞原代肝細胞的最佳時間是12²4h。同時對經(jīng)GH處理不同時間后雞原代肝細胞內(nèi)相關基因的表達情況進行研究，發(fā)現(xiàn)在SOCS家族中的SOCS-2、3、4和CIS的表達量在GH處理后有顯著上升，而所研究的幾個HNF家族成員的表達量在GH處理后并沒有發(fā)生顯著變化。我們采用轉(zhuǎn)錄組測序的方法來進一步系統(tǒng)研究GH處理后雞原代肝細胞中基因的表達情況。結果發(fā)現(xiàn)在GH處理組和對照組中共有164個差異表達基因。通過生物信息學分析表明差異基因... 

【文章來源】：蘇州大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

GH引起的信號通路[43]

胞核發(fā)揮著重要作用，后來隨著研究的不斷深入人們發(fā)現(xiàn)除了酪氨酸外其它一些氨基酸的磷酸化對Stats調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)錄也起到至關重要的作用，如Stat1和3的Ser727、Stat5a的Ser725、799和Stat5b的Ser730、710、193等[47, 49-51]。除了磷酸化外還有其它一些蛋白修飾形式也對Stats轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能最大化起作用，如Stats蛋白N-端精氨酸(Arg)的甲基化可通過阻斷Stats蛋白與PIAS蛋白的作用而增加轉(zhuǎn)錄效率，同時乙�；部梢栽黾愚D(zhuǎn)錄效率等[44, 52, 53]。

生長中起重要作用。另外，GH刺激下在細胞內(nèi)發(fā)揮重要作用的因子IGF含量也受到JAK-Stat5的調(diào)控。在機體內(nèi)JAK-Stats信號通路是受到嚴格的以免引起機體紊亂。有研究表明，持續(xù)激活的Stat5a和Stat5b可通過PPAR牛血清 (fetal calf serum，F(xiàn)BS)的情況下促進脂肪細胞分化[59]。在體-Stat5的負向調(diào)控主要是反饋抑制型的，即在細胞因子的刺激下促進某種達，而這種蛋白反過來又可以抑制信號通路，其中典型的例子就是SOC，SOCS家族成員可通過使JAKs失活、阻礙Stats接近受體結合位點以及使蛋白被蛋白酶體降解等多種途徑來抑制信號通路[60-62]。近期又發(fā)現(xiàn)另外成纖維細胞生長因子21 (fibroblast growth factor，F(xiàn)GF21)也可通過反饋調(diào)來抑制JAK-Stats信號通路[63]。另外還有以下幾種途徑可以負向調(diào)控JAK通路：依賴于蛋白酪氨酸磷酸酶 (protein tyrosine phosphatase，PTP)的抑依賴于活化Stats蛋白抑制因子的抑制途徑、依賴于泛素-蛋白酶體的蛋白和依賴于絲氨酸去磷酸化的抑制途徑等[64]。

【參考文獻】：
期刊論文
[1]動物GH/IGF-Ⅰ軸調(diào)控機制的研究進展[J]. 顧志良,王慧娟,郁建鋒.  中國畜牧獸醫(yī). 2011(10)
[2]實時熒光定量PCR技術綜述[J]. 鄧文星,張映.  生物技術通報. 2007(05)
[3]雞生長激素cDNA的克隆分析[J]. 李寧,邢寶東,戴茹娟,馮繼東.  中國家禽. 1997(01)



本文編號：3130923