試驗(yàn)以山羊顆粒細(xì)胞為研究對(duì)象,采集卵泡（φ2～5 mm）顆粒細(xì)胞進(jìn)行無血清培養(yǎng)2 d后,用FSH、LH（2.5 IU/mL或1.25 IU/mL）和E₂（1 mg/L）單獨(dú)或聯(lián)合處理0～96 h,分別收集細(xì)胞和培養(yǎng)液,用放射免疫分析法（RIA）檢測(cè)培養(yǎng)液中孕酮（P₄）水平,用實(shí)時(shí)熒光定量PCR（qPCR）和蛋白免疫印跡（WB）技術(shù)檢測(cè)顆粒細(xì)胞孕酮相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)。結(jié)果顯示,激素聯(lián)合或單獨(dú)處理24 h后,FSH/LH/E₂（2.5/2.5/1）組的孕酮水平與LH（2.5）組相當(dāng),均顯著高于其他4組（P<0.01）,然而,在處理48,72,96 h時(shí)間點(diǎn),各組間均無顯著性差異（P>0.05）。FSH/LH/E₂（2.5/2.5/1）組處理后72,96 h的孕酮水平極顯著低于0,24 h（P<0.01）;FSH/LH/E₂（1.25/1.25/1）組與FSH（2.5）組的孕酮水平24 h顯著下降（P<0.05）,但48 h又顯著高于24 h（P<0.... 

【文章來源】：中國獸醫(yī)學(xué)報(bào). 2020,40(08)北大核心CSCD

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【部分圖文】：

生殖激素處理對(duì)山羊黃素化顆粒細(xì)胞孕酮(P4)水平的影響(字母不同代表差異顯著)

處理24 h的StAR表達(dá)量極顯著升高(P<0.01),隨后逐漸下降;處理48 h時(shí)的基因表達(dá)量極顯著高于72,96 h時(shí)的表達(dá)量(P<0.01);處理72 h的基因表達(dá)量極顯著低于48 h 的表達(dá)量(P<0.01),且顯著低于0 h的表達(dá)量(P=0.033);處理96 h的基因表達(dá)量極顯著低于0 h 的表達(dá)量(P<0.01)(圖2C)。2.3 山羊顆粒細(xì)胞中P450scc、HSD3B和CYP19A1蛋白的表達(dá)

FSH、LH和E2聯(lián)合或單獨(dú)處理細(xì)胞24 h后,應(yīng)用WB技術(shù)檢測(cè)各組細(xì)胞P450scc、HSD3B和CYP19A1蛋白表達(dá)量(圖3A)。FSH/LH/E2(2.5/2.5/1)組的P450scc蛋白表達(dá)量與對(duì)照組相比有升高的趨勢(shì)(P=0.060 4),與其他各組相比無顯著性差異(P>0.05,圖3B);FSH/LH/E2(2.5/2.5/1)組的HSD3B蛋白表達(dá)量極顯著高于其他組(P<0.01),而其他各組間無顯著性差異(P>0.05,圖3C);而CYP19A1蛋白表達(dá)量在6個(gè)組間均無顯著性差異(P>0.05,圖3D)。3 討論

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]雌二醇對(duì)奶牛子宮內(nèi)膜組織中結(jié)締組織生長因子基因表達(dá)的影響[J]. 李茜如,錢英紅,毛偉,劉博,張雙翼,沈媛,曹金山.  畜牧與飼料科學(xué). 2017(10)
[2]FSH、LH及E2對(duì)綿羊卵泡顆粒細(xì)胞孕酮分泌的影響[J]. 菅瑞珍,楊燕燕,溫世勇,孟慶剛,程蘭玲,李文佼,阿娜,李海軍,杜晨光,曹貴方.  黑龍江畜牧獸醫(yī). 2013(13)
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[4]促性腺激素和孕酮誘發(fā)離體灌流卵巢排卵的研究[J]. 李贊東,田中耕作,古賀修.  畜牧獸醫(yī)學(xué)報(bào). 1992(03)

碩士論文
[1]Ghrelin在綿羊顆粒細(xì)胞擬黃體化過程中的作用[D]. 菅瑞珍.內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué) 2013



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